Vurdering af sikkerheden og effektiviteten af ​​kombination af kryoablation og dendriske celle/cytokin-inducerede dræberceller behandling for avanceret levercancer

Verdenssundhedsorganisationens Internationale Agentur for Kræftforskning (IARC) har frigivet de seneste globale kræftbyrdedata for 2020, som viser, at der skete 19,3 millioner nye kræfttilfælde og næsten 10 millioner dødsfald skete i 2020. I øjeblikket vil en ud af fem mennesker i verden have kræft i deres levetid, og hver ottende mand og hver 11 kvinde vil dø af kræft. Ifølge Taiwan Cancer-registret fra Ministeriet for Sundhed og Velfærd i 2017 var antallet af nye kræfttilfælde 111.684, 5.852 flere mennesker end i 2015. Især leverkræft indtager en fjerdeplads på kræftranglisten. De vigtigste årsager til leverkræft er hepatitis B, hepatitis C eller skrumpelever forårsaget af alkohol. Andre årsager omfatter Aspergillus flavus-toksin, ikke-alkoholisk fedtleversygdom og leveraspirater osv.

Immuncelleterapi er et spirende felt i behandlingen af ​​fremskreden leverkræft. Mange typer immuneffektorceller såsom lymfokinaktiverede dræberceller (LAK), dendritiske celler (DC), tumorinfiltrerende lymfocytceller (TIL), cytokininducerede dræberceller (CIK) og lymfocytaktiverede lymfocytceller (LAK) er bruges til behandling af fremskreden leverkræft. CIK-celler er blevet udviklet til immunterapiapplikationer. CIK-celler, såsom CD3+CD56+-celler, CD3+CD56-celler og CD3-CD56+-celler, har evnen til at dræbe tumorer direkte ved at demonstrere den ikke-restriktive cytolytiske virkning af MHC, svarende til funktionen af ​​generelle T-celler. CIK-celler binder til LFA-1-ligander på tumorceller gennem LFA-1, hvilket resulterer i tumorcelledrab, og derefter binding af receptoren til dens ligand på NK-celler initierer en nedstrøms cellesignalvej og aktiverer yderligere CIK-celler for tumorcytotoksicitet. Endelig aktiverer CIK-celler signalvejen via Fas-FasL og inducerer apoptose i kræftceller. DC'er er differentieret fra hæmatopoietiske stamceller i knoglemarven, ofte i form af monocytter, som differentieres til modne dendritiske celler som reaktion på cytokinstimulering. Efter tumorassocieret antigen (TAA) fagocytose behandles antigener af to veje, den cytosoliske pathway og den vakuolære pathway, hvorved de bearbejdes til peptider og indlæses på det store histokompatibilitetskompleks klasse I(MHC I). Derefter leveres TAA-MHC I-komplekset til DC-overfladen. Når DC-præsenterende TAA'er migrerer og når lymfeknuderne, er de i stand til at prime T-celler og fremkalde antitumorimmunitet. Dendritiske celler er effektive aktivatorer af naive T-celler og er potente APC'er. De spiller en central rolle i immunmedieret cancereliminering gennem antigenpræsentation og T-celle-priming. For nylig er de blevet kombineret til DC-CIK-celleterapi, som er en kombinationsimmunterapi, hvor DC- og CIK-celler dyrkes sammen. Med hensyn til terapeutisk mekanisme er dendritiske celler specialiserede antigenpræsenterende celler, og modne dendritiske celler kan præsentere tumorantigener via MHC-I-vejen for effektivt at modvirke tumorcellernes immunudslipsmekanisme. Den specifikke tumor-dræbende effekt af CIK forstærkes yderligere. Mange undersøgelser har vist, at behandling af cancerpatienter med DC-CIK-celler forlænger overlevelsestiden betydeligt og forbedrer patientens immunfunktion.

Nylige tendenser inden for kræftbehandling har bekræftet, at når kryoablation af tumorer kombineres med immuncelleterapi, kan det have en god komplementær effekt og væsentligt forbedre effektiviteten af ​​kræftbehandling. Det menes, at kryoterapi forårsager nekrose af tumorceller gennem de fysiske ændringer af osmotisk chok frembragt ved gentagen frysning og optøning, hvilket igen frigiver tumorantigener og aktiverer antitumorimmunresponser. En retrospektiv undersøgelse udført i 2013 hos patienter med stadium IV lungecancer undersøgte effektiviteten af ​​kryoablation kombineret med immuncelle DC-CIK og viste, at kryoablation med DC-CIK signifikant forlængede patienternes samlede overlevelse (OS). Resultaterne af det kliniske forsøg i 2017 viste, at kryoablation med NK-celleterapi forbedrede den kliniske responsrate og sygdomskontrolrate (DCR) hos patienter med fremskreden lungekræft, med andelen af ​​patienter med PR (63,3 % vs. 43,3 %, P<0,01) og sygdomsbekæmpelsesrate ( Resultaterne af det kliniske forsøg med fremskreden hepatocellulært karcinom viste, at blandt 61 patienter indlagt fra 2015 til 2017 forlængede kryoablation med NK-immunterapi signifikant den progressionsfrie overlevelse (PFS) hos patienter (9,5%). (PFS) (9,1 måneder vs. 7,6 måneder, P=0,0107), svarprocent (60 % vs. 46,1 %, P<0,05) og sygdomsbekæmpelsesrate (85,7 % vs. 69,2 %, P<0,05).

Forsøget var designet som et enkeltarmet, ukontrolleret, åbent, ikke-tilfældigt tildelingsdesign. Effekten og sikkerheden af ​​hepatisk arterieinfusion med autologe DC-CIK-immunceller før og efter ablation af levertumorer ved brug af kryoablationsteknik hos patienter med fremskreden levercancer blev undersøgt. DC-CIK immuncelleterapiteknologien er udviklet i samarbejde med Bohui Biotech, og kernecelleteknologien blev overført fra Dr. Hasumi autolog immuncelleterapi i Japan. Programmet vil spore ændringerne i tumorstørrelse og tumorindeks før og efter behandling og udføre sikkerhedsvurdering for at evaluere sikkerheden og effektiviteten af ​​denne forsøgsbehandling.

Under det kliniske forsøg vil der blive indsamlet perifert blod fra patienter til eksplorativ indeksanalyse for at komplementere de kliniske evalueringsresultater. Ifølge resultaterne af det kliniske studie i 2013 havde patienter med fase IV solid cancer, som havde fejlet standardbehandling, øget CD8+CD56+ cellepopulationer efter autolog immuncellebehandling af Dr. Hasumi i Japan og fortsatte med at blive fulgt op indtil et år senere . I 2019 viste en undersøgelse også, at sygdomskontrol var lavere i gruppen af ​​patienter med leverkræft med høje frit DNA-koncentrationer behandlet med sorafenib end i gruppen med lave frit DNA-koncentrationer. Helgenomsekventering af cellefrit DNA (cfDNA) for at opnå kopiantalændringsprofiler (CNA) kan bruges som prædiktorer for sorafenib-behandlingsresultat. Derfor blev der i dette kliniske forsøg taget blodprøver fra patienter før og efter behandling, og fordelingen af ​​immuncellepopulationer og ændringer i cellefrit DNA (cfDNA) i blod blev analyseret separat ved at adskille buffy coat og plasma ved hjælp af en tæthed gradientcentrifuge og ved hjælp af Qubit 2.0 fluorometer. Qubit dsDNA High Sensitivity assay-kittet (Life Technology, Carlsbad, CA, USA) blev brugt til at kvantificere mængden af ​​frit DNA og til at detektere kopiantallet af frit DNA og til at analysere det frie DNA for at finde ud af de biomarkører, der kan bruges til sporing af behandlingseffekt.