Untersuchung des Empfängnisprodukts, das aus ultraschallgeführter manueller Vakuumaspiration stammt

Frühe Fehlgeburten sind sehr häufig, etwa jede vierte Frau erleidet im Laufe ihres Lebens eine Fehlgeburt [1]. Die Ätiologie des Schwangerschaftsverlusts ist noch weitgehend unbekannt, obwohl genetische, anatomische, endokrinologische und immunologische Anomalien impliziert wurden [2].

Es ist bekannt, dass embryonale/fötale Chromosomenaberrationen zu etwa 50 % der Fehlgeburten in der Frühphase beigetragen haben, darunter 60-70 % Aneuploidien, die weitgehend durch den aktuellen Goldstandard-Karyotypisierungsansatz erkannt werden können, der von verschiedenen internationalen Gesellschaften empfohlen wird. Zu den Nachteilen der konventionellen Karyotypisierung gehören jedoch das Risiko eines Kulturversagens, einer mütterlichen Zellkontamination (MCC), einer begrenzten Nachweisauflösung (5-10 Mb) und eines unterschiedlichen Wachstums spezifischer Zelllinien, die die Diagnose genetischer Anomalien, insbesondere Mosaizismen, behindern könnten. Zusätzliche genetische Faktoren über die Auflösung der Karyotypisierung hinaus sind nicht gut untersucht.

Die Sequenzierung der nächsten Generation (NGS) hat Gentests an neue Grenzen gebracht und den Umfang nachweisbarer Genomvarianten erweitert. Darüber hinaus hat die erhebliche Kostensenkung im Laufe der Jahre die Durchführung genetischer Diagnosetests erleichtert. Unsere kundenspezifische analytische Pipeline für die Genomsequenzierung mit geringer Lesetiefe, nämlich die Low-Pass-Genomsequenzierung (GS), ermöglicht eine effiziente und kostengünstige Erkennung von genomweiten Kopienzahlvarianten (CNVs, >50 kb) und chromosomalen Mosaiken auf niedriger Ebene ( so niedrig wie 10 %). Darüber hinaus wurden die Rollen von kryptischen strukturellen Umlagerungen, Abwesenheit von Heterozygotie (AOH) und Einzelnukleotidvariante (SNV) in aktuellen Studien weniger verstanden.

Verschiedene Versionen von Sequenzierungsplattformen, die auf verschiedene Varianten abzielen, wurden bereits im Prenatal Genetic Diagnostic Laboratory der Chinese University of Hong Kong etabliert und validiert, darunter FetalSeq, ChromoSeq und 30xWGS.

Menschliche Endometrium- und Dezidualgewebe, die eine Vielzahl von Immun- und Entzündungspopulationen enthalten [3-4], sind immunologisch dynamisch. In der frühen proliferativen Phase des Menstruationszyklus sind T-Zellen die am häufigsten vorkommende Leukozytenpopulation im Endometrium, aber sie nehmen während der frühen Schwangerschaft auf 20 % aller stromalen Leukozyten ab [5]. Makrophagen sind in allen Phasen des Menstruationszyklus auch in Geweben des Endometriums vorhanden, kommen jedoch am häufigsten im späten sekretorischen Endometrium und in dezidualen Geweben während der frühen Schwangerschaft vor [6]. Die häufigste Population (70 %) von Stroma-Leukozyten, die im späten sekretorischen Endometrium und in der Decidua während der frühen normalen Schwangerschaft beobachtet wird, sind große granuläre Lymphozyten (LGL), die den einzigartigen Phänotyp tragen: CD56++, CD16-, CD57-, CD2±, CD38±, CD3-, CD4-, CD8- [7-10]. Im sekretorischen Endometrium von Frauen mit wiederholten Fehlgeburten wurde über eine erhöhte mittlere Anzahl von CD56+-Zellen berichtet [11].

Die Hypothese, dass das Gleichgewicht zwischen T-Zell-Untergruppen (d. h. CD4+- und CD8+-Zellen) eine Rolle bei der Aufrechterhaltung einer erfolgreichen Schwangerschaft spielt, ist umstritten. Einige Studien haben keinen Unterschied zwischen den Anteilen von T-Zell-Untergruppen entweder im sekretorischen Endometrium oder im ersten Trimenon der Dezidua von Frauen mit wiederholten Fehlgeburten in der Vorgeschichte im Vergleich zu normalen Kontrollen berichtet; während andere eine Verschiebung hin zu einem höheren Anteil von CD8+ T-Zellen in Endometriumbiopsien von Frauen mit einer Vorgeschichte von wiederholten Fehlgeburten beschrieben haben [12-15].

Der Aktivierungsstatus von T-Zellpopulationen kann einen weiteren Indikator für die zelluläre Immunität liefern, die möglicherweise an einem Schwangerschaftsverlust beteiligt ist. Unter Verwendung von immunhistochemischen Techniken wurde berichtet, dass der IL-2-Rezeptor auf T-Zellen in normalen Dezidualgeweben des ersten Trimesters fehlt [16]; Mittels Durchflusszytometrie wurden jedoch CD3+CD25+-aktivierte T-Zellen im dezidualen Gewebe identifiziert [17]. CD69 ist ein weiterer früher Aktivierungsmarker, der auf der Oberfläche von T-Zellen exprimiert wird [18]. Ein Teil der T-Zellen exprimiert diesen Marker konstitutiv während des gesamten Menstruationszyklus und in der normalen Frühschwangerschaft.

Ungefähr 60 % der spontanen Aborte sind zahlenmäßig abnormalen Chromosomen im sich entwickelnden Empfängnis zuzuschreiben [19], doch bisher begrenzte Daten, die sich mit immunologischen Phänomenen in der Dezidua von Frauen mit Fehlgeburt befassen, haben ihre Daten mit gut definierten chromosomalen Anomalien verglichen, die zu Empfängnissen gehören. Dies ist wichtig, da die Chromosomenanomalie Trisomie 16, die bei 26 % aller Spontanaborte auftritt, mit dem Leben nicht vereinbar ist [20] und somit eine unbestrittene Ursache für Spontanaborte wäre. Daher war der Zweck unserer Studie zu bestimmen, ob sich deziduale Leukozyten-Subpopulationen und ihre zugehörigen Aktivierungsmarker zwischen Frauen mit einer Fehlgeburt eines Trisomie-16-Konzeptus (47XY+16 oder 47XX+16) im Vergleich zu einem chromosomal normalen männlichen Konzeptus (46XY) unterschieden. und verglichen mit dem Gestationsalter entsprechenden dezidualen Geweben. Proben von vermutlich normalen weiblichen Konzeptusen (46XX) wurden wegen der Unfähigkeit, genau von einer möglichen mütterlichen Zellkontamination zu unterscheiden, nicht für die Untersuchung ausgewählt.

Zur Behandlung von Fehlgeburten oder Schwangerschaftsabbrüchen (TOP) bei Verlust des ersten Trimesters ist die ultraschallgeführte manuelle Vakuumaspiration (USG-MVA) eine der Behandlungsoptionen. USG-MVA zur Behandlung von Fehlgeburten in der Frühphase wird seit vielen Jahrzehnten eingesetzt. Es wurde berichtet, dass USG-MVA sicherer, kostengünstiger und mit kürzeren Krankenhausaufenthaltszeiten und -kosten verbunden ist als die chirurgische Evakuierung unter Vollnarkose [21, 22]. USG-MVA ist eine chirurgische Technik der Saugkürettage. Es wird unter Verwendung einer handgehaltenen Vakuumquelle (einer Spritze mit Zylinder und Kolben) durchgeführt, die an einer Uteruskanüle befestigt ist [23, 24]. Das USG-MVA-Gerät funktioniert durch Ansaugen des Uterusinhalts über die Kanüle in die Spritze. Darüber hinaus kann das von USG-MVA abgeleitete Empfängnisprodukt zur Karyotypisierungsanalyse gesendet werden.