骨髄増殖性腫瘍の治療におけるインターフェロンの作用機序 (IFN&SMP)
古典的な BCR-ABL 陰性の骨髄増殖性腫瘍 (MPN) には、真性赤血球増加症 (PV)、本態性血小板血症 (ET)、および原発性骨髄線維症 (PMF) が含まれます。 それらは、JAK2/STAT 経路を活性化する突然変異によって引き起こされる多能性造血幹細胞 (HSC) の形質転換に起因する骨髄性悪性腫瘍です。 最も一般的な変異は JAK2V617F です。 タイプ 1 およびタイプ 2 カルレティキュリン (CALR) およびトロンボポエチン受容体 (MPL) 変異も、ET および PMF で観察されます。 異なる経路に影響を与える追加の非 MPN 変異も、特に PMF に見られ、疾患の開始および/または表現型の変化および/または疾患の進行および/または治療への反応に関与しています。
MPN の効率的な治療法が明らかに緊急に必要とされています。 特に、PMF は、同種異系 HSC 移植と JAK 阻害剤が疾患の転帰に及ぼす影響が限られていることを除いて、根治的治療を受けないままです。 新しい治療アプローチの中で、Peg-IFNα2a (IFN) は最も効率的であり、JAK2V617F および CALRmut MPN 患者における高率の血液学的反応と、主に JAK2V617F 患者における深部分子反応 (DMR) を含むいくつかの分子反応の両方を含んでいます。 それにもかかわらず、私たち自身のものを含むいくつかの研究は、CALRmut患者のIFN分子応答が不均一であり、全体的にJAK2V617F患者よりもはるかに低いことを示しています. さらに、一部の JAK2V617F MPN 患者は IFN に応答せず、DMR は JAK2V617F 患者の約 20% でのみ観察されます。 最後に、DMR を取得するには長期の治療 (2 ～ 5 年) が必要であり、長期的な毒性の可能性があるため、DMR の成功が危うくなります。
CALRmut 患者における失敗、薬剤耐性、不均一な分子反応、および JAK2V617F 患者における DMR の長い遅延の根本的な理由は、主に IFNα が MPN 悪性クローンを標的とするメカニズムがとらえどころのないままであるため、不明のままです。
IFN の有効性の大幅な改善は、基礎研究と臨床研究なしには達成できません。 したがって、私たちの研究の2つのラインは、
- IFNαが腫瘍性HSCを特異的に標的にする方法を理解する
- IFNα療法中の患者反応の予測と改善
調査の概要
状態
条件
詳細な説明
古典的な BCR-ABL 陰性の骨髄増殖性腫瘍 (MPN) には、真性赤血球増加症 (PV)、本態性血小板血症 (ET)、および原発性骨髄線維症 (PMF) が含まれます。 それらは、JAK2/STAT 経路を活性化する突然変異によって引き起こされる多能性造血幹細胞 (HSC) の形質転換に起因する骨髄性悪性腫瘍です。 最も一般的な変異は JAK2V617F です。 タイプ 1 およびタイプ 2 カルレティキュリン (CALR) およびトロンボポエチン受容体 (MPL) 変異も、ET および PMF で観察されます。 異なる経路に影響を与える追加の非 MPN 変異も、特に PMF に見られ、疾患の開始および/または表現型の変化および/または疾患の進行および/または治療への反応に関与しています。
MPN の効率的な治療法が明らかに緊急に必要とされています。 特に、PMF は、同種異系 HSC 移植と JAK 阻害剤が疾患の転帰に及ぼす影響が限られていることを除いて、根治的治療を受けないままです。 新しい治療アプローチの中で、Peg-IFNα2a (IFN) は最も効率的であり、JAK2V617F および CALRmut MPN 患者における高率の血液学的反応と、主に JAK2V617F 患者における深部分子反応 (DMR) を含むいくつかの分子反応の両方を含んでいます。 それにもかかわらず、私たち自身のものを含むいくつかの研究は、CALRmut患者のIFN分子応答が不均一であり、全体的にJAK2V617F患者よりもはるかに低いことを示しています. さらに、一部の JAK2V617F MPN 患者は IFN に応答せず、DMR は JAK2V617F 患者の約 20% でのみ観察されます。 最後に、DMR を取得するには長期の治療 (2 ～ 5 年) が必要であり、長期的な毒性の可能性があるため、DMR の成功が危うくなります。
CALRmut 患者における失敗、薬剤耐性、不均一な分子反応、および JAK2V617F 患者における DMR の長い遅延の根本的な理由は、主に IFNα が MPN 悪性クローンを標的とするメカニズムがとらえどころのないままであるため、不明のままです。
IFN の有効性の大幅な改善は、基礎研究と臨床研究なしには達成できません。 したがって、私たちの研究の2つのラインは、
- IFNαが腫瘍性HSCを特異的に標的にする方法を理解する
- IFNα療法中の患者反応の予測と改善
基本的な観点からの主な目的は、IFN 治療中の患者の変異細胞のクローン構造を描き、MPN における IFN の作用メカニズムをよりよく理解することです。 IFN は特に JAK2V617F HSC を標的とし、CALRm 患者に同じ効果がない場合とその理由.
数学的モデルと組み合わせたクローン構造データを使用した以前の臨床研究は、前駆細胞への分化による JAK2V617F HSC の枯渇、したがって自己再生の喪失が、IFN による JAK2V617F 疾患の根絶の重要なメカニズムである可能性があることを示しています。 より多くの患者でこの仮説を確認し、疾患を引き起こす幹細胞に対する JAK2V617F および CALRm 変異の異なる効果の根拠を理解することを願っています。
二次的な目的は次のとおりです。
- より多くの患者で、CALRm 患者の IFN 治療に対する耐性を検証します。 さらに、JAK2V617F 患者とは対照的に、高 IFN 用量は、理解されていない理由で分子応答に有害です。
- IFN 誘導分子応答における関連変異の役割を調査します。
IFN 治療は、IFN 治療に対する耐性の原因となる可能性がある Tet2 や DNMT3a などの追加の変異を持つクローン (JAK2V617F 陽性または JAK2V617F 陰性) の出現を促進することが示されています 。 治療の成功におけるこれらの変異の役割を分析するために、患者数と追跡調査を増やしたいと考えています。 さらに、これらの追加の変異（新規または治療によって選択された）は、PVまたはTEよりも深刻な病状（MF、MDS、AML）の発症に有利に働く可能性があり、IFN治療患者の追跡調査で監視することが重要です.
-他の分子と組み合わせた IFN が初期患者の細胞に及ぼす影響を in vitro で調べます。 実際、私たちの基礎研究では、IFN の作用機序における PML の関与がすでに示されており、ヒ素が IFN の効果を大幅に増強することがわかりました。 正確にはどのようなメカニズムによるものなのか、深く調べていきます。
すべてのデータは、IFN 治療前または IFN 治療中に患者で収集され、データは、コロニーの単一細胞ジェノタイピングによって、および/または突然変異のジェノタイピングと組み合わせた単一細胞 RNA シーケンシングおよび/または in vitro アッセイによって収集されます。
研究の種類
入学 (予想される)
連絡先と場所
研究連絡先
- 名前：Isabelle Plo, PhD
- 電話番号：+33 1 42 11 54 93
- メール：isabelle.plo@gustaveroussy.fr
研究連絡先のバックアップ
- 名前：Léa Durix, MD,PhD
- メール：lea.durix@gustaveroussy.fr
研究場所
-
-
Ile De France
-
Villejuif、Ile De France、フランス、94805
- 募集
- Inserm U1287
-
コンタクト：
- Isabelle Plo, PhD
- 電話番号：+33 1 42 11 54 93
- メール：isabelle.plo@gustaveroussy.fr
-
コンタクト：
- Léa Durix
- 電話番号：+33 1 42 11 54 93
- メール：lea.durix@gustaveroussy.fr
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主任研究者：
- Florence Pasquier, MD, PhD
-
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参加基準
適格基準
就学可能な年齢
- 大人
- 高齢者
健康ボランティアの受け入れ
サンプリング方法
調査対象母集団
説明
包含基準:
- 18歳以上の成人男性または女性
- MPN の診断は紹介医によって以前に確立されており、その医師はペグ化 IFN で治療することを決定します。 患者は、組み入れ時に治療を受けているか、治療を受けていない可能性があり、新たに診断された患者である可能性があります。
- これらの患者は、社会保障制度に加入しているか、社会保障制度の恩恵を受けています
- これらすべての患者について、従来の方法で瀉血による治療を受けている一部の PV 患者を除いて、追加の 20 ～ 40 mL が収集されます。 この場合、これらの患者から血液バッグを収集します。 血液量は、患者の体重とサイズに応じて、300 ～ 450 mL の間で異なります。
- また、このプロトコルには、治療中に MPN (PV、TE、または MF) が急性白血病 (AL) に進行した患者も含まれます。 これらは、MPN の AP の患者になります (MPN は、MPN の急性形質転換 (AT) によって急性骨髄性白血病 (AML) に進行することもあります)。
- インフォームドコンセントに署名した患者
除外基準:
- 非包含基準は、一部の MF 患者が罹患する可能性のある貧血に関するものです。 したがって、紹介モニタリングの訪問時に貧血（Hb <10g）または輸血依存症（1か月あたり1個以上の赤血球）の患者は研究に含まれません。
- 裁判所の保護、後見または保佐を受けている人
研究計画
研究はどのように設計されていますか？
デザインの詳細
この研究は何を測定していますか？
主要な結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
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患者の造血前駆細胞のクローン構造
時間枠：IFN治療0日目から5年間、年3～4回
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血液サンプルは、前駆細胞 (CD34+ マーカー) から成熟細胞 (顆粒球) を分離するために処理されます。
前駆細胞は、多かれ少なかれ成熟した CD34+/CD38±/CD90± 表現型に従って FACS によって分離および分離され、単一細胞レベルで 14 日間培養されます。
培養で分化した細胞は溶解され、DNA が分離され、変異プロファイルを定義するために PCR または NGS 分析用に保存されます。
これらの細胞のジェノタイピングが確立されると、DNA は破壊され、最初の生物学的サンプルは何も残りません。
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IFN治療0日目から5年間、年3～4回
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ジェノタイピングと組み合わせた単一細胞 RNA シーケンス
時間枠：IFN 治療の 0 日目と他の 2 つの時点 (治療の 3 ～ 24 か月間)
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血液サンプルは、前駆細胞 (CD34+ マーカー) から成熟細胞 (顆粒球) を分離するために処理されます。
前駆細胞を分離し、ロングリード技術 (PromethION) を使用して scRNA-seq を行います。
造血分化と RNA シーケンスの軌跡は、各セルで分析されます
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IFN 治療の 0 日目と他の 2 つの時点 (治療の 3 ～ 24 か月間)
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In vitro での前駆細胞の培養
時間枠：0日から5年間
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血液サンプルは、前駆細胞 (CD34+ マーカー) から成熟細胞 (顆粒球) を分離するために処理されます。
次いで、前駆細胞（ＣＤ３４＋）を、サイトカインを含む無血清培地中、またはＩＦＮ単独または会合した半固形培地中で培養する。
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0日から5年間
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協力者と研究者
捜査官
- 主任研究者：Florence Pasquier, MD,PhD、florence.pasquier@gustaveroussy.fr
出版物と役立つリンク
一般刊行物
- James C, Ugo V, Le Couedic JP, Staerk J, Delhommeau F, Lacout C, Garcon L, Raslova H, Berger R, Bennaceur-Griscelli A, Villeval JL, Constantinescu SN, Casadevall N, Vainchenker W. A unique clonal JAK2 mutation leading to constitutive signalling causes polycythaemia vera. Nature. 2005 Apr 28;434(7037):1144-8. doi: 10.1038/nature03546.
- Klampfl T, Gisslinger H, Harutyunyan AS, Nivarthi H, Rumi E, Milosevic JD, Them NC, Berg T, Gisslinger B, Pietra D, Chen D, Vladimer GI, Bagienski K, Milanesi C, Casetti IC, Sant'Antonio E, Ferretti V, Elena C, Schischlik F, Cleary C, Six M, Schalling M, Schonegger A, Bock C, Malcovati L, Pascutto C, Superti-Furga G, Cazzola M, Kralovics R. Somatic mutations of calreticulin in myeloproliferative neoplasms. N Engl J Med. 2013 Dec 19;369(25):2379-90. doi: 10.1056/NEJMoa1311347. Epub 2013 Dec 10.
- Mascarenhas J, Kosiorek HE, Prchal JT, Rambaldi A, Berenzon D, Yacoub A, Harrison CN, McMullin MF, Vannucchi AM, Ewing J, O'Connell CL, Kiladjian JJ, Mead AJ, Winton EF, Leibowitz DS, De Stefano V, Arcasoy MO, Kessler CM, Catchatourian R, Rondelli D, Silver RT, Bacigalupo A, Nagler A, Kremyanskaya M, Levine MF, Arango Ossa JE, McGovern E, Sandy L, Salama ME, Najfeld V, Tripodi J, Farnoud N, Penson AV, Weinberg RS, Price L, Goldberg JD, Barbui T, Marchioli R, Tognoni G, Rampal RK, Mesa RA, Dueck AC, Hoffman R. A randomized phase 3 trial of interferon-alpha vs hydroxyurea in polycythemia vera and essential thrombocythemia. Blood. 2022 May 12;139(19):2931-2941. doi: 10.1182/blood.2021012743.
- Mosca M, Hermange G, Tisserand A, Noble R, Marzac C, Marty C, Le Sueur C, Campario H, Vertenoeil G, El-Khoury M, Catelain C, Rameau P, Gella C, Lenglet J, Casadevall N, Favier R, Solary E, Cassinat B, Kiladjian JJ, Constantinescu SN, Pasquier F, Hochberg ME, Raslova H, Villeval JL, Girodon F, Vainchenker W, Cournede PH, Plo I. Inferring the dynamics of mutated hematopoietic stem and progenitor cells induced by IFNalpha in myeloproliferative neoplasms. Blood. 2021 Dec 2;138(22):2231-2243. doi: 10.1182/blood.2021010986.
- Dagher T, Maslah N, Edmond V, Cassinat B, Vainchenker W, Giraudier S, Pasquier F, Verger E, Niwa-Kawakita M, Lallemand-Breitenbach V, Plo I, Kiladjian JJ, Villeval JL, de The H. JAK2V617F myeloproliferative neoplasm eradication by a novel interferon/arsenic therapy involves PML. J Exp Med. 2021 Feb 1;218(2):e20201268. doi: 10.1084/jem.20201268.
- Gisslinger H, Klade C, Georgiev P, Krochmalczyk D, Gercheva-Kyuchukova L, Egyed M, Rossiev V, Dulicek P, Illes A, Pylypenko H, Sivcheva L, Mayer J, Yablokova V, Krejcy K, Grohmann-Izay B, Hasselbalch HC, Kralovics R, Kiladjian JJ; PROUD-PV Study Group. Ropeginterferon alfa-2b versus standard therapy for polycythaemia vera (PROUD-PV and CONTINUATION-PV): a randomised, non-inferiority, phase 3 trial and its extension study. Lancet Haematol. 2020 Mar;7(3):e196-e208. doi: 10.1016/S2352-3026(19)30236-4. Epub 2020 Jan 31. Erratum In: Lancet Haematol. 2020 Feb 25;:
- Verger E, Cassinat B, Chauveau A, Dosquet C, Giraudier S, Schlageter MH, Ianotto JC, Yassin MA, Al-Dewik N, Carillo S, Legouffe E, Ugo V, Chomienne C, Kiladjian JJ. Clinical and molecular response to interferon-alpha therapy in essential thrombocythemia patients with CALR mutations. Blood. 2015 Dec 10;126(24):2585-91. doi: 10.1182/blood-2015-07-659060. Epub 2015 Oct 20.
- Knudsen TA, Skov V, Stevenson K, Werner L, Duke W, Laurore C, Gibson CJ, Nag A, Thorner AR, Wollison B, Hansen DL, Ellervik C, El Fassi D, de Stricker K, Ocias LF, Brabrand M, Bjerrum OW, Overgaard UM, Frederiksen M, Kristensen TK, Kruse TA, Thomassen M, Mourits-Andersen T, Severinsen MT, Stentoft J, Starklint J, Neuberg DS, Kjaer L, Larsen TS, Hasselbalch HC, Lindsley RC, Mullally A. Genomic profiling of a randomized trial of interferon-alpha vs hydroxyurea in MPN reveals mutation-specific responses. Blood Adv. 2022 Apr 12;6(7):2107-2119. doi: 10.1182/bloodadvances.2021004856.
研究記録日
主要日程の研究
研究開始 (実際)
一次修了 (予想される)
研究の完了 (予想される)
試験登録日
最初に提出
QC基準を満たした最初の提出物
最初の投稿 (実際)
学習記録の更新
投稿された最後の更新 (実際)
QC基準を満たした最後の更新が送信されました
最終確認日
詳しくは
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