Meccanismo d'azione dell'interferone nel trattamento delle neoplasie mieloproliferative (IFN&SMP)

Le neoplasie mieloproliferative (MPN) negative per BCR-ABL classiche includono: policitemia vera (PV), trombocitemia essenziale (ET) e mielofibrosi primaria (PMF). Sono neoplasie mieloidi risultanti dalla trasformazione di una cellula staminale ematopoietica multipotente (HSC) causata da mutazioni che attivano la via JAK2/STAT. La mutazione più diffusa è JAK2V617F. Mutazioni della calreticulina di tipo 1 e di tipo 2 (CALR) e del recettore della trombopoietina (MPL) sono state osservate anche in ET e PMF. Sono state trovate anche ulteriori mutazioni non-MPN che interessano percorsi diversi, in particolare nella PMF, e sono coinvolte nell'inizio della malattia e/o nei cambiamenti fenotipici e/o nella progressione della malattia e/o nella risposta alla terapia.

C'è un evidente e urgente bisogno di una terapia efficace per MPN. In particolare, la PMF rimane senza trattamento curativo, tranne che il trapianto allogenico di HSC e gli inibitori JAK hanno effetti limitati sull'esito della malattia. Tra i nuovi approcci terapeutici, Peg-IFNα2a (IFN) è il più efficiente e ospita sia alti tassi di risposte ematologiche nei pazienti JAK2V617F e CALRmut MPN sia alcune risposte molecolari principalmente nei pazienti JAK2V617F, inclusa la risposta molecolare profonda (DMR). Tuttavia, diversi studi, incluso il nostro, hanno dimostrato che la risposta molecolare dell'IFN nei pazienti con CALRmut è eterogenea e complessivamente molto inferiore rispetto ai pazienti con JAK2V617F. Inoltre, alcuni pazienti con MPN JAK2V617F non rispondono a IFN e il DMR si osserva solo in circa il 20% dei pazienti con JAK2V617F. Infine, sono necessari trattamenti a lungo termine (2-5 anni) per ottenere un DMR, compromettendone il successo a causa della possibile tossicità a lungo termine.

Le ragioni alla base del fallimento, della resistenza ai farmaci, della risposta molecolare eterogenea nei pazienti CALRmut e dei lunghi ritardi per DMR nei pazienti JAK2V617F rimangono poco chiare, in gran parte perché i meccanismi con cui l'IFNα prende di mira i cloni maligni MPN rimangono sfuggenti.

Non è possibile ottenere un miglioramento significativo dell'efficacia dell'IFN senza la ricerca clinica e di base. Quindi le nostre due linee di ricerca sono a

• Comprendere come l'IFNα si rivolge specificamente alle HSC neoplastiche
• Prevedere e migliorare la risposta del paziente durante la terapia con IFNα

L'obiettivo principale dal punto di vista di base è disegnare l'architettura clonale delle cellule mutate dei pazienti durante il trattamento con IFN per fornire una migliore comprensione del meccanismo d'azione dell'IFN in MPN: ovvero come e a quale livello di differenziazione ematopoietica il L'IFN si rivolge specificamente alle HSC JAK2V617F e se e perché non ha lo stesso effetto sui pazienti CALRm.

Il nostro precedente studio clinico che utilizzava dati sull'architettura clonale combinati con un modello matematico indica che l'esaurimento dell'HSC JAK2V617F mediante differenziazione in progenitori e quindi la perdita dell'auto-rinnovamento può essere il meccanismo critico per l'eradicazione della malattia JAK2V617F da parte dell'IFN. Speriamo di confermare questa ipotesi in un numero maggiore di pazienti e di comprendere le basi degli effetti differenziali delle mutazioni JAK2V617F e CALRm sulle cellule staminali che danno inizio alla malattia.

Gli obiettivi secondari sono:

• Convalidare la resistenza dei pazienti CALRm al trattamento con IFN in un numero maggiore di pazienti. Inoltre, alte dosi di IFN, contrariamente ai pazienti JAK2V617F, sono deleterie per la risposta molecolare per ragioni che restano da capire.
• Indagare il ruolo delle mutazioni associate nelle risposte molecolari indotte da IFN.

È stato dimostrato che i trattamenti con IFN promuovono la comparsa di cloni (JAK2V617F positivi o JAK2V617F negativi) con mutazioni aggiuntive, come Tet2 o DNMT3a, che potrebbero essere responsabili della resistenza al trattamento con IFN . Vorremmo aumentare il numero di pazienti e il loro follow-up per analizzare il ruolo di queste mutazioni nel successo del trattamento. Inoltre, queste mutazioni aggiuntive (nuove o selezionate dal trattamento) potrebbero favorire lo sviluppo di patologie più gravi (MF, MDS, AML) rispetto a PV o TE e sarebbero importanti da monitorare nel follow-up dei pazienti trattati con IFN.

-Esplorare in vitro l'effetto dell'IFN in combinazione con altre molecole sulle cellule primarie dei pazienti. In effetti, il nostro studio di base ha già mostrato il coinvolgimento della PML nel meccanismo d'azione dell'IFN e abbiamo scoperto che l'arsenico potenzia notevolmente l'effetto dell'IFN. Indagheremo a fondo con quali esatti meccanismi.

Tutti i dati saranno raccolti in pazienti prima del trattamento con IFN o durante il trattamento con IFN e i dati saranno raccolti mediante genotipizzazione di singole cellule di colonie e/o mediante sequenziamento di RNA di singola cellula accoppiato alla genotipizzazione di mutazioni e/o saggi in vitro.