TITinopathy가 의심되는 MYOpathy 환자의 DIAgnostic 및 Phenotype-genotype Correlation 연구의 개선 (DIAMYOTIT)

Titinopathies는 sarcomere의 거대한 탄성 단백질인 titin의 변형으로 인한 유전성 골격 및 심장 근병증입니다. 차세대 시퀀싱(NGS)의 광범위한 사용으로 인해 티틴 유전자(TTN)는 임상적 및 대립형질 이질성이 높은 신경근 장애(NMD)의 주요 원인 유전자로 부상하고 있습니다. phenotypic variability의 기본 메커니즘과 titinopathies의 열성 또는 우성 상속 방식은 잘 알려져 있지 않습니다. 그들은 sarcomere의 형성과 안정성뿐만 아니라 다른 단백질과의 상호 작용에 대한 titin의 원시 구조적 기능을 포함합니다. TTN에서 변이체의 효과는 가변적이며, 침묵, 열성 또는 지배적이며, 생물정보학 도구는 기능적 영향을 해석하는 데 실제로 효율적이지 않아 해석하기가 매우 어렵습니다. 또한 TTN 변종은 일반 인구에서 매우 빈번합니다. 거대한 크기(3700kD)와 티틴의 복잡성으로 인해 전사체 및 단백질에 대한 TTN 변이체의 결과 분석은 일반적으로 수행되지 않습니다. 국제 사회에는 소수의 팀이 있지만 프랑스에는 진단 테스트로 티틴에 대한 WB(Western-blot) 분석을 제안하는 팀이 없습니다. 또한, 이 검사는 드문 경우인 절단 돌연변이로 인한 열성 역가분비증에 대해서만 진단을 확인할 수 있습니다.

이 프로젝트는 NGS 진단 결과에서 나온 것이며 진행 중인 AFM 자금 지원 프로젝트(신청서 19958)의 연속이 될 것입니다. 우리는 NGS에 의해 골격근병증(심근병증이 있거나 없는) 환자에서 TTN 변이를 유발하는 몇 가지 잠재적인 질병을 확인했습니다. AFM 자금 지원 프로젝트 덕분에 접합에 대한 일부 TTN 변형의 결과를 분석했으며 현재 WB를 수행하기 위한 실험 조건을 구현하고 있습니다. 또한, 우리는 병원성이 의심되는 TTN의 대부분의 절단되지 않는 변이체가 미오신 중쇄(MHC)와 상호 작용하는 티틴 도메인에 위치한다는 것을 관찰했습니다. 그들이 sarcomere에서 titin과 MHC 사이의 상호 작용의 안정성에 해로운 영향을 미칠 수 있다는 가설에서 우리는 titin-myosin 상호 작용에서 그 결과를 평가하기 위해 기능 테스트를 구현할 계획입니다.

본 프로젝트의 구체적인 목표는 TTN 변이체가 전사체와 단백질에 미치는 영향을 평가하여 진단적 접근법을 개선하고 유전 방식과 표현형과의 상관관계 연구를 수행하는 기능적 연구를 구현하는 것입니다. 프로젝트의 혁신적인 측면은 RNA(환자의 골격근에서 티틴 전사체에 대한 전사 및/또는 스플라이싱에 대한 영향 평가), 단백질(티틴 양에 대한 모든 TTN 변이체의 영향 평가)에 대한 여러 분자 및 생화학적 접근법의 조합입니다. 및 크기, 근육 생검에 대한 WB 분석) 및 단백질-단백질 상호작용(MHC와의 상호작용에 대한 티틴-MHC 상호작용 도메인에 위치한 TTN 변이체의 병원성 영향 평가)은 학술 연구 프로젝트에서 보고된 기술을 기반으로 구현할 것입니다. . 우리 프로젝트의 강점은 신경과 전문의, 신경 소아과 의사, 병리학자 및 기타 생물학적 전문가와의 강력한 네트워크, NMD의 지역 간 참조 센터 조직 및 티티노병증의 국가 네트워크, 그리고 신경과 전문의(Dr Morales)가 박사 논문을 통해 표현형-유전자형 상관관계 연구를 수행했습니다.

TTN 유전자에서 확인된 변이체에 대한 기능적 연구는 환자의 진단에 강력한 영향을 미치며, 이는 관리 및 가족 유전 상담에 중요합니다. 구현된 테스트는 프랑스의 titinopathies 네트워크에서 사용할 수 있습니다. 이것은 명확한 진단 없이 많은 수의 환자의 진단을 해결하고 근병증에서 티티노병증의 관여 빈도를 지정해야 합니다. 티티노병증의 진단 개선은 반복적인 진단 검사로 인한 비용을 절감할 수 있기 때문에 사회경제적 영향이 클 것입니다.

표현형-유전자형 상관관계 연구를 통해 티티노병증의 돌연변이 및 임상 스펙트럼을 확장하고 티티노병증의 분자 기반을 이해하기 위한 국제적 노력에 참여할 수 있으며, 이는 치료적 접근법을 고안하기 위한 필수 첫 번째 단계입니다. 또한 유전적 확인은 환자의 조직에서 파생된 티틴병증의 세포 모델을 개발할 수 있는 길을 열어줍니다. 이러한 모델은 약리학적 치료의 대상이 될 수 있는 대사 경로를 가리키고 티티노파피의 메커니즘을 해독하기 위한 단백질 및 기타 기능 연구의 기초가 될 것입니다.

이러한 이유로, 본 출원은 티티노병증의 분자적 기초에 대한 지식 및 진단에 기여하는 주요하고 독창적이며 혁신적인 개발을 구성할 것입니다.