Virkningsmekanisme af interferon ved behandling af myeloproliferative neoplasmer (IFN&SMP)

Klassiske BCR-ABL-negative myeloproliferative neoplasmer (MPN) omfatter: Polycytæmi Vera (PV), essentiel trombocytæmi (ET) og primær myelofibrose (PMF). De er myeloide maligniteter som følge af transformationen af ​​en multipotent hæmatopoietisk stamcelle (HSC) forårsaget af mutationer, der aktiverer JAK2/STAT-vejen. Den mest udbredte mutation er JAK2V617F. Type 1 og Type 2 calreticulin (CALR) og trombopoietin receptor (MPL) mutationer observeres også i ET og PMF. Yderligere ikke-MPN-mutationer, der påvirker forskellige veje, findes også, især i PMF, og er involveret i sygdomsinitiering og/eller i fænotypiske ændringer og/eller sygdomsprogression og/eller respons på terapi.

Der er et åbenlyst og presserende behov for en effektiv behandling for MPN. Især PMF forbliver uden helbredende behandling, bortset fra at allogen HSC-transplantation og JAK-hæmmere har begrænset effekt på sygdomsudfaldet. Blandt nye terapeutiske tilgange er Peg-IFNα2a (IFN) den mest effektive, der rummer både høje frekvenser af hæmatologiske responser hos JAK2V617F- og CALRmut MPN-patienter og nogle molekylære responser hovedsageligt hos JAK2V617F-patienter inklusive dyb molekylær respons (DMR). Ikke desto mindre har adskillige undersøgelser, inklusive vores egne, vist, at det molekylære IFN-respons hos CALRmut-patienter er heterogent og generelt meget lavere end hos JAK2V617F-patienter. Desuden reagerer nogle JAK2V617F MPN-patienter ikke på IFN, og DMR observeres kun hos omkring 20 % af JAK2V617F-patienterne. Endelig er der behov for langtidsbehandlinger (2-5 år) for at opnå en DMR, hvilket bringer dens succes i fare på grund af mulig langsigtet toksicitet.

De underliggende årsager til svigt, lægemiddelresistens, heterogent molekylært respons hos CALRmut-patienter og de lange forsinkelser for DMR hos JAK2V617F-patienter forbliver uklare, hovedsagelig fordi mekanismerne, hvorved IFNa målretter MPN-maligne kloner, forbliver uhåndgribelige.

Betydelig forbedring af IFN-effektiviteten kan ikke opnås uden grundlæggende og klinisk forskning. Derfor skal vores to forskningslinjer

• Forstå, hvordan IFNa specifikt retter sig mod neoplastiske HSC'er
• Forudsigelse og forbedring af patientrespons under IFNa-behandling

Hovedformålet fra det grundlæggende synspunkt er at tegne den klonale arkitektur af de muterede celler fra patienter under IFN-behandling for at give en bedre forståelse af virkningsmekanismen for IFN i MPN: nemlig hvordan og på hvilket niveau af hæmatopoietisk differentiering IFN retter sig specifikt mod JAK2V617F HSC'er, og hvis og hvorfor det ikke har samme effekt på CALRm-patienter.

Vores tidligere kliniske undersøgelse ved hjælp af klonale arkitekturdata kombineret med en matematisk model indikerer, at udtømning af JAK2V617F HSC ved differentiering til forfædre og dermed tab af selvfornyelse kan være den kritiske mekanisme for udryddelse af JAK2V617F sygdom ved IFN. Vi håber at bekræfte denne hypotese i et større antal patienter og at forstå grundlaget for de differentielle virkninger af JAK2V617F og CALRm mutationer på sygdomsinitierende stamceller.

De sekundære mål er at:

• Validere CALRm-patienters modstand mod IFN-behandling hos et større antal patienter. Desuden er høje IFN-doser, i modsætning til JAK2V617F-patienter, skadelige for det molekylære respons af årsager, der mangler at blive forstået.
• Undersøg rollen af ​​associerede mutationer i IFN-inducerede molekylære responser.

IFN-behandlinger har vist sig at fremme forekomsten af ​​kloner (JAK2V617F-positive eller JAK2V617F-negative) med yderligere mutationer, såsom Tet2 eller DNMT3a, som kunne være ansvarlige for resistens mod IFN-behandling. Vi vil gerne øge antallet af patienter og deres opfølgning for at analysere disse mutationers rolle i behandlingens succes. Desuden kunne disse yderligere mutationer (nye eller udvalgt af behandlingen) fremme udviklingen af ​​mere alvorlige patologier (MF, MDS, AML) end PV eller TE og ville være vigtige at overvåge ved opfølgningen af ​​IFN-behandlede patienter.

-Udforsk in vitro effekten af ​​IFN i kombination med andre molekyler på primære patienters celler. Faktisk viste vores grundlæggende undersøgelse allerede involveringen af ​​PML i virkningsmekanismen for IFN, og vi fandt ud af, at arsen i høj grad forstærker effekten af ​​IFN. Vi vil dybt undersøge med hvilke nøjagtige mekanismer.

Alle data vil blive indsamlet hos patienter før IFN-behandling eller under IFN-behandling, og data vil blive indsamlet ved enkeltcelle-genotypebestemmelse af kolonier og/eller ved enkeltcelle-RNA-sekventering koblet til genotypebestemmelse af mutationer og/eller in vitro-assays.