Tutki eNAMPTia multippeli myelooman biologiassa ja määritä sen rooli taudin etenemisessä

Taustaa ja alustavia tietoja:

Multippeli myeloomalle (MM) on tunnusomaista pahanlaatuisten plasmasolujen klooninen laajeneminen luuytimessä (BM) ja kasvainsolujen jatkuva leviäminen luuytimessä ja sieltä ulos. Jatkuva vuorovaikutus BM-stroomasolujen (BMSC) ja MM-solujen välillä tukee kasvainsolujen proliferaatiota, eloonjäämistä, migraatiota ja lääkeresistenssiä. Itse asiassa BMSC:t sekä sytokiinituotannon että solu-soluvuorovaikutusten avulla säätelevät MM-solujen kykyä päästä verenkiertoon, mikä johtaa klonaalisten solujen kotiutumiseen tai ekstravasaatioon kaukaisiin kudoksiin, mikä puolestaan ​​​​johtaa uusien BM-rakojen muodostumiseen.

Epiteeli-mesenkymaalinen siirtyminen (EMT) on biologinen ilmiö, jossa epiteelisolut voivat muuttua mesenkymaaliseksi fenotyypiksi solujen ja solujen välisen adheesion ja solupolariteetin häiriön, sytoskeleton uudelleenmuotoilun ja solu-matriisiadheesion muuttumisen kautta. Kaiken kaikkiaan nämä tapahtumat johtavat sairastuneiden solujen parantuneisiin migraatio- ja invasiivisiin ominaisuuksiin. Huomattavaa on, että EMT:tä esiintyy fysiologisesti normaalin alkionkehityksen ja kudosten uusiutumisen aikana, mutta syöpäsoluissa se on liitetty kasvaimen aggressiivisuuden ominaisuuksiin, mukaan lukien tunkeutuminen, etäpesäkkeet, varsi ja lääkeresistenssi. EMT:tä havaitaan yleisesti kiinteissä kasvaimissa, mutta se on äskettäin kuvattu myös MM:ssä. Tällaisessa kontekstissa tutkimukset ovat osoittaneet, että BM-rakoihin liittyvä hypoksia tuottaa MM-solujen ulostuloa ja leviämistä hankkimalla EMT:n kaltaisia ​​piirteitä, jotka puolestaan ​​​​lisäämällä CXCR4-ilmentymistä aiheuttavat ekstramedullaarisen sairauden (EMD) kehittymistä.

Muutokset solujen aineenvaihdunnassa ovat nousseet yhdeksi syövän tunnusmerkeistä, joihin voidaan mahdollisesti kohdistaa uusia terapeuttisia lähestymistapoja. Näistä muutoksista nikotiiniamidiadeniinidinukleotidin (NAD+) biosynteesi on nousemassa uudeksi terapeuttiseksi kohteeksi kasvaimissa. Nikotiiniamidifosforybosyylitransferaasi (NAMPT), nopeutta rajoittava entsyymi NAD+:n tuotantoon nikotiiniamidista (NAM) nisäkässoluissa, on usein lisääntynyt syövissä, mukaan lukien MM, ja ryhmämme on tutkinut laajasti sen merkitystä mahdollisena terapeuttisena kohteena. Solunsisäisen aktiivisuutensa lisäksi avainaineenvaihduntaentsyyminä NAMPT on kuitenkin läsnä myös solunulkoisessa ympäristössä, jossa sillä on sytokiini/adipokiinin kaltaisia ​​vaikutuksia eNAMPT:na. Vaikka eNAMPT-erityksen taustalla olevat mekanismit ovat vielä selvittämättä, on yleisesti hyväksytty, että eNAMPT-erityksen ja solunsisäisten NAMPT-tasojen välillä on positiivinen korrelaatio. Viimeaikaiset todisteet osoittavat, että eNAMPT-plasmatasot ovat merkittävästi korkeampia syöpäpotilailla verrattuna terveisiin luovuttajiin useissa hematologisissa ja kiinteissä kasvaimissa. Tässä yhteydessä eNAMPT:lla havaittiin olevan tuumorigeenisiä vaikutuksia, kuten edistää syöpäsolujen lisääntymistä ja pesäkkeiden muodostumista, antaa vastustuskykyä apoptoosille ja kasvaimen mikroympäristön muotoilemista edistämällä neoangiogeneesiä ja vaikuttamalla immuunivasteeseen.

Tutkijat osoittivat äskettäin eNAMPT:n keskeisen roolin EMT:n hankinnassa ihmisen rintasyöpäsoluissa. Yksityiskohtaisesti, NAMPT-yli-ilmentyminen edistää syöpäsolujen fibroblastin kaltaisen morfologian hankkimista vähentämällä E-kadheriinin ilmentymistä yhdessä N-kadheriinin, Vimentinin ja ZEB1:n lisääntymisen kanssa. Tärkeää on, että NAMPT-indusoitu EMT ei liity NAMPT:n entsymaattiseen aktiivisuuteen eikä sen tuotetasoihin nikotiiniamidimononukleotidiin (NMN). Päinvastoin, eNAMPT näyttää välittävän EMT:tä sen kyvyn kautta aktivoida TGFp-signalointireitti lisääntyneen TGFp1-tuotannon kautta.

Aiempien havaintojen perusteella tässä tutkijat aikovat tutkia edelleen eNAMPT:ia MM-biologiassa ja selvittää sen roolia taudin etenemisessä, jossa EMT:n hankinta on syöpien tunnusmerkki. Ehdotuksesta saadut tulokset toivottavasti tunnistavat tällaisten pahanlaatuisten kasvainten uusia biologisia haavoittuvuuksia ja innovatiivisen biomarkkerin myös taudin etenemisen seurantaan.

Tutkijat ovat alustavat mittaaneet eNAMPT- seerumipitoisuudet äskettäin diagnosoidun multippelisyövän (NDMM) (n=20) potilaiden ja terveiden luovuttajien (HD:t; n=6) PB-näytteistä. Mielenkiintoista on, että eNAPMT-tasojen havaittiin olevan merkittävästi korkeampia kasvaimissa kuin kontrolleissa, mikä viittaa tämän sytokiinin merkitykselliseen rooliin MM-biologiassa. Nämä tiedot antavat perusteet lisätutkimuksille eNAMPT:n roolista MM:ssä.

Näytekokoelma:

Retrospektiiviset näytteet MM-potilaista johdetaan kahdesta eri tietokannasta (UNITO ja UNIGE) ja yhdistetään uudeksi erityiseksi tietokannaksi, joka on omistettu tälle hankkeelle kattamaan sairauden eri vaiheet, jotka analysoidaan.

UNITO koordinoi ja suorittaa mukana olevien näytteiden valinnan. UNITO pystyy toimittamaan tarvittavan määrän näytteitä tätä tutkimusta varten. Lopulta aiemmista kliinisistä tutkimuksista, jotka on suoritettu viimeisen 5 vuoden aikana, valitaan riippumaton, edustava 100 MM:n potilasnäytteen sarja.

Yleensä näytteet täyttävät seuraavat parametrit:

• Yli 18-vuotiaat mies- ja naispotilaat;
• PB-peräiset seeruminäytteet, jotka on kerätty sairauden eri vaiheissa (MGUS-, SMM-, NDMM- ja RRMM MM -potilaat)
• Riittävästi CD138+-soluja tai RNA:ta CD138+-soluista on saatavilla;
• ≥ 2 vuoden mediaanieloonjäämistiedot ja hoitotiedot ovat saatavilla (etenemisvapaa ja kokonaiseloonjääminen);
• Luuydinnäyte, joka on otettu ennen kiinnostavan hoidon aloittamista;
• Potilaat ovat antaneet suostumuksensa näytteen käyttöön tutkimustarkoituksiin.

Käytettävissä olevien näytteiden ja kliinisten tietojen toteutettavuusarviointi ja tehoanalyysi suoritetaan jokaiselle kullekin saatavilla olevalle kliiniselle tutkimukselle, josta näytteet ovat peräisin. Tämä arviointi suoritetaan, jotta voidaan päättää, valita ja rakentaa tietoaineisto, joka tarjoaa tieteellisesti ja tilastollisesti luotettavaa näyttöä hoidon tehokkuuden ennustamisesta. Valitut hoito-ohjelmat (lääkitysyhdistelmät), jotka analysoidaan, kattavat koko kirjon MM-hoitoluokkia, mukaan lukien proteasomi-inhibiittorit, immunomoduloivat lääkkeet (IMiD:t), alkyloivat aineet, HDAC-estäjät ja monoklonaaliset vasta-aineet. Potilasnäytteet saadaan kontrolloiduista kliinisistä tutkimuksista, ja ne valitaan eri hoitoryhmistä, jotka sisältävät potilaita, jotka ovat saaneet samaa hoito-ohjelmaa, joka perustuu johonkin seuraavista lääkkeistä tai yhdistelmistä: Bortezomib (proteasomin estäjä), Carfilzomib (proteasomin estäjä), Talidomidi (IMiD), lenalidomidi (IMiD), pomalidomidi (IMiD), melfalaani (alkyloiva aine), panabinostaatti (HDAC-estäjä) ja daratumumabi (monoklonaalinen vasta-aine).

Otoskokoarvioinnit perustuvat aikaisempiin kokemuksiin siitä, että positiivisten ja negatiivisten tapausten eloonjäämiserot pystytään merkittävästi määrittämään tietyssä hoidossa riittävän suurelle ryhmälle. Kun vaikutuskoko on vähintään 3 ja alatyypin esiintyvyys 20 %, 100 tapauksen ryhmäkoko riittää määrittämään merkittävästi alatyypin ennustusarvon. (pienempi vaikutuskoko ja pienempi esiintyvyys eivät todennäköisesti ole kliinisesti merkityksellisiä).