ＴＩＴｉｎｏｐａｔｈｙが疑われるＭＹＯｐａｔｈｙ患者における診断および表現型遺伝子型相関研究の改善 (DIAMYOTIT)

チチノパシーは、サルコメアの巨大な弾性タンパク質であるタイチンの変化による遺伝性の骨格および心臓のミオパシーです。 次世代シーケンシング (NGS) が広く使用されているため、タイチン遺伝子 (TTN) は神経筋障害 (NMD) の主要な原因遺伝子として浮上しており、臨床的および対立遺伝子の異質性が高い。 チチノパシーの表現型の変動性および劣性または優性の遺伝様式の根底にあるメカニズムはよくわかっていません。 それらは、サルコメアの形成と安定性、および他のタンパク質との相互作用に関するタイチンの原始的な構造機能に関与しています。 TTN におけるバリアントの影響は、可変、サイレント、劣性、または優性であり、バイオインフォマティクス ツールは、それらの機能的影響を解釈するのに実際には効率的ではないため、解釈が非常に困難です。 さらに、TTNバリアントは一般集団で非常に頻繁に発生します。 タイチンの巨大なサイズ (3700kD) と複雑さのために、転写産物とタンパク質に対する TTN バリアントの結果の分析は一般的に行われていません。 国際社会には、診断テストとしてタイチンのウェスタンブロット (WB) 分析を提案するチームはほとんどありませんが、フランスにはチームがありません。 さらに、この検査では、まれな状況である切断型変異による劣性チチノパチーの診断のみを確認できます (

このプロジェクトは、当社の NGS 診断結果に基づいており、進行中の AFM 資金提供プロジェクト (アプリケーション 19958) の継続となります。 NGS によって、骨格性ミオパシー (心筋症の有無にかかわらず) の患者で、TTN バリアントを引き起こす可能性のあるいくつかの疾患を特定しました。 AFM が資金提供したプロジェクトのおかげで、いくつかの TTN バリアントがスプライシングに及ぼす影響を分析し、現在、タイチン WB を実行するための実験条件を実装しています。 さらに、病原性が疑われる TTN のほとんどの非切断変異体は、ミオシン重鎖 (MHC) と相互作用するタイチン ドメインに位置することを観察しました。 それらがサルコメアにおけるタイチンと MHC 間の相互作用の安定性に有害な影響を与える可能性があるという仮説では、タイチン-ミオシン相互作用におけるそれらの結果を評価する機能テストを実施する予定です。

現在のプロジェクトの具体的な目的は、診断アプローチを改善し、遺伝様式と表現型との相関研究を行うために、転写産物とタンパク質に対するTTNバリアントの影響を評価する機能研究を実施することです。 このプロジェクトの革新的な側面は、RNA (患者の骨格筋におけるタイチン転写産物の転写および/またはスプライシングに対する影響の評価)、タンパク質 (タイチン量に対するすべての TTN バリアントの影響の評価) に対するいくつかの分子的および生化学的アプローチの組み合わせです。およびサイズ、筋肉生検のWB分析による）およびタンパク質間相互作用（MHCとの相互作用に対するタイチン-MHC相互作用ドメインにあるTTNバリアントの病原性影響の評価）、学術研究プロジェクトで報告された技術に基づいて実装します. 私たちのプロジェクトの強みは、神経内科医、神経小児科医、病理学者、その他の生物学的専門家との強力なネットワーク、NMDs の地域間参照センターおよびチチノパシーの全国ネットワーク内の組織内にもあります。神経学者 (Dr Morales) の博士論文を通じて、表現型と遺伝子型の相関研究を実施しました。

TTN 遺伝子で同定されたバリアントの機能研究は、患者の診断に強い影響を与えるはずであり、それはその管理と家族の遺伝カウンセリングにとって重要です。 実装されたテストは、フランスのチチノパシー ネットワークで利用できるようになります。 これは、明確な診断のない多数の患者の診断を解決し、ミオパシーにおけるチチノパチーの関与の頻度を特定するはずです。 チチノパシーの診断の改善は、反復的な診断テストによるコストを削減するため、社会経済的な影響が大きくなります。

表現型と遺伝子型の相関研究により、チチノパシーの変異と臨床スペクトルを拡大し、チチノパシーの分子基盤を理解するための国際的な取り組みに参加することができます。これは、治療アプローチを考案するための必須の最初のステップです。 さらに、遺伝子の確認により、患者の組織に由来するチタン症の細胞モデルを開発する道が開かれます。 これらのモデルは、チチノパフィのメカニズムを解読し、薬理学的治療の標的となる可能性のある代謝経路を指摘するためのプロテオミクスおよびその他の機能研究の基礎となります。

これらの理由から、本出願は、チチノパシーの診断および分子基盤の知識に貢献するための、主要で独創的かつ革新的な開発を構成する。