Detección de mutaciones recurrentes en la enfermedad de Waldenström (DigiWAL)

La mutación L265P de MYD88 aparece como un evento oncogénico temprano en la aparición de la enfermedad de Waldenström y es posible que ya esté presente en el estadio de gammapatía monoclonal de significado indeterminado (MGUS) a IgM, lo que sugiere un continuo entre los dos estadios de la enfermedad. La determinación de IgM como marcador de la enfermedad tiene límites ya que no permite la cuantificación directa de la población clonal y se toma en su defecto en el caso de formas poco secretoras. Por lo tanto, el seguimiento de la mutación L265P de MYD88 como marcador de enfermedad residual mínima parece ser un biomarcador de gran interés en estas enfermedades. La cinética de este marcador particularmente durante el tratamiento podría permitir modificar el manejo terapéutico de los pacientes en una etapa temprana y evaluar el riesgo de resistencia al tratamiento.

Varios estudios publicados muestran el interés de monitorizar la mutación L265P de MYD88 en MW en particular mediante la cuantificación de la mutación mediante PCR específica de alelo. El límite de detección estudiado fue del 0,1%. El reciente desarrollo de nuevas técnicas y en particular de la PCR digital permite obtener umbrales de detección más bajos que podrían ser más compatibles con la noción de seguimiento mínimo de la enfermedad residual.

La originalidad de este estudio se basa en la comparación de la cuantificación de la mutación MYD88 L265P en todos los compartimentos biológicos afectados (sangre, plasma, médula ósea o células CD19+) pero especialmente en el seguimiento de la mutación en dos puntos de enfermedad residual mínima ( a mitad de tratamiento y al final del tratamiento).

Una de las partes del proyecto es el estudio de la frecuencia alélica de la mutación L265P del gen MYD88 en el ADN tumoral circulante (ctDNA). Se ha demostrado en muchas patologías y en particular en otras hematologías linfocíticas B como el linfoma de Hodgkin o el linfoma B difuso de células grandes, que mutaciones presentes a nivel tumoral podrían encontrarse en el ADN tumoral circulante. Por lo tanto, el análisis del ADN tumoral libre que circula en el plasma de los pacientes puede utilizarse para caracterizar la enfermedad a nivel molecular con una muestra menos invasiva que el mielograma o las biopsias de médula ósea. La búsqueda de otras mutaciones asociadas también refuerza la originalidad del proyecto. Estos datos combinados deben ser capaces de conducir a cambios en el manejo clínico de los pacientes.

En este estudio se comparará la frecuencia alélica de la mutación L265P de MYD88. mediante 3 técnicas diferentes: PCR de alelo específico, PCR digital y secuenciación de nueva generación. De esta forma, los investigadores evaluarán la técnica que tenga la mejor sensibilidad y especificidad para ser utilizada como marcador de enfermedad residual. Estos datos se compararán con la técnica de referencia, la electroforesis de proteínas. Esta evaluación se realizará en células mononucleares totales, DNAct, médula y células clasificadas CD19+. Luego, los investigadores seguirán la cinética de esta mutación durante el tratamiento en dos puntos: mitad del tratamiento y final del tratamiento.

La caracterización del perfil de mutación de estos tumores permite definir factores pronósticos y puede identificar posibles nuevas dianas terapéuticas. Este estudio se realizará mediante secuenciación de nueva generación. Se estudiarán algunos de los genes con mutaciones implicadas en la resistencia al tratamiento, como CXCR4. Las mutaciones de CXCR4 están implicadas en la resistencia a ibrutinib. Las mutaciones ARID1A también se encuentran en el 20% de los casos, así como las mutaciones TP53, KMT2D, CD79B, MYBBP1A.