超音波ガイド下手動真空吸引に由来する受胎産物の研究

妊娠初期の喪失は非常に一般的であり、約 4 人に 1 人の女性が一生のうちに流産を経験します [1]。 妊娠喪失の病因は、遺伝的、解剖学的、内分泌学的、および免疫学的異常が関係しているにもかかわらず、ほとんど不明のままです[2]。

胚性/胎児性染色体異常は、早期妊娠喪失の約 50% に寄与し、そのうち 60-70% は異数性であることが知られており、さまざまな国際社会によって推奨されている現在のゴールド スタンダード核型分析アプローチによって大部分を検出できます。 ただし、従来の核型分析の欠点に​​は、培養の失敗、母体細胞の混入 (MCC)、検出解像度の制限 (5 ～ 10 Mb)、特定の細胞系統の増殖差などのリスクがあり、遺伝子異常、特にモザイク現象の診断を妨げる可能性があります。 核型分析の解像度を超える追加の遺伝的要因は十分に研究されていません。

次世代シーケンシング (NGS) は、遺伝子検査を新たなフロンティアにもたらし、検出可能なゲノム バリアントの範囲を拡大しました。 さらに、長年にわたるコストの大幅な削減により、遺伝子診断検査の実施が容易になりました。 当社のカスタマイズされた浅い読み取り深度のゲノム配列決定分析パイプライン、すなわちローパス ゲノム配列決定 (GS) は、ゲノム全体のコピー数バリアント (CNV、>50 kb) および低レベルの染色体モザイク (最低でも10％）。 さらに、不可解な構造再編成、ヘテロ接合性の欠如 (AOH)、および単一ヌクレオチドバリアント (SNV) の役割は、現在の研究ではあまり理解されていませんでした。

FetalSeq、ChromoSeq、30xWGS など、さまざまなバリアントをターゲットとするさまざまなバージョンのシーケンス プラットフォームが、香港中文大学の出生前遺伝子診断研究所ですでに確立され、検証されています。

無数の免疫集団と炎症集団を含むヒトの子宮内膜組織と脱落膜組織 [3-4] は、免疫学的に動的です。 月経周期の初期増殖期では、T 細胞は子宮内膜で最も豊富な白血球集団ですが、妊娠初期には全間質白血球の 20% まで減少します [5]。 マクロファージは、月経周期のすべての段階で子宮内膜組織にも存在しますが、後期分泌型子宮内膜と妊娠初期の脱落膜組織に最も多く存在します [6]。 後期分泌型子宮内膜および正常妊娠初期の脱落膜で観察される間質白血球の最も豊富な集団 (70%) は、固有の表現型を持つ大顆粒リンパ球 (LGL) です: CD56++、CD16-、CD57-、CD2±、CD38±、 CD3-、CD4-、CD8- [7-10]。 流産を繰り返す女性の分泌性子宮内膜では、平均 CD56+ 細胞数の増加が報告されています [11]。

T細胞サブセット間のバランス（すなわち CD4+ および CD8+ 細胞) が妊娠の成功を維持する役割を果たしていることについては、議論の余地があります。 いくつかの研究では、正常な対照と比較して、再発性流産歴のある女性の分泌型子宮内膜または妊娠初期の脱落膜の T 細胞サブセットの割合に違いはないと報告されています。一方、再発性流産歴のある女性からの子宮内膜生検では、CD8+ T 細胞の比率が高くなる方向へのシフトを説明する人もいます [12-15]。

T細胞集団の活性化状態は、妊娠喪失に潜在的に関与する細胞性免疫の別の指標を提供する可能性があります。 IL-2 受容体は、免疫組織化学的手法を使用して、正常な妊娠初期の脱落膜組織の T 細胞に存在しないことが報告されています [16]。しかし、フローサイトメトリーを使用すると、CD3+CD25+ 活性化 T 細胞が脱落膜組織で同定されています [17]。 CD69 は、T 細胞の表面に発現するもう 1 つの早期活性化マーカーです [18]。 一部の T 細胞は、月経周期全体および正常な妊娠初期において、このマーカーを構成的に発現します。

自然流産の約 60% は、発育中の受胎産物における数値的に異常な染色体に起因する [19] が、流産した女性の脱落膜における免疫学的現象に対処する今日までの限られたデータは、それらのデータを受胎産物に属する明確に定義された染色体異常と比較している。 すべての自然流産の 26% で発生する 16 トリソミーの染色体異常は生命と両立せず [20]、自然流産の議論の余地のない原因であるため、これは重要です。 したがって、私たちの研究の目的は、脱落膜白血球亜集団とそれらに関連する活性化マーカーが、染色体が正常な男性の受胎産物 (46XY) と比較して、トリソミー 16 受胎産物 (47XY+16 または 47XX+16) のいずれかの流産を有する女性間で異なるかどうかを判断することでした。妊娠年齢が一致した脱落膜組織と比較しました。 おそらく正常な女性の受胎産物（46XX）からのサンプルは、母体の細胞汚染の可能性と正確に区別できないため、研究のために選択されませんでした.

妊娠初期の喪失における流産または妊娠中絶 (TOP) を管理するために、超音波ガイド下手動真空吸引 (USG-MVA) は治療オプションの 1 つです。 USG-MVA は早期流産の治療に何十年も使用されてきました。 USG-MVA は、全身麻酔下での外科的除去よりも安全で費用対効果が高く、入院時間と費用が短いことが報告されています [21, 22]。 USG-MVA は吸引掻爬術です。 これは、子宮カニューレに取り付けられたハンドヘルド真空源 (バレルとプランジャーを備えたシリンジ) を使用して実行されます [23、24]。USG-MVA デバイスは、カニューレを介して子宮内容物をシリンジに吸引することによって機能します。 さらに、USG-MVA に由来する受胎産物を核型分析に送ることができます。