Påvisning av tilbakevendende mutasjoner i Waldenströms sykdom (DigiWAL)

L265P-mutasjonen av MYD88 fremstår som en tidlig onkogen hendelse i forekomsten av Waldenströms sykdom og kan allerede være tilstede ved Monoclonal Gammapathy of Undetermined Signification (MGUS) til IgM-stadiet, noe som antyder et kontinuum mellom de to stadiene av sykdommen. Bestemmelsen av IgM som en markør for sykdommen har grenser siden den ikke tillater direkte kvantifisering av den klonale populasjonen og tas i mangel av dette i tilfelle av dårlig utskillende former. Overvåking av L265P-mutasjonen av MYD88 som en markør for minimal gjenværende sykdom ser derfor ut til å være en biomarkør av stor interesse for disse sykdommene. Kinetikken til denne markøren, spesielt under behandling, kan gjøre det mulig å modifisere den terapeutiske behandlingen av pasienter på et tidlig stadium og å vurdere risikoen for resistens mot behandling.

Flere publiserte studier viser interessen for å overvåke L265P-mutasjonen av MYD88 i MW, spesielt ved kvantifisering av mutasjonen ved allelspesifikk PCR. Deteksjonsgrensen som ble studert var 0,1 %. Den nylige utviklingen av nye teknikker og spesielt digital PCR gjør det mulig å oppnå lavere deteksjonsterskler som kan være mer forenlig med ideen om minimal restsykdomsovervåking.

Originaliteten til denne studien er basert på sammenligningen av kvantifiseringen av MYD88 L265P-mutasjonen i alle berørte biologiske avdelinger (blod, plasma, benmarg eller CD19+ celler), men spesielt i overvåking av mutasjonen ved to punkter med minimal gjenværende sykdom ( midt i behandlingen og slutten av behandlingen).

En av delene av prosjektet er studiet av den alleliske frekvensen av L265P-mutasjonen av MYD88-genet i sirkulerende tumor-DNA (ctDNA). Det har blitt vist i mange patologier og spesielt i andre B-lymfocytiske hematologier som Hodgkins lymfom eller diffust storcellet B-lymfom, at mutasjoner tilstede på tumornivå kan finnes i sirkulerende tumor-DNA. Analyse av fritt tumor-DNA som sirkulerer i pasientens plasma kan derfor brukes til å karakterisere sykdommen på molekylært nivå med en mindre invasiv prøve enn myelogram eller benmargsbiopsier. Jakten på andre assosierte mutasjoner forsterker også originaliteten til prosjektet. Disse kombinerte dataene skal kunne føre til endringer i den kliniske håndteringen av pasienter.

I denne studien vil allelfrekvensen til L265P-mutasjonen til MYD88 bli sammenlignet. ved 3 forskjellige teknikker: spesifikk allel PCR, digital PCR og ny generasjons sekvensering. På denne måten vil etterforskerne vurdere teknikken som har best sensitivitet og spesifisitet til å brukes som markør for gjenværende sykdom. Disse dataene vil bli sammenlignet med referanseteknikken, proteinelektroforese. Denne evalueringen vil bli utført i totale mononukleære celler, DNAct, marg og CD19+ sorterte celler. Deretter vil etterforskerne følge kinetikken til denne mutasjonen under behandlingen på to punkter: midt i behandlingen og slutten av behandlingen.

Karakterisering av mutasjonsprofilen til disse svulstene gjør det mulig å definere prognostiske faktorer og kan identifisere potensielle nye terapeutiske mål. Denne studien vil bli realisert ved ny generasjons sekvensering. Noen av gener med mutasjoner involvert i behandlingsresistens vil bli studert som CXCR4. Mutasjonene av CXCR4 er involvert i motstanden mot ibrutinib. ARID1A-mutasjoner finnes også i 20% av tilfellene samt TP53, KMT2D, CD79B, MYBBP1A mutasjoner.