Механизм действия интерферона при лечении миелопролиферативных новообразований (IFN&SMP)

Классические BCR-ABL-негативные миелопролиферативные новообразования (MPN) включают: истинную полицитемию (PV), эссенциальную тромбоцитемию (ET) и первичный миелофиброз (PMF). Это миелоидные злокачественные новообразования, возникающие в результате трансформации мультипотентных гемопоэтических стволовых клеток (ГСК), вызванной мутациями, активирующими путь JAK2/STAT. Наиболее распространенной мутацией является JAK2V617F. Мутации кальретикулина 1 и 2 типа (CALR) и рецептора тромбопоэтина (MPL) также наблюдаются при ЭТ и ПМФ. Также обнаружены дополнительные мутации, не относящиеся к MPN, влияющие на различные пути, особенно при PMF, и вовлеченные в инициацию заболевания и/или фенотипические изменения, и/или прогрессирование заболевания, и/или ответ на терапию.

Существует очевидная и острая необходимость в эффективной терапии МПН. В частности, PMF остается без радикального лечения, за исключением аллогенной трансплантации HSC, и ингибиторы JAK имеют ограниченное влияние на исход заболевания. Среди новых терапевтических подходов Peg-IFNα2a (IFN) является наиболее эффективным, обеспечивая как высокую частоту гематологических ответов у пациентов с JAK2V617F и CALRmut MPN, так и некоторые молекулярные ответы, в основном у пациентов с JAK2V617F, включая глубокий молекулярный ответ (DMR). Тем не менее, несколько исследований, в том числе наше собственное, продемонстрировали, что молекулярный ответ IFN у пациентов с CALRmut гетерогенен и в целом намного ниже, чем у пациентов с JAK2V617F. Более того, некоторые пациенты с MPN JAK2V617F не реагируют на IFN, а DMR наблюдается только примерно у 20% пациентов с JAK2V617F. Наконец, для получения DMR необходимо длительное лечение (2-5 лет), что ставит под угрозу его успех из-за возможной долгосрочной токсичности.

Основные причины неудачи, лекарственная устойчивость, гетерогенный молекулярный ответ у пациентов с CALRmut и длительные задержки для DMR у пациентов с JAK2V617F остаются неясными, в основном потому, что механизмы, с помощью которых IFNα воздействует на злокачественные клоны MPN, остаются неясными.

Значительное улучшение эффективности ИФН невозможно без фундаментальных и клинических исследований. Следовательно, наши два направления исследований заключаются в том, чтобы

• Понять, как IFNα специфически воздействует на опухолевые ГСК
• Прогнозирование и улучшение ответа пациента на терапию IFNα

Основная цель с базовой точки зрения — нарисовать клональную архитектуру мутировавших клеток пациентов во время лечения ИФН, чтобы обеспечить лучшее понимание механизма действия ИФН при МПН: а именно, как и на каком уровне гемопоэтической дифференцировки IFN специально нацелен на HSC JAK2V617F, и почему он не оказывает такого же эффекта на пациентов с CALRm.

Наше предыдущее клиническое исследование с использованием данных клональной архитектуры в сочетании с математической моделью указывает на то, что истощение HSC JAK2V617F путем дифференцировки в предшественники и, таким образом, потеря самообновления может быть критическим механизмом для эрадикации болезни JAK2V617F с помощью IFN. Мы надеемся подтвердить эту гипотезу у большего числа пациентов и понять основу дифференциальных эффектов мутаций JAK2V617F и CALRm на стволовые клетки, инициирующие заболевание.

Второстепенные цели заключаются в следующем:

• Проверить резистентность пациентов с CALRm к лечению интерфероном у большего числа пациентов. Более того, высокие дозы IFN, в отличие от пациентов с JAK2V617F, вредны для молекулярного ответа по причинам, которые еще предстоит понять.
• Изучите роль связанных мутаций в IFN-индуцированных молекулярных ответах.

Было показано, что лечение интерфероном способствует появлению клонов (положительных по JAK2V617F или отрицательных по JAK2V617F) с дополнительными мутациями, такими как Tet2 или DNMT3a, которые могут быть ответственны за резистентность к лечению интерфероном. Мы хотели бы увеличить количество пациентов и их последующее наблюдение, чтобы проанализировать роль этих мутаций в успехе лечения. Более того, эти дополнительные мутации (новые или выбранные в результате лечения) могут способствовать развитию более тяжелых патологий (МФ, МДС, ОМЛ), чем ИП или ТЭ, и их важно контролировать при последующем наблюдении за пациентами, получающими ИНФ.

-Исследуйте in vitro влияние IFN в сочетании с другими молекулами на первичные клетки пациентов. Действительно, наше базовое исследование уже показало участие ПМЛ в механизме действия IFN, и мы обнаружили, что мышьяк значительно потенцирует действие IFN. Мы будем глубоко исследовать, с помощью каких именно механизмов.

Все данные будут собираться у пациентов до лечения IFN или во время лечения IFN, и данные будут собираться путем генотипирования отдельных клеток колоний и/или секвенирования РНК отдельных клеток в сочетании с генотипированием мутаций и/или анализами in vitro.