進行肝癌に対する凍結アブレーションと樹状細胞/サイトカイン誘導キラー細胞治療の併用の安全性と有効性の評価

世界保健機関の国際がん研究機関 (IARC) は、2020 年の最新の世界のがん負荷データを発表しました。これは、2020 年に 1,930 万件の新しいがん症例が発生し、1,000 万人近くが死亡したことを示しています。 現在、世界の 5 人に 1 人が一生のうちにがんにかかり、男性の 8 人に 1 人、女性の 11 人に 1 人ががんで死亡します。 2017 年の台湾衛生福利部の台湾がん登録の紹介によると、新たながんの症例数は 111,684 人で、2015 年より 5,852 人多くなっています。 特に肝臓がんは、がんランキングで4位にランクされています。 肝がんの主な原因は、B型肝炎、C型肝炎、またはアルコールによる肝硬変です。 その他の原因には、アスペルギルス・フラバス毒素、非アルコール性脂肪肝疾患、肝吸引物などがあります。

免疫細胞療法は、進行肝がんの治療における新たな分野です。 リンホカイン活性化キラー (LAK) 細胞、樹状細胞 (DC)、腫瘍浸潤リンパ球 (TIL) 細胞、サイトカイン誘導キラー (CIK) 細胞、およびリンパ球活性化リンパ球 (LAK) 細胞などの多くのタイプの免疫エフェクター細胞は、進行した肝臓がんの治療に使用されます。 CIK 細胞は、免疫療法アプリケーション用に開発されました。 CD3+CD56+ 細胞、CD3+CD56- 細胞、CD3-CD56+ 細胞などの CIK 細胞は、一般的な T 細胞の機能と同様に、MHC の非制限的な細胞溶解効果を示すことにより、腫瘍を直接殺す能力を持っています。 CIK 細胞は、LFA-1 を介して腫瘍細胞上の LFA-1 リガンドに結合し、腫瘍細胞を死滅させます。次に、受容体が NK 細胞上のそのリガンドに結合すると、下流の細胞シグナル伝達経路が開始され、CIK 細胞が腫瘍の細胞毒性のためにさらに活性化されます。 最後に、CIK 細胞は Fas-FasL を介してシグナル伝達経路を活性化し、がん細胞のアポトーシスを誘導します。 DC は、サイトカイン刺激に応答して成熟樹状細胞に分化することが多い単球の形で、骨髄の造血幹細胞から分化します。 腫瘍関連抗原 (TAA) 食作用の後、抗原は、サイトゾル経路と液胞経路の 2 つの経路によって処理され、ペプチドに処理され、主要組織適合遺伝子複合体クラス I (MHC I) にロードされます。 次に、TAA-MHC I 複合体が DC 表面に送達されます。 DC を提示する TAA が移動してリンパ節に到達すると、T 細胞をプライミングし、抗腫瘍免疫を促進することができます。 樹状細胞は、ナイーブ T 細胞の効率的な活性化因子であり、強力な APC です。 それらは、抗原提示と T 細胞プライミングを介した免疫介在性がんの排除において中心的な役割を果たします。 最近では、それらを組み合わせて DC-CIK 細胞療法を形成しています。これは、DC と CIK 細胞を一緒に培養する併用免疫療法です。 治療メカニズムに関しては、樹状細胞は特殊な抗原提示細胞であり、成熟樹状細胞は MHC-I 経路を介して腫瘍抗原を提示し、腫瘍細胞の免疫逃避メカニズムを効果的に打ち消すことができます。 CIK の特定の腫瘍殺傷効果はさらに強化されます。 多くの研究で、DC-CIK 細胞でがん患者を治療すると、患者の生存期間が大幅に延長され、免疫機能が強化されることが示されています。

がん治療の最近の傾向は、腫瘍の凍結切除を免疫細胞療法と組み合わせると、良好な補完効果が得られ、がん治療の有効性が大幅に向上することが確認されています。 凍結療法は、凍結と解凍を繰り返すことで生じる浸透圧ショックの物理的変化によって腫瘍細胞の壊死を引き起こし、腫瘍抗原を放出して抗腫瘍免疫応答を活性化すると考えられています。 ステージ IV の肺がん患者を対象に 2013 年に実施されたレトロスペクティブ研究では、免疫細胞 DC-CIK と組み合わせた凍結アブレーションの有効性が調査され、DC-CIK による凍結アブレーションが患者の全生存期間 (OS) を大幅に延長することが示されました。 2017 年の臨床試験の結果は、NK 細胞療法による凍結療法が、進行肺がん患者の臨床反応率と疾患制御率 (DCR) を改善し、PR 患者の割合 (63.3% 対 43.3%、 P<0.01) および疾患制御率 (進行肝細胞癌の臨床試験の結果は、2015 年から 2017 年に入院した 61 人の患者のうち、NK 免疫療法による凍結療法が患者の無増悪生存期間 (PFS) を有意に延長したことを示しました (9.5%)。 (PFS) (9.1 か月対 7.6 か月、P=0.0107)、奏効率 (60% 対 46.1%、 P<0.05) および病勢制御率 (85.7% 対 69.2%、 P<0.05)。

この試験は、単群、非対照、非盲検、非ランダム割り当てデザインとして設計されました。 進行肝癌患者における凍結アブレーション技術を使用した肝腫瘍のアブレーション前後の自己 DC-CIK 免疫細胞による肝動脈注入の有効性と安全性を調査しました。 DC-CIK 免疫細胞療法技術は Bohui Biotech と共同で開発されたもので、コア細胞技術は日本の蓮見博士の自己免疫細胞療法から移管されました。 このプログラムは、治療前後の腫瘍サイズと腫瘍指数の変化を追跡し、安全性評価を実施して、この試験治療の安全性と有効性を評価します。

臨床試験中、臨床評価結果を補完する探索的指標分析のために末梢血が患者から採取されます。 2013年の臨床研究の結果によると、標準治療に失敗したステージIVの固形がん患者は、日本の蓮見医師による自己免疫細胞療法後にCD8+CD56+細胞数が増加し、1年後まで追跡調査が続けられました。 . 2019年の研究では、遊離DNA濃度が低いグループよりも、ソラフェニブで治療された遊離DNA濃度が高い肝臓がん患者のグループの方が、疾患制御が低いことも示されました。 コピー数変化 (CNA) プロファイルを取得するための無細胞 DNA (cfDNA) の全ゲノム配列決定は、ソラフェニブ治療結果の予測因子として使用できます。 そこで、本臨床試験では、治療前後の患者さんから血液を採取し、免疫細胞集団の分布と血液中のセルフリーDNA（cfDNA）の変化を、バフィーコートと血漿を比重計で分離することで別々に解析しました。勾配遠心分離、Qubit 2.0 Fluorometer を使用。 qubit dsDNA High Sensitivity アッセイキット (Life Technology、Carlsbad、CA、USA) を使用して、遊離 DNA の量を定量化し、遊離 DNA のコピー数を検出し、遊離 DNA を分析して、治療効果の追跡に使用されます。