다발성 골수종 생물학에서 eNAMPT를 조사하고 질병 진행에서의 역할 확립

배경 및 예비 데이터:

다발성 골수종(MM)은 BM 안팎으로 종양 세포가 지속적으로 확산되는 골수(BM)에서 악성 형질 세포의 클론 확장을 특징으로 합니다. BM 간질 세포(BMSC)와 MM 세포 사이의 지속적인 상호 작용은 종양 세포의 증식, 생존, 이동 및 약물 내성을 지원합니다. 실제로, 사이토카인 생산 및 세포-세포 상호작용에 의한 BMSC는 MM 세포가 혈류로 들어가는 능력을 제어하여 클론 세포가 원거리 조직으로 귀소 또는 혈관외유출되어 새로운 BM 틈새 형성을 초래합니다.

상피-중간엽 전이(EMT)는 세포-세포 부착 및 세포 극성의 파괴, 세포골격의 리모델링 및 세포-기질 부착의 변화를 통해 상피 세포가 중간엽 표현형으로 전환될 수 있는 생물학적 현상입니다. 전반적으로, 이러한 이벤트는 영향을 받는 세포의 향상된 이동성 및 침습성 특성으로 이어집니다. 놀랍게도, EMT는 정상적인 배아 발생 및 조직 재생 중에 생리학적으로 발생하지만, 암세포에서는 침윤, 전이, 줄기 및 약물 내성을 포함한 종양 공격성 특징과 관련이 있습니다. EMT는 고형 종양에서 일반적으로 관찰되지만 최근에는 MM에서도 기술되었습니다. 이러한 맥락에서 연구에 따르면 BM 틈새 관련 저산소증은 EMT 유사 기능의 획득을 통해 MM 세포 유출 및 전파를 생성하며, 이는 차례로 CXCR4 발현을 증가시켜 골수외 질환(EMD) 발달을 유발합니다.

세포 대사의 변화는 새로운 치료 접근법의 표적이 될 수 있는 암의 특징 중 하나로 나타났습니다. 이러한 변화 중에서 NAD+(nicotinamide adenine dinucleotide)의 생합성이 종양의 새로운 치료 표적으로 떠오르고 있습니다. 포유류 세포에서 니코틴아미드(NAM)로부터 NAD+ 생산을 위한 속도 제한 효소인 NAMPT(Nicotinamide phosphorybosyltransferase)는 MM을 포함한 암에서 자주 상향 조절되며 잠재적인 치료 표적으로서의 관련성은 우리 그룹에서 광범위하게 탐구되었습니다. 그러나 NAMPT는 주요 대사 효소로서의 세포내 활동 외에도 eNAMPT로서 사이토카인/아디포카인 유사 작용을 발휘하는 세포외 환경에도 존재합니다. eNAMPT 분비의 기본 메커니즘은 아직 밝혀지지 않았지만 eNAMPT 분비와 세포 내 NAMPT 수준 사이에 양의 상관관계가 있다는 것이 일반적으로 받아들여지고 있습니다. 최근 증거에 따르면 eNAMPT 혈장 수치는 여러 혈액학적 및 고형 신생물의 건강한 기증자와 비교하여 암 환자에서 상당히 더 높습니다. 이러한 맥락에서 eNAMPT는 신생혈관형성을 촉진하고 면역 반응에 영향을 미침으로써 암세포 증식 및 콜로니 형성 촉진, 세포사멸에 대한 저항성 부여, 종양 미세환경 형성과 같은 전종양 형성 효과를 발휘하는 것으로 밝혀졌습니다.

연구자들은 최근 인간 유방암 세포에서 EMT 획득에 있어 eNAMPT가 수행하는 중추적인 역할을 입증했습니다. 구체적으로, NAMPT 과발현은 N-cadherin, Vimentin 및 ZEB1 상향 조절과 관련하여 E-cadherin 발현을 감소시켜 암세포의 섬유아세포 유사 형태 획득을 촉진합니다. 중요하게도, NAMPT로 유도된 EMT는 NAMPT 효소 활성과 관련이 없으며 제품 수준인 NMN(니코틴아미드 모노뉴클레오티드)과도 관련이 없습니다. 반대로, EMT는 증가된 TGFβ1 생성을 통해 TGFβ 신호 전달 경로를 활성화하는 능력을 통해 eNAMPT에 의해 매개되는 것으로 보입니다.

우리의 이전 관찰에 기초하여 여기에서 연구자들은 MM 생물학에서 eNAMPT를 추가로 조사하고 EMT 획득이 암의 ​​특징을 나타내는 질병 진행에서 eNAMPT의 역할을 확립할 계획입니다. 제안서에서 파생된 결과는 이러한 악성 종양의 새로운 생물학적 취약성과 질병 진행 모니터링을 위한 혁신적인 바이오마커를 식별할 수 있기를 바랍니다.

연구자들은 새로 진단된 다발성 골수종(NDMM)(n=20) 환자와 건강한 기증자(HD; n=6)의 PB 샘플에서 예비 측정된 eNAMPT 혈청 수준을 가지고 있습니다. 흥미롭게도, eNAPMT 수준은 MM 생물학에서 이 사이토카인의 관련 역할을 가리키는 대조군보다 종양에서 상당히 더 높은 것으로 밝혀졌습니다. 이 데이터는 MM에서 eNAMPT 역할에 대한 추가 조사에 대한 이론적 근거를 제공합니다.

샘플 수집:

MM 환자의 후향적 샘플은 두 개의 서로 다른 데이터베이스(UNITO 및 UNIGE)에서 파생되고 분석할 질병의 여러 단계를 다루기 위해 이 프로젝트 전용의 새로운 특정 데이터베이스로 결합됩니다.

UNITO는 포함될 샘플의 선택을 조정하고 수행합니다. UNITO는 이 연구에 필요한 샘플 수를 제공할 수 있습니다. 궁극적으로 지난 5년 동안 수행된 이전 임상 시험에서 독립적이고 대표적인 100개의 MM 환자 샘플 세트가 선택됩니다.

일반적으로 샘플은 다음 매개변수를 충족합니다.

• 18세 이상의 남녀 환자;
• 다양한 질병 단계에서 수집된 PB 유래 혈청 샘플(MGUS, SMM, NDMM 및 RRMM MM 환자)
• 충분한 CD138+ 세포 또는 CD138+ 세포의 RNA를 사용할 수 있습니다.
• ≥ 2년 중앙 생존 데이터 및 치료 데이터가 이용 가능합니다(무진행 및 전체 생존).
• 관심 치료를 시작하기 전에 획득한 골수 샘플
• 환자는 연구 목적으로 샘플을 사용하는 데 동의했습니다.

사용 가능한 샘플 및 임상 데이터의 타당성 평가 및 전력 분석은 샘플이 유래할 각각의 사용 가능한 임상 시험에 대해 수행됩니다. 이 평가는 치료 효과 예측을 위해 과학적 및 통계적으로 건전한 증거를 제공하는 데이터 세트를 결정, 선택 및 구축하기 위해 수행됩니다. 분석할 선택된 치료 요법(약물의 조합)은 프로테아좀 억제제, 면역 조절 약물(IMiD), 알킬화제, HDAC 억제제 및 단일 클론 항체를 포함하여 MM 치료 클래스의 전체 스펙트럼을 포괄합니다. 환자 샘플은 통제된 임상 시험에서 파생되며 다음 약물 또는 조합 중 하나를 기반으로 동일한 치료 요법을 받은 환자를 포함하는 다양한 치료 그룹에서 선택됩니다: Bortezomib(프로테아좀 억제제), Carfilzomib(프로테아좀 억제제), 탈리도마이드(IMiD), 레날리도마이드(IMiD), 포말리도마이드(IMiD), 멜팔란(알킬화제), 파나비노스타트(HDAC 억제제), 다라투무맙(단클론 항체).

샘플 크기 추정은 충분히 큰 그룹에 대한 특정 치료에 대한 양성 사례와 음성 사례 간의 생존 차이를 유의하게 결정할 수 있는 이전 경험을 기반으로 합니다. 최소 3의 효과 크기와 20%의 하위 유형 발생률이 주어지면 100개의 사례 그룹 크기는 하위 유형의 예측 값을 유의하게 결정하기에 충분합니다. (더 작은 효과 크기와 더 작은 발생률은 임상적으로 관련이 없을 가능성이 높습니다).