Hodnocení bezpečnosti a účinnosti kombinace kryoablace a léčby zabíječskými buňkami indukovanými dendrickými buňkami/cytokiny u pokročilého karcinomu jater

Mezinárodní agentura pro výzkum rakoviny (IARC) Světové zdravotnické organizace zveřejnila nejnovější údaje o celosvětové zátěži rakovinou za rok 2020, které ukazují, že v roce 2020 došlo k 19,3 milionu nových případů rakoviny a téměř 10 milionů úmrtí. V současnosti onemocní rakovinou během svého života každý pátý člověk na světě a každý osmý muž a jedna z 11 žen na rakovinu zemře. Podle zavedení tchajwanského registru rakoviny od ministerstva zdravotnictví a sociálních věcí v roce 2017 byl počet nových případů rakoviny 111 684, což je o 5 852 lidí více než v roce 2015. Na čtvrtém místě v žebříčku rakoviny je zejména rakovina jater. Hlavními příčinami rakoviny jater jsou hepatitida B, hepatitida C nebo cirhóza jater způsobená alkoholem. Mezi další příčiny patří toxin Aspergillus flavus, nealkoholické ztučnění jater a jaterní aspiráty atd.

Imunitní buněčná terapie je nově vznikající oblastí v léčbě pokročilého karcinomu jater. Mnoho typů imunitních efektorových buněk, jako jsou zabíječské buňky aktivované lymfokiny (LAK), dendritické buňky (DC), buňky lymfocytů infiltrujících nádor (TIL), buňky zabíječů vyvolané cytokiny (CIK) a lymfocyty aktivované lymfocyty (LAK). používá se k léčbě pokročilé rakoviny jater. CIK buňky byly vyvinuty pro imunoterapeutické aplikace. CIK buňky, jako jsou CD3+CD56+ buňky, CD3+CD56- buňky a CD3-CD56+ buňky, mají schopnost zabíjet nádory přímo prokázáním nerestriktivního cytolytického účinku MHC, podobně jako funkce obecných T buněk. Buňky CIK se vážou na ligandy LFA-1 na nádorových buňkách prostřednictvím LFA-1, což vede k usmrcení nádorových buněk, a poté navázání receptoru na jeho ligand na NK buňkách iniciuje následnou buněčnou signální dráhu a dále aktivuje buňky CIK pro cytotoxicitu nádoru. Nakonec buňky CIK aktivují signální dráhu prostřednictvím Fas-FasL a indukují apoptózu v rakovinných buňkách. DC se diferencují z hematopoetických kmenových buněk v kostní dřeni, často ve formě monocytů, které se diferencují na zralé dendritické buňky v reakci na stimulaci cytokiny. Po fagocytóze antigenu asociovaného s nádorem (TAA) jsou antigeny ošetřeny dvěma cestami, cytosolickou cestou a vakuolární cestou, pomocí kterých jsou zpracovány na peptidy a naneseny na hlavní histokompatibilní komplex třídy I (MHC I). Poté je komplex TAA-MHC I dopraven na povrch DC. Když TAA prezentující DC migrují a dosáhnou lymfatických uzlin, jsou schopny aktivovat T buňky a vyvolat protinádorovou imunitu. Dendritické buňky jsou účinnými aktivátory naivních T buněk a jsou silnými APC. Hrají ústřední roli v imunitně zprostředkované eliminaci rakoviny prostřednictvím prezentace antigenu a aktivace T-buněk. V poslední době byly kombinovány za vzniku DC-CIK buněčné terapie, což je kombinovaná imunoterapie, kde jsou DC a CIK buňky kultivovány společně. Z hlediska terapeutického mechanismu jsou dendritické buňky specializované buňky prezentující antigen a zralé dendritické buňky mohou prezentovat nádorové antigeny cestou MHC-I, aby účinně působily proti mechanismu imunitního úniku nádorových buněk. Specifický tumor-zabíjející účinek CIK je dále zesílen. Mnoho studií ukázalo, že léčba pacientů s rakovinou buňkami DC-CIK významně prodlužuje dobu přežití a posiluje imunitní funkce pacienta.

Nedávné trendy v léčbě rakoviny potvrdily, že když se kryoablace nádorů spojí s terapií imunitních buněk, může mít dobrý doplňkový efekt a výrazně zlepšit účinnost léčby rakoviny. Předpokládá se, že kryoterapie způsobuje nekrózu nádorových buněk prostřednictvím fyzikálních změn osmotického šoku produkovaného opakovaným zmrazováním a rozmrazováním, což následně uvolňuje nádorové antigeny a aktivuje protinádorové imunitní reakce. Retrospektivní studie provedená v roce 2013 u pacientů s karcinomem plic ve stádiu IV zkoumala účinnost kryoablace v kombinaci s imunitními buňkami DC-CIK a ukázala, že kryoablace s DC-CIK významně prodloužila celkové přežití (OS) pacientů. Výsledky klinické studie z roku 2017 ukázaly, že kryoablace s terapií NK buňkami zlepšila míru klinické odpovědi a míru kontroly onemocnění (DCR) u pacientů s pokročilým karcinomem plic, přičemž podíl pacientů s PR (63,3 % vs. 43,3 %, P<0,01) a míra kontroly onemocnění (Výsledky klinické studie u pokročilého hepatocelulárního karcinomu ukázaly, že mezi 61 pacienty přijatými v letech 2015 až 2017 kryoablace s NK imunoterapií významně prodloužila přežití bez progrese (PFS) pacientů (9,5 %). (PFS) (9,1 měsíce vs. 7,6 měsíce, P=0,0107), míra odpovědí (60 % vs. 46,1 %, P<0,05) a míra kontroly onemocnění (85,7 % vs. 69,2 %, P<0,05).

Zkouška byla navržena jako jednoramenná, nekontrolovaná, otevřená, nenáhodné přiřazení. Byla zkoumána účinnost a bezpečnost infuze jaterní artérie s autologními imunitními buňkami DC-CIK před a po ablaci jaterních nádorů technikou kryoablace u pacientů s pokročilým karcinomem jater. Technologie DC-CIK imunobuněčné terapie byla vyvinuta ve spolupráci s Bohui Biotech a základní buněčná technologie byla přenesena z terapie autologními imunitními buňkami Dr. Hasumi v Japonsku. Program bude sledovat změny velikosti nádoru a indexu nádoru před a po léčbě a provede hodnocení bezpečnosti za účelem vyhodnocení bezpečnosti a účinnosti této zkušební léčby.

Během klinického hodnocení bude pacientům odebírána periferní krev pro explorativní indexovou analýzu, která doplní výsledky klinického hodnocení. Podle výsledků klinické studie z roku 2013 se u pacientů se solidním karcinomem stadia IV, u kterých selhala standardní léčba, zvýšila populace buněk CD8+CD56+ po terapii autologními imunitními buňkami Dr. Hasumi v Japonsku a nadále byli sledováni až o rok později . V roce 2019 studie také ukázala, že kontrola onemocnění byla nižší ve skupině pacientů s rakovinou jater s vysokými koncentracemi volné DNA léčených sorafenibem než ve skupině s nízkými koncentracemi volné DNA. Celogenomové sekvenování bezbuněčné DNA (cfDNA) k získání profilů změny počtu kopií (CNA) lze použít jako prediktory výsledku léčby sorafenibem. Proto byly v této klinické studii odebrány vzorky krve pacientům před a po léčbě a distribuce populací imunitních buněk a změny v bezbuněčné DNA (cfDNA) v krvi byly analyzovány odděleně oddělením buffy coat a plazmy pomocí hustoty gradientovou centrifugou a použitím fluorometru Qubit 2.0. Testovací souprava qubit dsDNA High Sensitivity (Life Technology, Carlsbad, CA, USA) byla použita ke kvantifikaci množství volné DNA a k detekci počtu kopií volné DNA a k analýze volné DNA za účelem zjištění biomarkerů, které lze používá se pro sledování účinku léčby.