Ocena bezpieczeństwa i skuteczności leczenia kombinacją krioablacji i komórek dendrytycznych/indukowanych cytokinami komórek zabójczych zaawansowanego raka wątroby

Międzynarodowa Agencja Badań nad Rakiem (IARC) Światowej Organizacji Zdrowia opublikowała najnowsze globalne dane dotyczące obciążenia rakiem w 2020 r., z których wynika, że ​​w 2020 r. wystąpiło 19,3 mln nowych przypadków raka i prawie 10 mln zgonów. Obecnie jedna na pięć osób na świecie zachoruje w ciągu swojego życia na raka, a jeden na ośmiu mężczyzn i jedna na 11 kobiet umrze na raka. Według wprowadzenia tajwańskiego rejestru nowotworów przez Ministerstwo Zdrowia i Opieki Społecznej w 2017 r. liczba nowych przypadków raka wyniosła 111 684, o 5 852 osób więcej niż w 2015 r. W szczególności rak wątroby zajmuje czwarte miejsce w rankingu nowotworów. Głównymi przyczynami raka wątroby są wirusowe zapalenie wątroby typu B, wirusowe zapalenie wątroby typu C lub marskość wątroby spowodowana alkoholem. Inne przyczyny to toksyna Aspergillus flavus, niealkoholowe stłuszczenie wątroby i aspiraty wątroby itp.

Immunokomórkowa terapia jest nową dziedziną w leczeniu zaawansowanego raka wątroby. Wiele rodzajów immunologicznych komórek efektorowych, takich jak komórki zabójcze aktywowane limfokinami (LAK), komórki dendrytyczne (DC), limfocyty naciekające nowotwór (TIL), komórki zabójcze indukowane cytokinami (CIK) i limfocyty aktywowane limfocytami (LAK) są stosowany w leczeniu zaawansowanego raka wątroby. Komórki CIK zostały opracowane do zastosowań w immunoterapii. Komórki CIK, takie jak komórki CD3+CD56+, komórki CD3+CD56- i komórki CD3-CD56+, mają zdolność bezpośredniego zabijania nowotworów poprzez wykazanie nierestrykcyjnego efektu cytolitycznego MHC, podobnego do funkcji ogólnych limfocytów T. Komórki CIK wiążą się z ligandami LFA-1 na komórkach nowotworowych poprzez LFA-1, powodując zabijanie komórek nowotworowych, a następnie wiązanie receptora z jego ligandem na komórkach NK inicjuje dalszy szlak sygnalizacji komórkowej i dalej aktywuje komórki CIK do cytotoksyczności nowotworowej. Wreszcie komórki CIK aktywują szlak sygnałowy poprzez Fas-FasL i indukują apoptozę w komórkach nowotworowych. DC różnicują się z hematopoetycznych komórek macierzystych w szpiku kostnym, często w postaci monocytów, które różnicują się w dojrzałe komórki dendrytyczne w odpowiedzi na stymulację cytokinami. Po fagocytozie związanej z antygenem nowotworowym (TAA), antygeny są traktowane dwoma szlakami, szlakiem cytozolowym i szlakiem wakuolowym, za pomocą których są przetwarzane na peptydy i ładowane do głównego kompleksu zgodności tkankowej klasy I (MHC I). Następnie kompleks TAA-MHC I jest dostarczany na powierzchnię DC. Kiedy TAA prezentujące DC migrują i docierają do węzłów chłonnych, są w stanie pobudzać limfocyty T i pobudzać odporność przeciwnowotworową. Komórki dendrytyczne są skutecznymi aktywatorami naiwnych komórek T i są silnymi APC. Odgrywają one kluczową rolę w eliminacji raka za pośrednictwem układu immunologicznego poprzez prezentację antygenu i priming komórek T. Niedawno połączono je, tworząc terapię komórkową DC-CIK, która jest kombinowaną immunoterapią, w której komórki DC i CIK są hodowane razem. Pod względem mechanizmu terapeutycznego komórki dendrytyczne są wyspecjalizowanymi komórkami prezentującymi antygen, a dojrzałe komórki dendrytyczne mogą prezentować antygeny nowotworowe poprzez szlak MHC-I, aby skutecznie przeciwdziałać mechanizmowi ucieczki immunologicznej komórek nowotworowych. Specyficzny efekt zabijania guza przez CIK jest dodatkowo wzmocniony. Wiele badań wykazało, że leczenie pacjentów onkologicznych komórkami DC-CIK znacznie wydłuża czas przeżycia i wzmacnia funkcje immunologiczne pacjenta.

Najnowsze trendy w leczeniu nowotworów potwierdziły, że połączenie krioablacji guzów z terapią komórkową układu odpornościowego może dawać dobry efekt komplementarny i znacząco poprawiać skuteczność leczenia nowotworów. Uważa się, że krioterapia powoduje martwicę komórek nowotworowych poprzez fizyczne zmiany szoku osmotycznego wywołanego wielokrotnym zamrażaniem i rozmrażaniem, co z kolei uwalnia antygeny nowotworowe i aktywuje przeciwnowotworową odpowiedź immunologiczną. W badaniu retrospektywnym przeprowadzonym w 2013 roku u pacjentów z rakiem płuca w IV stopniu zaawansowania oceniano skuteczność krioablacji w połączeniu z DC-CIK z komórek odpornościowych i wykazano, że krioablacja z DC-CIK znacząco wydłużyła przeżycie całkowite (OS) pacjentów. Wyniki badania klinicznego z 2017 roku wykazały, że krioablacja z terapią komórkami NK poprawiła wskaźnik odpowiedzi klinicznej i wskaźnik kontroli choroby (DCR) u pacjentów z zaawansowanym rakiem płuca, przy odsetku pacjentów z PR (63,3% vs. 43,3%, P<0,01) i wskaźnik kontroli choroby (Wyniki badania klinicznego dotyczącego zaawansowanego raka wątrobowokomórkowego wykazały, że wśród 61 pacjentów przyjętych w latach 2015-2017 krioablacja z immunoterapią NK znacznie wydłużyła przeżycie wolne od progresji (PFS) pacjentów (9,5%). (PFS) (9,1 miesiąca vs. 7,6 miesiąca, p=0,0107), odsetek odpowiedzi (60% vs. 46,1%, P<0,05) i wskaźnik kontroli choroby (85,7% vs. 69,2%, P<0,05).

Badanie zostało zaprojektowane jako jednoramienny, niekontrolowany, otwarty, nielosowy projekt przydziału. Badano skuteczność i bezpieczeństwo infuzji autologicznych komórek odpornościowych DC-CIK do tętnicy wątrobowej przed i po ablacji guzów wątroby techniką krioablacji u pacjentów z zaawansowanym rakiem wątroby. Technologia immunologicznej terapii komórkowej DC-CIK została opracowana we współpracy z Bohui Biotech, a podstawowa technologia komórkowa została przeniesiona z autologicznej terapii komórkowej dr Hasumi z Japonii. Program będzie śledził zmiany wielkości guza i wskaźnika guza przed i po leczeniu oraz przeprowadzi ocenę bezpieczeństwa w celu oceny bezpieczeństwa i skuteczności tego próbnego leczenia.

Podczas badania klinicznego od pacjentów zostanie pobrana krew obwodowa do analizy wskaźnikowej w celu uzupełnienia wyników oceny klinicznej. Zgodnie z wynikami badania klinicznego przeprowadzonego w 2013 r. u pacjentów z rakiem litym w IV stadium zaawansowania, u których nie powiodło się standardowe leczenie, po autologicznej terapii komórkami odpornościowymi prowadzonej przez dr Hasumi w Japonii zwiększyła się populacja komórek CD8+CD56+ i kontynuowano ich obserwację aż do roku później . W 2019 roku badanie wykazało również, że kontrola choroby była mniejsza w grupie pacjentów z rakiem wątroby z wysokimi stężeniami wolnego DNA leczonych sorafenibem niż w grupie z niskimi stężeniami wolnego DNA. Sekwencjonowanie całego genomu wolnego od komórek DNA (cfDNA) w celu uzyskania profili zmiany liczby kopii (CNA) można wykorzystać jako predyktory wyniku leczenia sorafenibem. Dlatego w tym badaniu klinicznym od pacjentów pobrano próbki krwi przed i po leczeniu, a rozmieszczenie populacji komórek odpornościowych i zmiany w wolnym od komórek DNA (cfDNA) we krwi analizowano oddzielnie, oddzielając kożuszek leukocytarny i osocze za pomocą gęstości w wirówce gradientowej i za pomocą fluorometru Qubit 2.0. Zestaw testowy qubit dsDNA High Sensitivity (Life Technology, Carlsbad, CA, USA) został użyty do ilościowego określenia ilości wolnego DNA i wykrycia liczby kopii wolnego DNA oraz do analizy wolnego DNA w celu znalezienia biomarkerów, które mogą być służy do śledzenia efektów leczenia.