Avaliação da segurança e eficácia da combinação de crioablação e tratamento de células assassinas induzidas por células dendricas/citocinas para câncer de fígado avançado

A Agência Internacional de Pesquisa sobre o Câncer (IARC) da Organização Mundial da Saúde divulgou os dados mais recentes da carga global de câncer para 2020, que mostram que 19,3 milhões de novos casos de câncer ocorreram e quase 10 milhões de mortes ocorreram em 2020. Atualmente, uma em cada cinco pessoas no mundo terá câncer ao longo da vida, e uma em cada oito homens e uma em cada 11 mulheres morrerá de câncer. De acordo com a introdução do registro de câncer de Taiwan do Ministério da Saúde e Bem-Estar em 2017, o número de novos casos de câncer foi de 111.684, 5.852 pessoas a mais do que em 2015. O câncer de fígado, em particular, ocupa o quarto lugar no ranking de câncer. As principais causas de câncer de fígado são hepatite B, hepatite C ou cirrose hepática causada pelo álcool. Outras causas incluem toxina Aspergillus flavus, doença hepática gordurosa não alcoólica e aspirados hepáticos, etc.

A imunoterapia celular é um campo emergente no tratamento do câncer de fígado avançado. Muitos tipos de células imunes efetoras, como células assassinas ativadas por linfocina (LAK), células dendríticas (DC), linfócitos infiltrantes tumorais (TIL), células assassinas induzidas por citocinas (CIK) e linfócitos ativados por linfócitos (LAK) são usado para tratar câncer de fígado avançado. As células CIK foram desenvolvidas para aplicações de imunoterapia. Células CIK, como células CD3+CD56+, células CD3+CD56- e células CD3-CD56+, têm a capacidade de matar tumores diretamente, demonstrando o efeito citolítico não restritivo do MHC, semelhante à função das células T gerais. As células CIK se ligam aos ligantes LFA-1 nas células tumorais através do LFA-1, resultando na morte das células tumorais e, em seguida, a ligação do receptor ao seu ligante nas células NK inicia uma via de sinalização celular a jusante e ativa ainda mais as células CIK para citotoxicidade tumoral. Finalmente, as células CIK ativam a via de sinalização via Fas-FasL e induzem a apoptose nas células cancerígenas. As DCs são diferenciadas das células-tronco hematopoiéticas na medula óssea, muitas vezes na forma de monócitos, que se diferenciam em células dendríticas maduras em resposta à estimulação de citocinas. Após a fagocitose do antígeno associado ao tumor (TAA), os antígenos são tratados por duas vias, a via citosólica e a via vacuolar, pelas quais são processados ​​em peptídeos e carregados no complexo principal de histocompatibilidade classe I (MHC I). Em seguida, o complexo TAA-MHC I é entregue à superfície DC. Quando os TAAs que apresentam DC migram e atingem os gânglios linfáticos, eles são capazes de ativar as células T e estimular a imunidade antitumoral. As células dendríticas são ativadores eficientes de células T virgens e são APCs potentes. Eles desempenham um papel central na eliminação do câncer mediada pelo sistema imunológico por meio da apresentação de antígenos e priming de células T. Mais recentemente, eles foram combinados para formar a terapia celular DC-CIK, que é uma imunoterapia combinada em que as células DC e CIK são cultivadas juntas. Em termos de mecanismo terapêutico, as células dendríticas são células apresentadoras de antígenos especializadas, e as células dendríticas maduras podem apresentar antígenos tumorais por meio da via MHC-I para neutralizar efetivamente o mecanismo de escape imunológico das células tumorais. O efeito específico de matar o tumor do CIK é ainda mais aprimorado. Muitos estudos mostraram que o tratamento de pacientes com câncer com células DC-CIK prolonga significativamente o tempo de sobrevivência e aumenta a função imunológica do paciente.

Tendências recentes no tratamento do câncer confirmaram que, quando a crioablação de tumores é combinada com a terapia de células imunológicas, ela pode ter um bom efeito complementar e melhorar significativamente a eficácia do tratamento do câncer. Acredita-se que a crioterapia cause necrose das células tumorais por meio das alterações físicas do choque osmótico produzido por repetidos congelamentos e descongelamentos, que por sua vez liberam antígenos tumorais e ativam respostas imunes antitumorais. Um estudo retrospectivo realizado em 2013 em pacientes com câncer de pulmão em estágio IV investigou a eficácia da crioablação combinada com células imunes DC-CIK e mostrou que a crioablação com DC-CIK prolongou significativamente a sobrevida global (OS) dos pacientes. Os resultados do ensaio clínico de 2017 mostraram que a crioablação com terapia com células NK melhorou a taxa de resposta clínica e a taxa de controle da doença (DCR) de pacientes com câncer de pulmão avançado, com a proporção de pacientes com PR (63,3% vs. 43,3%, P<0,01) e taxa de controle da doença (Os resultados do ensaio clínico em carcinoma hepatocelular avançado mostraram que entre 61 pacientes admitidos de 2015 a 2017, a crioablação com imunoterapia NK prolongou significativamente a sobrevida livre de progressão (PFS) dos pacientes (9,5%). (PFS) (9,1 meses vs. 7,6 meses, P=0,0107), taxa de resposta (60% vs. 46,1%, P<0,05) e taxa de controle da doença (85,7% vs. 69,2%, P<0,05).

O ensaio foi concebido como um projeto de designação de braço único, não controlado, aberto e não aleatório. Foi investigada a eficácia e a segurança da infusão da artéria hepática com células imunes DC-CIK autólogas antes e após a ablação de tumores hepáticos usando a técnica de crioablação em pacientes com câncer hepático avançado. A tecnologia de terapia celular imune DC-CIK foi desenvolvida em colaboração com a Bohui Biotech, e a tecnologia celular central foi transferida da terapia celular imune autóloga do Dr. Hasumi no Japão. O programa rastreará as mudanças no tamanho do tumor e no índice do tumor antes e depois do tratamento e conduzirá uma avaliação de segurança para avaliar a segurança e a eficácia deste tratamento experimental.

Durante o ensaio clínico, sangue periférico será coletado de pacientes para análise de índice exploratório para complementar os resultados da avaliação clínica. De acordo com os resultados do estudo clínico em 2013, os pacientes com câncer sólido em estágio IV que falharam no tratamento padrão tiveram populações de células CD8+CD56+ aumentadas após terapia com células imunológicas autólogas pelo Dr. Hasumi no Japão e continuaram a ser acompanhados até um ano depois . Em 2019, um estudo também mostrou que o controle da doença foi menor no grupo de pacientes com câncer de fígado com altas concentrações de DNA livre tratados com sorafenibe do que no grupo com baixas concentrações de DNA livre. O sequenciamento do genoma completo do DNA livre de células (cfDNA) para obter perfis de alteração do número de cópias (CNA) pode ser usado como preditores do resultado do tratamento com sorafenibe. Portanto, neste ensaio clínico, amostras de sangue foram coletadas de pacientes antes e após o tratamento, e a distribuição das populações de células imunes e as alterações no DNA livre de células (cfDNA) no sangue foram analisadas separadamente, separando a camada leucocitária e o plasma usando um medidor de densidade centrífuga de gradiente e usando o Fluorômetro Qubit 2.0. O kit de ensaio qubit dsDNA High Sensitivity (Life Technology, Carlsbad, CA, EUA) foi usado para quantificar a quantidade de DNA livre e para detectar o número de cópias de DNA livre, e para analisar o DNA livre para descobrir os biomarcadores que podem ser usado para rastreamento do efeito do tratamento.