多発性骨髄腫の生物学における eNAMPT を調査し、疾患の進行におけるその役割を確立する

背景および予備データ:

多発性骨髄腫 (MM) は、骨髄 (BM) 内での悪性形質細胞のクローン増殖と、BM の内外への腫瘍細胞の継続的な広がりを特徴としています。 BM 間質細胞 (BMSC) と MM 細胞の間の継続的な相互作用は、腫瘍細胞の増殖、生存、移動、および薬剤耐性をサポートします。 実際、BMSCはサイトカイン産生と細胞間相互作用の両方によってMM細胞が血流に入る能力を制御し、クローン細胞の遠隔組織へのホーミングまたは血管外遊出を引き起こし、その結果新たなBMニッチが形成される。

上皮間葉転換 (EMT) は、細胞間接着および細胞極性の破壊、細胞骨格の再構築、および細胞マトリックス接着の変化を通じて上皮細胞が間葉表現型に切り替わる生物学的現象です。 全体として、これらの事象は、影響を受けた細胞の遊走性および浸潤性の改善につながります。 注目すべきことに、EMTは正常な胚発生と組織再生中に生理学的に発生しますが、がん細胞では浸潤、転移、幹細胞性、薬剤耐性などの腫瘍攻撃性の特徴と関連しています。 EMT は固形腫瘍で一般的に観察されますが、最近では MM でも報告されています。 このような状況において、BMニッチに関連した低酸素症がEMT様の特徴の獲得を通じてMM細胞の脱出と播種を引き起こし、それが次にCXCR4発現の増加により髄外疾患（EMD）の発症を引き起こすことが研究によって示されている。

細胞代謝の変化は、がんの特徴の 1 つとして浮上しており、新しい治療アプローチの標的となる可能性があります。 これらの変化の中で、ニコチンアミドアデニン ジヌクレオチド (NAD+) の生合成は、腫瘍における新規の治療標的として浮上しています。 哺乳動物細胞におけるニコチンアミド (NAM) からの NAD+ 産生の律速酵素であるニコチンアミド ホスホリボシルトランスフェラーゼ (NAMPT) は、MM を含む癌で頻繁に上方制御されており、潜在的な治療標的としてのその関連性が私たちのグループによって広く研究されてきました。 しかし、NAMPT は重要な代謝酵素としての細胞内活性のほかに、細胞外環境にも存在し、そこで eNAMPT としてサイトカイン/アディポカイン様作用を発揮します。 eNAMPT分泌の根底にあるメカニズムはまだ解明されていないが、eNAMPT分泌と細胞内NAMPTレベルの間に正の相関があることは一般に受け入れられている。 最近の証拠は、いくつかの血液腫瘍および固形腫瘍において、がん患者の eNAMPT 血漿レベルが健康なドナーと比較して著しく高いことを示しています。 これに関連して、eNAMPTは、新血管新生を促進し、免疫応答に影響を与えることにより、がん細胞の増殖やコロニー形成の促進、アポトーシスに対する耐性の付与、腫瘍微小環境の形成などの腫瘍形成促進効果を発揮することが判明しました。

研究者らは最近、ヒト乳がん細胞におけるEMTの獲得においてeNAMPTが果たす極めて重要な役割を実証した。 詳細には、NAMPTの過剰発現は、N-カドヘリン、ビメンチンおよびZEB1の上方制御に関連してE-カドヘリン発現を低下させることにより、がん細胞の線維芽細胞様形態の獲得を促進します。 重要なことに、NAMPT 誘発 EMT は NAMPT 酵素活性と関連しておらず、その生成物レベルのニコチンアミド モノヌクレオチド (NMN) とも関連していません。 逆に、EMTは、TGFβ1産生の増加を介してTGFβシグナル伝達経路を活性化する能力を介してeNAMPTによって媒介されるようです。

これまでの観察に基づいて、研究者らはMM生物学におけるeNAMPTをさらに調査し、EMTの獲得ががんの特徴である疾患の進行におけるその役割を確立することを計画している。 この提案から得られる結果は、そのような悪性腫瘍の新たな生物学的脆弱性を特定し、疾患進行モニタリングのための革新的なバイオマーカーも特定することが期待されます。

研究者らは、新たに診断された多発性骨髄腫（NDMM）患者（n=20）と健康なドナー（HD、n=6）のPBサンプル中のeNAMPT血清レベルを予備測定した。 興味深いことに、腫瘍では対照よりも eNAPMT レベルが有意に高いことが判明し、MM 生物学におけるこのサイトカインの関連する役割が示唆されました。 これらのデータは、MM における eNAMPT の役割をさらに調査するための理論的根拠を提供します。

サンプルコレクション:

MM 患者の遡及的サンプルは 2 つの異なるデータベース (UNITO と UNIGE) から抽出され、分析される疾患のさまざまな段階をカバーするために、このプロジェクト専用の新しい特定のデータベースに統合されます。

収録サンプルの選定・調整はUNITOが行います。 UNITO は、この研究に必要な数のサンプルを提供することができます。 最終的には、過去 5 年間に実施された以前の臨床試験から、独立した代表的な 100 MM 患者サンプルのセットが選択されます。

一般に、サンプルは次のパラメータを満たします。

• 18歳以上の男性および女性の患者。
• さまざまな疾患段階で収集された PB 由来血清サンプル (MGUS、SMM、NDMM、および RRMM MM 患者)
• 十分な CD138+ 細胞または CD138+ 細胞からの RNA が利用可能です。
• 2 年以上の生存期間中央値データと治療データが利用可能（無増悪生存期間および全生存期間）。
• 対象となる治療の開始前に採取された骨髄サンプル。
• 患者は研究目的でサンプルを使用することに同意しています。

利用可能なサンプルと臨床データの実現可能性評価と検出力分析は、サンプルの元となる利用可能な臨床試験ごとに実行されます。 この評価は、治療効果の予測に科学的および統計的に適切な証拠を提供するデータセットを決定、選択、構築するために実行されます。 分析される選択された治療レジメン（薬剤の組み合わせ）は、プロテアソーム阻害剤、免疫調節薬（IMiD）、アルキル化剤、HDAC阻害剤、モノクローナル抗体など、MM治療クラスの全範囲をカバーします。 患者サンプルは対照臨床試験から採取され、以下の薬剤または組み合わせのいずれかに基づいて、同じ治療レジメンを受けた患者を含む異なる治療群から選択されます: ボルテゾミブ (プロテアソーム阻害剤)、カーフィルゾミブ (プロテアソーム阻害剤)、サリドマイド (IMiD)、レナリドマイド (IMiD)、ポマリドマイド (IMiD)、メルファラン (アルキル化剤)、パナビノスタット (HDAC 阻害剤)、およびダラツムマブ (モノクローナル抗体)。

サンプルサイズの推定は、十分に大きなグループに対する特定の治療に対する陽性例と陰性例の間の生存率の差を有意に判定できるというこれまでの経験に基づいています。 効果量が少なくとも 3 で、サブタイプの発生率が 20% であるとすると、サブタイプの予測値を有意に決定するには、グループ サイズ 100 件で十分です。 （効果の大きさや発生率が小さい場合は、臨床的に関連性が低い可能性があります）。