Bewertung der Sicherheit und Wirksamkeit einer Kombination aus Kryoablation und Behandlung mit dendrischen Zellen/Zytokin-induzierten Killerzellen bei fortgeschrittenem Leberkrebs

Die Internationale Agentur für Krebsforschung (IARC) der Weltgesundheitsorganisation hat die neuesten Daten zur globalen Krebsbelastung für 2020 veröffentlicht, die zeigen, dass im Jahr 2020 19,3 Millionen neue Krebsfälle und fast 10 Millionen Todesfälle aufgetreten sind. Derzeit erkrankt weltweit jeder fünfte Mensch im Laufe seines Lebens an Krebs, und einer von acht Männern und eine von elf Frauen stirbt an Krebs. Laut der Einführung des taiwanesischen Krebsregisters durch das Ministerium für Gesundheit und Wohlfahrt im Jahr 2017 betrug die Zahl der neuen Krebsfälle 111.684, 5.852 mehr Menschen als im Jahr 2015. Vor allem Leberkrebs rangiert auf Platz vier der Krebs-Rangliste. Die Hauptursachen für Leberkrebs sind Hepatitis B, Hepatitis C oder eine alkoholbedingte Leberzirrhose. Andere Ursachen sind Aspergillus flavus Toxin, nicht-alkoholische Fettlebererkrankungen und Leberaspirate etc.

Die Immunzelltherapie ist ein aufstrebendes Gebiet in der Behandlung von fortgeschrittenem Leberkrebs. Viele Arten von Immuneffektorzellen wie Lymphokin-aktivierte Killerzellen (LAK), dendritische Zellen (DC), tumorinfiltrierende Lymphozytenzellen (TIL), Zytokin-induzierte Killerzellen (CIK) und Lymphozyten-aktivierte Lymphozytenzellen (LAK) sind zur Behandlung von fortgeschrittenem Leberkrebs. CIK-Zellen wurden für Immuntherapieanwendungen entwickelt. CIK-Zellen wie CD3+CD56+-Zellen, CD3+CD56--Zellen und CD3-CD56+-Zellen haben die Fähigkeit, Tumore direkt abzutöten, indem sie die nicht-restriktive zytolytische Wirkung von MHC demonstrieren, ähnlich der Funktion allgemeiner T-Zellen. CIK-Zellen binden über LFA-1 an LFA-1-Liganden auf Tumorzellen, was zum Abtöten von Tumorzellen führt, und die anschließende Bindung des Rezeptors an seinen Liganden auf NK-Zellen initiiert einen nachgeschalteten Zellsignalweg und aktiviert die CIK-Zellen weiter für die Tumorzytotoxizität. Schließlich aktivieren CIK-Zellen den Signalweg über Fas-FasL und induzieren Apoptose in Krebszellen. DCs werden von hämatopoetischen Stammzellen im Knochenmark differenziert, häufig in Form von Monozyten, die sich als Reaktion auf eine Zytokinstimulation zu reifen dendritischen Zellen differenzieren. Nach der Phagozytose von tumorassoziierten Antigenen (TAA) werden Antigene über zwei Wege behandelt, den zytosolischen Weg und den vakuolären Weg, über die sie zu Peptiden verarbeitet und auf den Haupthistokompatibilitätskomplex Klasse I (MHC I) geladen werden. Dann wird der TAA-MHC I-Komplex an die DC-Oberfläche abgegeben. Wenn DC-präsentierende TAAs wandern und die Lymphknoten erreichen, sind sie in der Lage, T-Zellen zu aktivieren und eine Anti-Tumor-Immunität auszulösen. Dendritische Zellen sind effiziente Aktivatoren naiver T-Zellen und potente APCs. Sie spielen eine zentrale Rolle bei der immunvermittelten Krebseliminierung durch Antigenpräsentation und T-Zell-Priming. In jüngerer Zeit wurden sie zur DC-CIK-Zelltherapie kombiniert, einer kombinierten Immuntherapie, bei der DC- und CIK-Zellen zusammen kultiviert werden. In Bezug auf den therapeutischen Mechanismus sind dendritische Zellen spezialisierte Antigen-präsentierende Zellen, und reife dendritische Zellen können Tumorantigene über den MHC-I-Weg präsentieren, um dem Immune-Escape-Mechanismus von Tumorzellen wirksam entgegenzuwirken. Die spezifische tumortötende Wirkung von CIK wird weiter verstärkt. Viele Studien haben gezeigt, dass die Behandlung von Krebspatienten mit DC-CIK-Zellen die Überlebenszeit signifikant verlängert und die Immunfunktion des Patienten verbessert.

Jüngste Trends in der Krebsbehandlung haben bestätigt, dass die Kryoablation von Tumoren in Kombination mit einer Immunzelltherapie eine gute komplementäre Wirkung haben und die Wirksamkeit der Krebsbehandlung erheblich verbessern kann. Es wird angenommen, dass die Kryotherapie durch die physikalischen Veränderungen des osmotischen Schocks, der durch wiederholtes Einfrieren und Auftauen erzeugt wird, eine Nekrose von Tumorzellen verursacht, was wiederum Tumorantigene freisetzt und Antitumor-Immunantworten aktiviert. Eine retrospektive Studie, die 2013 bei Patienten mit Lungenkrebs im Stadium IV durchgeführt wurde, untersuchte die Wirksamkeit der Kryoablation in Kombination mit DC-CIK von Immunzellen und zeigte, dass die Kryoablation mit DC-CIK das Gesamtüberleben (OS) der Patienten signifikant verlängerte. Die Ergebnisse der klinischen Studie von 2017 zeigten, dass die Kryoablation mit NK-Zelltherapie die klinische Ansprechrate und die Krankheitskontrollrate (DCR) von Patienten mit fortgeschrittenem Lungenkrebs verbesserte, wobei der Anteil der Patienten mit PR (63,3 % vs. 43,3 %, P < 0,01) und Krankheitskontrollrate (Die Ergebnisse der klinischen Studie bei fortgeschrittenem hepatozellulärem Karzinom zeigten, dass bei 61 Patienten, die zwischen 2015 und 2017 aufgenommen wurden, die Kryoablation mit NK-Immuntherapie das progressionsfreie Überleben (PFS) der Patienten signifikant verlängerte (9,5 %). (PFS) (9,1 Monate vs. 7,6 Monate, P = 0,0107), Ansprechrate (60 % vs. 46,1 %, P < 0,05) und Krankheitskontrollrate (85,7 % vs. 69,2 %, P<0,05).

Die Studie war als einarmiges, unkontrolliertes, offenes Design ohne zufällige Zuordnung konzipiert. Die Wirksamkeit und Sicherheit der hepatischen Arterieninfusion mit autologen DC-CIK-Immunzellen vor und nach der Ablation von Lebertumoren unter Verwendung der Kryoablationstechnik bei Patienten mit fortgeschrittenem Leberkrebs wurde untersucht. Die DC-CIK-Immunzelltherapie-Technologie wurde in Zusammenarbeit mit Bohui Biotech entwickelt, und die Kernzelltechnologie wurde von der autologen Immunzelltherapie von Dr. Hasumi in Japan übertragen. Das Programm wird die Veränderungen der Tumorgröße und des Tumorindex vor und nach der Behandlung verfolgen und eine Sicherheitsbewertung durchführen, um die Sicherheit und Wirksamkeit dieser Studienbehandlung zu bewerten.

Während der klinischen Studie wird den Patienten peripheres Blut für eine explorative Indexanalyse entnommen, um die Ergebnisse der klinischen Bewertung zu ergänzen. Den Ergebnissen der klinischen Studie aus dem Jahr 2013 zufolge hatten Patienten mit solidem Krebs im Stadium IV, bei denen die Standardbehandlung versagt hatte, nach der autologen Immunzelltherapie durch Dr. Hasumi in Japan erhöhte CD8+CD56+-Zellpopulationen und wurden bis ein Jahr später weiterverfolgt . Im Jahr 2019 zeigte eine Studie auch, dass die Krankheitskontrolle in der Gruppe der Patienten mit Leberkrebs mit hohen Konzentrationen an freier DNA, die mit Sorafenib behandelt wurden, geringer war als in der Gruppe mit niedrigen Konzentrationen an freier DNA. Die Sequenzierung des gesamten Genoms von zellfreier DNA (cfDNA) zur Erstellung von Copy Number Alteration (CNA)-Profilen kann als Prädiktor für das Behandlungsergebnis von Sorafenib verwendet werden. Daher wurden in dieser klinischen Studie den Patienten vor und nach der Behandlung Blutproben entnommen und die Verteilung von Immunzellpopulationen und Veränderungen der zellfreien DNA (cfDNA) im Blut separat analysiert, indem Buffy Coat und Plasma anhand einer Dichte getrennt wurden Gradientenzentrifuge und mit dem Qubit 2.0 Fluorometer. Das Qubit dsDNA High Sensitivity Assay Kit (Life Technology, Carlsbad, CA, USA) wurde verwendet, um die Menge an freier DNA zu quantifizieren und die Kopienzahl freier DNA nachzuweisen und um die freie DNA zu analysieren, um die Biomarker herauszufinden, die sein können Wird für die Verfolgung des Behandlungseffekts verwendet.