Undersøg eNAMPT i multipelt myelombiologi og fastslå dets rolle i sygdomsprogression

Baggrund og foreløbige data:

Myelomatose (MM) er karakteriseret ved en klonal ekspansion af maligne plasmaceller i knoglemarven (BM) med en kontinuerlig spredning af tumorceller ind og ud af BM. En kontinuerlig interaktion mellem BM-stromaceller (BMSC'er) og MM-celler understøtter spredning, overlevelse, migration og lægemiddelresistens af tumorceller. Faktisk kontrollerer BMSC'er ved både cytokinproduktion og celle-celle-interaktioner MM-cellers evne til at komme ind i blodbanen, hvilket fører til homing eller ekstravasation af klonale celler til fjerne væv, hvilket igen resulterer i dannelse af nye BM-nicher.

Den epitel-til-mesenkymale overgang (EMT) er et biologisk fænomen, hvorved epitelceller kan skifte til en mesenchymal fænotype gennem forstyrrelse af celle-celleadhæsion og cellulær polaritet, remodellering af cytoskelet og ændring af celle-matrix adhæsion. Samlet set fører disse hændelser til forbedrede migrerende og invasive egenskaber af berørte celler. Bemærkelsesværdigt forekommer EMT fysiologisk under normal embryonal udvikling og vævsregenerering, men i kræftceller er det blevet forbundet med tumoraggressivitetsegenskaber, herunder invasion, metastaser, stamhed og lægemiddelresistens. EMT er almindeligt observeret i solide tumorer, men det er for nylig også blevet beskrevet i MM. I en sådan sammenhæng har undersøgelser vist, at BM nicher-associeret hypoxi producerer MM-cellers udtræden og formidling gennem erhvervelse af EMT-lignende funktioner, som igen, ved at øge CXCR4-ekspression, producerer ekstra-medullær sygdom (EMD) udvikling.

Ændringer i cellemetabolisme er dukket op som et af kendetegnene for kræft, der muligvis kan være målrettet af nye terapeutiske tilgange. Blandt disse ændringer er biosyntese af nikotinamid-adenindinukleotid (NAD+) ved at dukke op som et nyt terapeutisk mål i tumorer. Nicotinamidphosphorybosyltransferase (NAMPT), det hastighedsbegrænsende enzym for NAD+-produktion fra nikotinamid (NAM) i pattedyrsceller, er ofte opreguleret i kræftformer, herunder MM, og dets relevans som potentielt terapeutisk mål er blevet udforsket bredt af vores gruppe. Udover dets intracellulære aktivitet som metabolisk nøgleenzym er NAMPT imidlertid også til stede i det ekstracellulære miljø, hvor det udøver cytokin/adipokin-lignende virkninger som eNAMPT. Selvom mekanismer, der ligger til grund for eNAMPT-sekretion, stadig mangler at blive belyst, er det almindeligt accepteret, at der er positiv sammenhæng mellem eNAMPT-sekretion og intracellulære NAMPT-niveauer. Nylige beviser viser, at eNAMPT-plasmaniveauer er signifikant højere hos cancerpatienter sammenlignet med raske donorer i flere hæmatologiske og solide neoplasmer. I denne sammenhæng viste det sig, at eNAMPT udøver protumorigene effekter, såsom at fremme cancercelleproliferation og kolonidannelse, bibringe resistens mod apoptose og formning af tumormikromiljø ved at fremme neo-angiogenese og påvirke immunrespons.

Efterforskerne har for nylig demonstreret den afgørende rolle, som eNAMPT spiller i erhvervelsen af ​​EMT i humane brystkræftceller. I detaljer fremmer NAMPT-overekspression erhvervelse af fibroblastlignende morfologi af cancerceller ved at reducere E-cadherin-ekspression i forbindelse med N-cadherin, Vimentin og ZEB1-opregulering. Det er vigtigt, at NAMPT-induceret EMT ikke er forbundet med NAMPT enzymatisk aktivitet og heller ikke med dets produktniveauer nikotinamidmononukleotid (NMN). Tværtimod ser EMT ud til at være medieret af eNAMPT gennem dets evne til at aktivere TGFβ-signalvejen via øget TGFβ1-produktion.

Baseret på vores tidligere observationer planlægger efterforskerne her at undersøge eNAMPT yderligere i MM-biologi og at etablere dets rolle i sygdomsprogression, hvor EMT-erhvervelse repræsenterer et kendetegn for kræftformer. Resultater, der stammer fra forslaget, vil forhåbentlig identificere nye biologiske sårbarheder ved en sådan malignitet og også en innovativ biomarkør til overvågning af sygdomsprogression.

Efterforskerne har foreløbige målte eNAMPT-serumniveauer i PB-prøver fra Nydiagnosticeret Myelomatose (NDMM) (n=20) patienter og raske donorer (HD'er; n=6). Interessant nok blev eNAPMT-niveauer fundet at være signifikant højere i tumorer end kontroller, hvilket peger på en relevant rolle for dette cytokin i MM-biologi. Disse data giver begrundelsen for yderligere undersøgelser af eNAMPT-rolle i MM.

Samling af prøver:

Retrospektive prøver af MM-patienter vil blive udledt fra to forskellige databaser (UNITO og UNIGE) og kombineret til en ny specifik database dedikeret til dette projekt for at dække de forskellige stadier af sygdom, der vil blive analyseret.

UNITO vil koordinere og udføre udvælgelsen af ​​de prøver, der vil blive inkluderet. UNITO vil være i stand til at levere det nødvendige antal prøver til denne undersøgelse. I sidste ende vil et uafhængigt, repræsentativt sæt af 100 MM patientprøver blive udvalgt fra tidligere kliniske forsøg, der er blevet udført i løbet af de sidste 5 år.

Generelt vil prøverne opfylde følgende parametre:

• Mandlige og kvindelige patienter over 18 år;
• PB-afledte serumprøver indsamlet i forskellige sygdomsfaser (MGUS, SMM, NDMM og RRMM MM patienter)
• Tilstrækkelige CD138+-celler eller RNA fra CD138+-celler er tilgængelige;
• ≥ 2 års median overlevelsesdata og behandlingsdata er tilgængelige (progressionsfri og samlet overlevelse);
• Knoglemarvsprøve erhvervet før påbegyndelse af den relevante terapi;
• Patienter har givet samtykke til brug af deres prøve til forskningsformål.

En gennemførlighedsvurdering og effektanalyse af de tilgængelige prøver og kliniske data vil blive udført for hver af de respektive tilgængelige kliniske forsøg, som prøverne vil stamme fra. Denne vurdering udføres for at beslutte, udvælge og bygge et datasæt, der giver videnskabeligt og statistisk forsvarligt bevis for forudsigelse af behandlingseffektivitet. De udvalgte behandlingsregimer (kombinationer af medicin), der vil blive analyseret, dækker hele spektret af MM-behandlingsklasser, herunder proteasomhæmmere, immunmodulerende lægemidler (IMiD'er), alkylerende midler, HDAC-hæmmere og monoklonale antistoffer. Patientprøver vil blive afledt fra kontrollerede kliniske forsøg og vil blive udvalgt fra forskellige behandlingsgrupper, indeholdende patienter, der modtog de samme behandlingsregimer, baseret på en af ​​følgende lægemidler eller kombinationer: Bortezomib (proteasomhæmmer), Carfilzomib (proteasomhæmmer), Thalidomid (IMiD), Lenalidomid (IMiD), Pomalidomid (IMiD), Melphalan (alkyleringsmiddel), Panabinostat (HDAC-hæmmer) og Daratumumab (monoklonalt antistof).

Prøvestørrelsesestimater er baseret på tidligere erfaringer med signifikant at kunne bestemme overlevelsesforskelle mellem positive og negative tilfælde for en bestemt behandling for en tilstrækkelig stor gruppe. Givet en effektstørrelse på mindst 3 og en forekomst af undertypen på 20 %, vil en gruppestørrelse på 100 tilfælde være tilstrækkelig til signifikant at bestemme den prædiktive værdi af undertypen. (en mindre effektstørrelse og en mindre forekomst ville sandsynligvis ikke være klinisk relevant).