발덴스트롬병의 재발성 돌연변이 검출 (DigiWAL)

MYD88의 L265P 돌연변이는 발덴스트룀병 발생 시 초기 발암성 사건으로 나타나며, 질병의 두 단계 사이의 연속체를 시사하는 IgM 단계에 대한 MGUS(단클론성 미확인 감마병증)에서 이미 존재할 수 있습니다. 질병의 표지자로서 IgM을 결정하는 것은 클론 집단의 직접적인 정량화를 허용하지 않고 저조한 분비 형태의 경우 이를 실패하기 때문에 한계가 있습니다. 따라서 MYD88의 L265P 돌연변이를 최소 잔류 질병의 마커로 모니터링하는 것은 이러한 질병에 대한 주요 관심사의 바이오마커인 것으로 보입니다. 특히 치료 중 이 마커의 동역학은 초기 단계에서 환자의 치료 관리를 수정하고 치료에 대한 내성의 위험을 평가할 수 있게 합니다.

공개된 여러 연구는 특히 대립 유전자 특이적 PCR에 의한 돌연변이의 정량화에 의해 MW에서 MYD88의 L265P 돌연변이를 모니터링하는 것에 대한 관심을 보여줍니다. 연구된 검출 한계는 0.1%였습니다. 새로운 기술, 특히 디지털 PCR의 최근 개발로 최소 잔류 질병 모니터링의 개념과 더 잘 호환될 수 있는 더 낮은 검출 임계값을 얻을 수 있습니다.

이 연구의 독창성은 영향을 받는 모든 생물학적 구획(혈액, 혈장, 골수 또는 CD19+ 세포)에서 MYD88 L265P 돌연변이의 정량화 비교를 기반으로 하지만 특히 최소 잔여 질병의 두 지점에서 돌연변이를 모니터링하는 데 있습니다. 치료 중간 및 치료 종료).

프로젝트의 일부 중 하나는 순환 종양 DNA(ctDNA)에서 MYD88 유전자의 L265P 돌연변이의 대립형질 빈도에 대한 연구입니다. 많은 병리학, 특히 Hodgkin 림프종 또는 미만성 대세포 B 림프종과 같은 다른 B 림프구성 혈액학에서 종양 수준에 존재하는 돌연변이가 순환하는 종양 DNA에서 발견될 수 있음이 밝혀졌습니다. 따라서 환자의 혈장에서 순환하는 자유 종양 DNA의 분석은 골수 조영술이나 골수 생검보다 덜 침습적인 샘플로 분자 수준에서 질병을 특성화하는 데 사용될 수 있습니다. 다른 관련 돌연변이에 대한 검색은 또한 프로젝트의 독창성을 강화합니다. 이러한 결합된 데이터는 환자의 임상 관리에 변화를 가져올 수 있어야 합니다.

본 연구에서는 MYD88의 L265P 돌연변이 대립유전자 빈도를 비교하고자 한다. 3가지 다른 기술: 특정 대립유전자 PCR, 디지털 PCR 및 차세대 시퀀싱. 이러한 방식으로 연구자들은 잔여 질환에 대한 마커로 사용될 최고의 민감도와 특이도를 가진 기술을 평가할 것입니다. 이 데이터는 참조 기술인 단백질 전기영동과 비교됩니다. 이 평가는 전체 단핵 세포, DNAct, 골수 및 CD19+ 분류 세포에서 수행됩니다. 그런 다음 연구자는 치료 중간 및 치료 종료의 두 시점에서 치료 중 이 돌연변이의 동역학을 따를 것입니다.

이러한 종양의 돌연변이 프로필의 특성화는 예후 인자를 정의할 수 있게 하고 잠재적인 새로운 치료 표적을 식별할 수 있습니다. 이 연구는 차세대 시퀀싱에 의해 실현될 것입니다. CXCR4와 같이 치료 저항성과 관련된 돌연변이가 있는 일부 유전자가 연구될 것입니다. CXCR4의 돌연변이는 이브루티닙에 대한 내성에 관여합니다. ARID1A 돌연변이는 TP53, KMT2D, CD79B, MYBBP1A 돌연변이뿐만 아니라 20%의 경우에서도 발견됩니다.