Оценка безопасности и эффективности комбинации криоаблации и лечения дендрическими клетками/цитокин-индуцированными клетками-киллерами при распространенном раке печени

Международное агентство по изучению рака (IARC) Всемирной организации здравоохранения опубликовало последние данные о глобальном бремени рака за 2020 год, которые показывают, что в 2020 году произошло 19,3 миллиона новых случаев рака и почти 10 миллионов смертей. В настоящее время каждый пятый человек в мире заболевает раком в течение жизни, а каждый восьмой мужчина и каждая 11 женщина умирают от рака. Согласно представлению Тайваньского онкологического реестра Министерства здравоохранения и социального обеспечения в 2017 году, число новых случаев рака составило 111 684, что на 5 852 человека больше, чем в 2015 году. Рак печени, в частности, занимает четвертое место в рейтинге онкологических заболеваний. Основными причинами рака печени являются гепатит В, гепатит С или цирроз печени, вызванный алкоголем. Другие причины включают токсин Aspergillus flavus, неалкогольную жировую болезнь печени, аспираты печени и т. д.

Иммуноклеточная терапия является новым направлением в лечении поздних стадий рака печени. Многие типы иммунных эффекторных клеток, такие как лимфокин-активированные киллеры (LAK), дендритные клетки (DC), опухоль-инфильтрирующие лимфоциты (TIL), цитокин-индуцированные киллеры (CIK) и лимфоцитарно-активированные лимфоциты (LAK). используется для лечения прогрессирующего рака печени. Клетки CIK были разработаны для применения в иммунотерапии. Клетки CIK, такие как клетки CD3+CD56+, клетки CD3+CD56- и клетки CD3-CD56+, обладают способностью убивать опухоли напрямую, демонстрируя нерестриктивное цитолитическое действие MHC, сходное с функцией обычных Т-клеток. Клетки CIK связываются с лигандами LFA-1 на опухолевых клетках через LFA-1, что приводит к уничтожению опухолевых клеток, а затем связывание рецептора с его лигандом на NK-клетках инициирует нижестоящий клеточный сигнальный путь и дополнительно активирует клетки CIK для опухолевой цитотоксичности. Наконец, клетки CIK активируют сигнальный путь через Fas-FasL и вызывают апоптоз в раковых клетках. ДК дифференцируются из гемопоэтических стволовых клеток в костном мозге, часто в форме моноцитов, которые дифференцируются в зрелые дендритные клетки в ответ на стимуляцию цитокинами. После фагоцитоза опухолеассоциированным антигеном (TAA) антигены обрабатываются двумя путями, цитозольным путем и вакуолярным путем, посредством которых они процессируются в пептиды и загружаются в главный комплекс гистосовместимости класса I (MHC I). Затем комплекс TAA-MHC I доставляется на поверхность ДК. Когда DC-представляющие TAA мигрируют и достигают лимфатических узлов, они способны праймировать Т-клетки и стимулировать противоопухолевый иммунитет. Дендритные клетки являются эффективными активаторами наивных Т-клеток и являются мощными АПК. Они играют центральную роль в иммуноопосредованной элиминации рака за счет презентации антигена и примирования Т-клеток. Совсем недавно они были объединены для формирования клеточной терапии DC-CIK, которая представляет собой комбинированную иммунотерапию, при которой клетки DC и CIK культивируются вместе. С точки зрения терапевтического механизма, дендритные клетки являются специализированными антигенпрезентирующими клетками, а зрелые дендритные клетки могут представлять опухолевые антигены через путь MHC-I, чтобы эффективно противодействовать механизму ускользания опухолевых клеток от иммунного ответа. Специфическое противоопухолевое действие CIK дополнительно усиливается. Многие исследования показали, что лечение онкологических больных клетками DC-CIK значительно продлевает время выживания и повышает иммунную функцию пациента.

Последние тенденции в лечении рака подтвердили, что сочетание криоабляции опухолей с терапией иммунными клетками может иметь хороший дополнительный эффект и значительно повысить эффективность лечения рака. Считается, что криотерапия вызывает некроз опухолевых клеток за счет физических изменений осмотического шока, вызванного повторным замораживанием и оттаиванием, что, в свою очередь, высвобождает опухолевые антигены и активирует противоопухолевый иммунный ответ. Ретроспективное исследование, проведенное в 2013 году у пациентов с раком легкого IV стадии, изучало эффективность криоабляции в сочетании с DC-CIK иммунных клеток и показало, что криоабляция с помощью DC-CIK значительно увеличивает общую выживаемость (ОВ) пациентов. Результаты клинического исследования 2017 года показали, что криоаблация с терапией NK-клетками улучшила частоту клинического ответа и скорость контроля заболевания (DCR) у пациентов с распространенным раком легкого с долей пациентов с PR (63,3% против 43,3%, P<0,01) и показатель контроля заболевания (Результаты клинического исследования распространенной гепатоцеллюлярной карциномы показали, что среди 61 пациента, поступивших с 2015 по 2017 год, криоаблация с иммунотерапией NK значительно увеличила выживаемость без прогрессирования (ВБП) пациентов (9,5%). (ВБП) (9,1 месяца по сравнению с 7,6 месяца, P = 0,0107), частота ответов (60% по сравнению с 46,1%, P<0,05) и уровень контроля заболевания (85,7% против 69,2%, Р<0,05).

Исследование было разработано как одногрупповое, неконтролируемое, открытое, с неслучайным распределением. Исследовали эффективность и безопасность инфузии аутологичных иммунных клеток DC-CIK в печеночную артерию до и после аблации опухолей печени методом криоабляции у пациентов с распространенным раком печени. Технология терапии иммунными клетками DC-CIK была разработана в сотрудничестве с Bohui Biotech, а технология основных клеток была перенесена из терапии аутологичными иммунными клетками доктора Хасуми в Японии. Программа будет отслеживать изменения размера опухоли и опухолевого индекса до и после лечения, а также проводить оценку безопасности для оценки безопасности и эффективности этого пробного лечения.

Во время клинического испытания у пациентов будет собираться периферическая кровь для исследовательского индексного анализа, дополняющего результаты клинической оценки. Согласно результатам клинического исследования, проведенного в 2013 г., у пациентов с солидным раком IV стадии, у которых стандартное лечение оказалось неэффективным, увеличилась популяция клеток CD8+CD56+ после терапии аутологичными иммунными клетками, проведенной доктором Хасуми в Японии, и они продолжали наблюдаться до года спустя. . В 2019 году исследование также показало, что контроль заболевания был ниже в группе пациентов с раком печени с высокими концентрациями свободной ДНК, получавших сорафениб, чем в группе с низкими концентрациями свободной ДНК. Полногеномное секвенирование бесклеточной ДНК (вкДНК) для получения профилей изменения числа копий (CNA) можно использовать в качестве предикторов исхода лечения сорафенибом. Поэтому в этом клиническом испытании у пациентов брали образцы крови до и после лечения, а распределение популяций иммунных клеток и изменения внеклеточной ДНК (вкДНК) в крови анализировали отдельно путем разделения лейкоцитарной пленки и плазмы с использованием плотности градиентной центрифуге и с использованием флуорометра Qubit 2.0. Набор для анализа qubit dsDNA High Sensitivity (Life Technology, Карлсбад, Калифорния, США) использовали для количественного определения количества свободной ДНК и определения числа копий свободной ДНК, а также для анализа свободной ДНК для выявления биомаркеров, которые могут быть обнаружены. используется для отслеживания эффекта лечения.