Valutazione della sicurezza e dell'efficacia della combinazione di crioablazione e trattamento con cellule killer indotte da cellule dendriche/citochine per tumori epatici avanzati

L'Agenzia internazionale per la ricerca sul cancro (IARC) dell'Organizzazione mondiale della sanità ha pubblicato gli ultimi dati sul carico globale di cancro per il 2020, che mostrano che nel 2020 si sono verificati 19,3 milioni di nuovi casi di cancro e quasi 10 milioni di decessi. Attualmente, una persona su cinque nel mondo avrà il cancro nel corso della sua vita, e un uomo su otto e una donna su 11 moriranno di cancro. Secondo l'introduzione del registro dei tumori di Taiwan del Ministero della salute e del benessere nel 2017, il numero di nuovi casi di cancro è stato di 111.684, 5.852 persone in più rispetto al 2015. Il cancro al fegato, in particolare, è al quarto posto nella classifica dei tumori. Le principali cause di cancro al fegato sono l'epatite B, l'epatite C o la cirrosi epatica causata dall'alcol. Altre cause includono la tossina di Aspergillus flavus, steatosi epatica non alcolica e aspirati epatici ecc.

La terapia cellulare immunitaria è un campo emergente nel trattamento del carcinoma epatico avanzato. Molti tipi di cellule effettrici immunitarie come cellule killer attivate da linfochine (LAK), cellule dendritiche (DC), cellule linfocitarie infiltranti il ​​tumore (TIL), cellule killer indotte da citochine (CIK) e cellule linfocitarie attivate da linfociti (LAK) sono usato per trattare il cancro al fegato avanzato. Le cellule CIK sono state sviluppate per applicazioni di immunoterapia. Le cellule CIK come le cellule CD3+CD56+, le cellule CD3+CD56- e le cellule CD3-CD56+, hanno la capacità di uccidere i tumori direttamente dimostrando l'effetto citolitico non restrittivo dell'MHC, simile alla funzione delle cellule T generali. Le cellule CIK si legano ai ligandi LFA-1 sulle cellule tumorali attraverso LFA-1, con conseguente uccisione delle cellule tumorali, e quindi il legame del recettore al suo ligando sulle cellule NK avvia una via di segnalazione cellulare a valle e attiva ulteriormente le cellule CIK per la citotossicità tumorale. Infine, le cellule CIK attivano la via di segnalazione tramite Fas-FasL e inducono l'apoptosi nelle cellule tumorali. Le DC sono differenziate dalle cellule staminali ematopoietiche nel midollo osseo, spesso sotto forma di monociti, che si differenziano in cellule dendritiche mature in risposta alla stimolazione delle citochine. Dopo la fagocitosi dell'antigene associato al tumore (TAA), gli antigeni vengono trattati da due vie, la via citosolica e la via vacuolare, mediante le quali vengono trasformati in peptidi e caricati sul complesso maggiore di istocompatibilità di classe I (MHC I). Quindi il complesso TAA-MHC I viene consegnato alla superficie DC. Quando i TAA presentanti DC migrano e raggiungono i linfonodi, sono in grado di innescare le cellule T e stimolare l'immunità antitumorale. Le cellule dendritiche sono attivatori efficienti di cellule T naïve e sono potenti APC. Svolgono un ruolo centrale nell'eliminazione del cancro immuno-mediata attraverso la presentazione dell'antigene e l'innesco delle cellule T. Più recentemente, sono stati combinati per formare la terapia cellulare DC-CIK, che è un'immunoterapia combinata in cui le cellule DC e CIK vengono coltivate insieme. In termini di meccanismo terapeutico, le cellule dendritiche sono cellule presentanti l'antigene specializzate e le cellule dendritiche mature possono presentare antigeni tumorali attraverso la via MHC-I per contrastare efficacemente il meccanismo di fuga immunitaria delle cellule tumorali. L'effetto specifico di uccisione del tumore di CIK è ulteriormente potenziato. Molti studi hanno dimostrato che il trattamento di pazienti oncologici con cellule DC-CIK prolunga significativamente il tempo di sopravvivenza e migliora la funzione immunitaria del paziente.

Le recenti tendenze nel trattamento del cancro hanno confermato che quando la crioablazione dei tumori è combinata con la terapia cellulare immunitaria, può avere un buon effetto complementare e migliorare significativamente l'efficacia del trattamento del cancro. Si ritiene che la crioterapia causi la necrosi delle cellule tumorali attraverso i cambiamenti fisici dello shock osmotico prodotti da ripetuti congelamenti e scongelamenti, che a loro volta rilasciano antigeni tumorali e attivano risposte immunitarie antitumorali. Uno studio retrospettivo condotto nel 2013 su pazienti con carcinoma polmonare in stadio IV ha esaminato l'efficacia della crioablazione combinata con cellule immunitarie DC-CIK e ha dimostrato che la crioablazione con DC-CIK ha prolungato significativamente la sopravvivenza globale (OS) dei pazienti. I risultati dello studio clinico del 2017 hanno mostrato che la crioablazione con terapia cellulare NK ha migliorato il tasso di risposta clinica e il tasso di controllo della malattia (DCR) dei pazienti con carcinoma polmonare avanzato, con la percentuale di pazienti con PR (63,3% vs. 43,3%, P<0,01) e tasso di controllo della malattia (I risultati della sperimentazione clinica nel carcinoma epatocellulare avanzato hanno mostrato che tra 61 pazienti ricoverati dal 2015 al 2017, la crioablazione con immunoterapia NK ha prolungato significativamente la sopravvivenza libera da progressione (PFS) dei pazienti (9,5%). (PFS) (9,1 mesi vs. 7,6 mesi, P=0,0107), tasso di risposta (60% vs. 46,1%, P<0,05) e tasso di controllo della malattia (85,7% vs. 69,2%, P<0,05).

Lo studio è stato concepito come un progetto di assegnazione a braccio singolo, non controllato, in aperto e non casuale. Sono state studiate l'efficacia e la sicurezza dell'infusione dell'arteria epatica con cellule immunitarie DC-CIK autologhe prima e dopo l'ablazione di tumori epatici mediante tecnica di crioablazione in pazienti con carcinoma epatico avanzato. La tecnologia della terapia cellulare immunitaria DC-CIK è stata sviluppata in collaborazione con Bohui Biotech e la tecnologia cellulare di base è stata trasferita dalla terapia cellulare immunitaria autologa del Dr. Hasumi in Giappone. Il programma monitorerà i cambiamenti nelle dimensioni del tumore e nell'indice del tumore prima e dopo il trattamento e condurrà una valutazione della sicurezza per valutare la sicurezza e l'efficacia di questo trattamento di prova.

Durante la sperimentazione clinica, il sangue periferico verrà raccolto dai pazienti per l'analisi dell'indice esplorativo per integrare i risultati della valutazione clinica. Secondo i risultati dello studio clinico del 2013, i pazienti con carcinoma solido in stadio IV che avevano fallito il trattamento standard avevano aumentato le popolazioni di cellule CD8+CD56+ dopo la terapia con cellule immunitarie autologhe del Dr. Hasumi in Giappone e hanno continuato a essere seguiti fino a un anno dopo . Nel 2019, uno studio ha anche dimostrato che il controllo della malattia era inferiore nel gruppo di pazienti con carcinoma epatico con alte concentrazioni di DNA libero trattati con sorafenib rispetto al gruppo con basse concentrazioni di DNA libero. Il sequenziamento dell'intero genoma del DNA libero da cellule (cfDNA) per ottenere profili di alterazione del numero di copie (CNA) può essere utilizzato come predittore dell'esito del trattamento con sorafenib. Pertanto, in questo studio clinico, sono stati prelevati campioni di sangue dai pazienti prima e dopo il trattamento e la distribuzione delle popolazioni di cellule immunitarie e i cambiamenti nel DNA libero da cellule (cfDNA) nel sangue sono stati analizzati separatamente separando il buffy coat e il plasma utilizzando una densità centrifuga a gradiente e utilizzando il Fluorimetro Qubit 2.0. Il kit di analisi qubit dsDNA High Sensitivity (Life Technology, Carlsbad, CA, USA) è stato utilizzato per quantificare la quantità di DNA libero e per rilevare il numero di copie di DNA libero e per analizzare il DNA libero per scoprire i biomarcatori che possono essere utilizzato per il tracciamento dell'effetto del trattamento.