Verdivurdering av sikkerheten og effekten av kombinasjon av kryoablasjon og dendriske celle/cytokininduserte morderceller behandling for avansert leverkreft

Verdens helseorganisasjons internasjonale byrå for kreftforskning (IARC) har offentliggjort de siste globale kreftbyrdedataene for 2020, som viser at 19,3 millioner nye krefttilfeller skjedde og nesten 10 millioner dødsfall skjedde i 2020. For tiden vil én av fem mennesker i verden ha kreft i løpet av livet, og én av åtte menn og én av 11 kvinner vil dø av kreft. I følge Taiwans kreftregisterintroduksjon fra helse- og velferdsdepartementet i 2017 var antallet nye krefttilfeller 111 684, 5 852 flere enn i 2015. Spesielt leverkreft ligger på fjerde plass i kreftrangeringen. De viktigste årsakene til leverkreft er hepatitt B, hepatitt C eller skrumplever forårsaket av alkohol. Andre årsaker inkluderer Aspergillus flavus-toksin, ikke-alkoholholdig fettleversykdom og leveraspirater etc.

Immuncelleterapi er et voksende felt i behandlingen av avansert leverkreft. Mange typer immuneffektorceller som lymfokinaktiverte drepeceller (LAK), dendritiske celler (DC), tumorinfiltrerende lymfocyttceller (TIL), cytokininduserte morderceller (CIK) og lymfocyttaktiverte lymfocyttceller (LAK) er brukes til å behandle avansert leverkreft. CIK-celler er utviklet for immunterapiapplikasjoner. CIK-celler som CD3+CD56+-celler, CD3+CD56-celler og CD3-CD56+-celler, har evnen til å drepe svulster direkte ved å demonstrere den ikke-restriktive cytolytiske effekten av MHC, lik funksjonen til generelle T-celler. CIK-celler binder seg til LFA-1-ligander på tumorceller gjennom LFA-1, noe som resulterer i tumorcelledrap, og deretter binding av reseptoren til sin ligand på NK-celler initierer en nedstrøms cellesignalvei og aktiverer CIK-celler ytterligere for tumorcytotoksisitet. Til slutt aktiverer CIK-celler signalveien via Fas-FasL og induserer apoptose i kreftceller. DC-er er differensiert fra hematopoietiske stamceller i benmargen, ofte i form av monocytter, som differensierer til modne dendrittiske celler som respons på cytokinstimulering. Etter tumorassosiert antigen (TAA) fagocytose behandles antigener med to veier, den cytosoliske banen og den vakuolære banen, hvorved de blir prosessert til peptider og lastet inn på det store histokompatibilitetskomplekset klasse I (MHC I). Deretter leveres TAA-MHC I-komplekset til DC-overflaten. Når DC-presenterende TAA-er migrerer og når lymfeknutene, er de i stand til å prime T-celler og gi antitumorimmunitet. Dendrittiske celler er effektive aktivatorer av naive T-celler og er potente APC-er. De spiller en sentral rolle i immunmediert krefteliminering gjennom antigenpresentasjon og T-cellepriming. Nylig har de blitt kombinert for å danne DC-CIK-celleterapi, som er en kombinasjonsimmunterapi hvor DC- og CIK-celler dyrkes sammen. Når det gjelder terapeutisk mekanisme, er dendrittiske celler spesialiserte antigenpresenterende celler, og modne dendrittiske celler kan presentere tumorantigener via MHC-I-banen for effektivt å motvirke immunfluktmekanismen til tumorceller. Den spesifikke tumor-drepende effekten av CIK forsterkes ytterligere. Mange studier har vist at behandling av kreftpasienter med DC-CIK-celler forlenger overlevelsestiden betydelig og forbedrer immunfunksjonen til pasienten.

Nyere trender innen kreftbehandling har bekreftet at når kryoablasjon av svulster kombineres med immuncelleterapi, kan det ha en god komplementær effekt og betydelig forbedre effekten av kreftbehandling. Det antas at kryoterapi forårsaker nekrose av tumorceller gjennom de fysiske endringene av osmotisk sjokk produsert ved gjentatt frysing og tining, som igjen frigjør tumorantigener og aktiverer antitumorimmunresponser. En retrospektiv studie utført i 2013 hos pasienter med stadium IV lungekreft undersøkte effekten av kryoablasjon kombinert med immuncelle DC-CIK og viste at kryoablasjon med DC-CIK betydelig forlenget den totale overlevelsen (OS) til pasienter. Resultatene av den kliniske studien i 2017 viste at kryoablasjon med NK-celleterapi forbedret den kliniske responsraten og sykdomskontrollraten (DCR) for pasienter med avansert lungekreft, med andelen pasienter med PR (63,3 % vs. 43,3 %, P<0,01) og sykdomskontrollrate ( Resultatene fra den kliniske studien i avansert hepatocellulært karsinom viste at blant 61 pasienter innlagt fra 2015 til 2017, forlenget kryoablasjon med NK-immunterapi signifikant den progresjonsfrie overlevelsen (PFS) til pasientene (9,5%). (PFS) (9,1 måneder vs. 7,6 måneder, P=0,0107), svarprosent (60 % vs. 46,1 %, P<0,05) og sykdomskontrollrate (85,7 % vs. 69,2 %, P<0,05).

Forsøket ble designet som et enarms, ukontrollert, åpent, ikke-tilfeldig oppdragsdesign. Effekten og sikkerheten av leverarterieinfusjon med autologe DC-CIK-immunceller før og etter ablasjon av levertumorer ved bruk av kryoablasjonsteknikk hos pasienter med avansert leverkreft ble undersøkt. DC-CIK immuncelleterapiteknologien ble utviklet i samarbeid med Bohui Biotech, og kjernecelleteknologien ble overført fra Dr. Hasumi autolog immuncelleterapi i Japan. Programmet vil spore endringene i tumorstørrelse og tumorindeks før og etter behandling, og gjennomføre sikkerhetsvurderinger for å evaluere sikkerheten og effekten av denne prøvebehandlingen.

I løpet av den kliniske utprøvingen vil perifert blod bli samlet inn fra pasienter for utforskende indeksanalyse for å komplettere de kliniske evalueringsresultatene. I følge resultatene fra den kliniske studien i 2013 hadde pasienter med fase IV solid kreft som hadde mislyktes med standardbehandling økt CD8+CD56+ cellepopulasjoner etter autolog immuncelleterapi av Dr. Hasumi i Japan og fortsatte å bli fulgt opp til ett år senere . I 2019 viste en studie også at sykdomskontroll var lavere i gruppen pasienter med leverkreft med høye konsentrasjoner av fritt DNA behandlet med sorafenib enn i gruppen med lave konsentrasjoner av fritt DNA. Helgenomsekvensering av cellefritt DNA (cfDNA) for å oppnå kopinummerendring (CNA) profiler kan brukes som prediktorer for sorafenibbehandlingsresultat. Derfor ble det i denne kliniske studien tatt blodprøver fra pasienter før og etter behandling, og fordelingen av immuncellepopulasjoner og endringer i cellefritt DNA (cfDNA) i blod ble analysert separat ved å separere buffy coat og plasma ved hjelp av en tetthet gradientsentrifuge, og bruk av Qubit 2.0 fluorometer. Qubit dsDNA High Sensitivity assay-settet (Life Technology, Carlsbad, CA, USA) ble brukt til å kvantifisere mengden fritt DNA og for å oppdage kopiantallet av fritt DNA, og for å analysere det frie DNAet for å finne ut hvilke biomarkører som kan brukes til sporing av behandlingseffekt.