Estudio del Producto de la Concepción Derivado de la Aspiración al Vacío Manual Guiada por Ultrasonido

La pérdida temprana del embarazo es muy común, aproximadamente una de cada cuatro mujeres experimentará un aborto espontáneo en su vida [1]. La etiología de la pérdida del embarazo sigue siendo en gran parte desconocida, aunque se han implicado anomalías genéticas, anatómicas, endocrinológicas e inmunológicas [2].

Se sabe que las aberraciones cromosómicas embrionarias/fetales contribuyeron a aproximadamente el 50 % de las pérdidas prematura de embarazo, entre las cuales el 60-70 % fueron aneuploidías, que en gran medida pueden detectarse mediante el enfoque actual de cariotipo estándar de oro recomendado por varias sociedades internacionales. Sin embargo, los inconvenientes del cariotipo convencional incluyen el riesgo de falla de cultivo, contaminación de células maternas (MCC), resolución de detección limitada (5-10 Mb) y crecimiento diferencial de linajes celulares específicos que podrían dificultar el diagnóstico de anomalías genéticas, particularmente mosaicismos. Los factores genéticos adicionales más allá de la resolución del cariotipo no están bien estudiados.

La secuenciación de próxima generación (NGS) ha llevado las pruebas genéticas a nuevas fronteras, ampliando el alcance de las variantes genómicas detectables. Además, su importante reducción de costos a lo largo de los años ha facilitado la implementación de pruebas de diagnóstico genético. Nuestra tubería analítica personalizada de secuenciación del genoma de profundidad de lectura superficial, a saber, la secuenciación del genoma de paso bajo (GS), permite la detección eficiente y rentable de variantes del número de copias de todo el genoma (CNV,> 50 kb) y mosaicismos cromosómicos de bajo nivel ( tan bajo como 10%). Además, los roles de los reordenamientos estructurales crípticos, la ausencia de heterocigosidad (AOH) y la variante de un solo nucleótido (SNV) se entendieron menos en los estudios actuales.

Ya se establecieron y validaron varias versiones de plataformas de secuenciación dirigidas a diferentes variantes en el Laboratorio de Diagnóstico Genético Prenatal de la Universidad China de Hong Kong, incluidas FetalSeq, ChromoSeq y 30xWGS.

Los tejidos endometriales y deciduales humanos, que contienen una miríada de poblaciones inmunitarias e inflamatorias [3-4], son inmunológicamente dinámicos. En la fase proliferativa temprana del ciclo menstrual, las células T son la población de leucocitos más abundante en el endometrio, pero disminuyen al 20% de todos los leucocitos del estroma durante el embarazo temprano [5]. Los macrófagos también están presentes en los tejidos endometriales durante todas las fases del ciclo menstrual, pero son más abundantes en el endometrio secretor tardío y en los tejidos deciduales durante el embarazo temprano [6]. La población más abundante (70%) de leucocitos del estroma observados en el endometrio secretor tardío y en la decidua durante el embarazo normal temprano son linfocitos granulares grandes (LGL) que tienen el fenotipo único: CD56++, CD16-, CD57-, CD2±, CD38±, CD3-, CD4-, CD8- [7-10]. Se ha informado un aumento en el número medio de células CD56+ en el endometrio secretor de mujeres con abortos espontáneos recurrentes [11].

La hipótesis de que el equilibrio entre los subconjuntos de células T (es decir, células CD4+ y CD8+) juega un papel en el mantenimiento de un embarazo exitoso es controvertido. Algunos estudios no informaron diferencias entre las proporciones de los subconjuntos de células T en el endometrio secretor o en la decidua del primer trimestre de mujeres con antecedentes de pérdida recurrente del embarazo en comparación con los controles normales; mientras que otros han descrito un cambio hacia una mayor proporción de células T CD8+ en biopsias de endometrio de mujeres con antecedentes de pérdida recurrente del embarazo [12-15].

El estado de activación de las poblaciones de células T puede proporcionar otro indicador de la inmunidad celular potencialmente involucrada en la pérdida del embarazo. Se ha informado que el receptor de IL-2 está ausente en las células T en tejidos deciduales normales del primer trimestre utilizando técnicas inmunohistoquímicas [16]; sin embargo, utilizando citometría de flujo, se han identificado células T activadas CD3+CD25+ en tejido decidual [17]. CD69 es otro marcador de activación temprana expresado en la superficie de las células T [18]. Una proporción de células T expresa constitutivamente este marcador a lo largo del ciclo menstrual y en el embarazo temprano normal.

Aproximadamente el 60% de los abortos espontáneos son atribuibles a cromosomas numéricamente anormales en el concepto en desarrollo [19], sin embargo, hasta la fecha, los datos limitados que abordan los fenómenos inmunológicos en la decidua de mujeres abortadas han comparado sus datos con anomalías cromosómicas bien definidas que pertenecen a los productos de la concepción. Esto es importante ya que la anomalía cromosómica trisomía 16, que ocurre en el 26% de todos los abortos espontáneos, es incompatible con la vida [20] y, por lo tanto, sería una causa indiscutible de aborto espontáneo. Por lo tanto, el propósito de nuestro estudio fue determinar si las subpoblaciones de leucocitos deciduales y sus marcadores de activación asociados eran diferentes entre las mujeres que tuvieron un aborto espontáneo de un concepto con trisomía 16 (47XY+16 o 47XX+16) en comparación con un concepto masculino cromosómicamente normal (46XY) y en comparación con tejidos deciduales de la misma edad gestacional. No se eligieron para el estudio muestras de mujeres embarazadas supuestamente normales (46XX) debido a la incapacidad de diferenciarlas con precisión de una posible contaminación con células maternas.

Para el manejo del aborto espontáneo o la terminación del embarazo (TOP) en la pérdida del primer trimestre, la aspiración manual al vacío guiada por ultrasonido (USG-MVA) es una de las opciones de tratamiento. La USG-MVA para el tratamiento de la pérdida temprana del embarazo se ha utilizado durante muchas décadas. Se ha informado que la USG-MVA es más segura, más rentable y se asocia con un tiempo y un costo de hospitalización más breves que la evacuación quirúrgica bajo anestesia general [21, 22]. La USG-MVA es una técnica quirúrgica de legrado por aspiración. Se realiza utilizando una fuente de vacío manual (una jeringa con cilindro y émbolo) conectada a una cánula uterina [23, 24] El dispositivo USG-MVA funciona aspirando el contenido uterino a través de la cánula hacia la jeringa. Además, el producto de la concepción derivado de USG-MVA puede enviarse para análisis de cariotipo.