非アルコール性脂肪性肝炎にMERTK欠乏症を伴うC-KIT（+）肝内皮細胞の改善効果

I.バックグラウンドでは、非アルコール性脂肪肝疾患（NAFLD）は、世界的に最も一般的な肝臓障害の1つになりました[1]。 その高い発生率と重症度にもかかわらず、現在、効果的な治療薬は存在しません。 既存の治療法は、基礎となる病因に対処するのではなく、肝保護や酵素の減少などの症候性緩和に焦点を当てています[2]。 したがって、NAFLD関連の非アルコール性脂肪肝炎（NASH）の進行を促進するメカニズムを解明し、肝線維症は、予防的、改善的、または治療戦略を開発するために重要であり、非常に戦略的重要性を保持します。

1. NAFLD病因におけるLSECの役割：

   肝臓の正弦波内皮の主要成分である肝臓副鼻腔内皮細胞（LSEC）は、肝実質と循環の間の物質的な物質交換を調節する物理的障壁を形成します。 高度に特殊な内皮細胞（ECS）および肝臓で最も豊富な非パルミン性細胞（NPC）として、LSECは肝病生理学において極めて重要な役割を果たします[3-4]。 LSEC関数のターゲティングは、NAFLDの進行と合併症を緩和するための有望なアプローチを表しています。

2. NAFLDにおけるLSEC亜集団の不均一なトランスクリプトームの特徴：

   シングルセルRNAシーケンス（SCRNA-seq）により、シングルセルレベルでのゲノム全体の増幅とシーケンスが可能になります。 肝臓では、肝細胞（HCS）とNPCSは、代謝および機能的ゾーン化を支える、顕著なトランスクリプトームの不均一性を示します。 これは、肝臓疾患を理解する際の単一細胞分析の可能性を強調しています[5]。 ただし、NAFLDのLSECに関するSCRNA-seqの研究は未開拓のままです。

3. 仮説：c-kit（+）/gas6（ - ） - lsec亜集団は、pink1マイトファジーのGas6/mertkを介した調節を介してNAFLDを悪化させます：

C-KIT（CD117）でマークされた骨髄由来内皮前駆細胞（EPC）は、病理学的条件下でECSでC-KITを発現する可能性があります[6]。 TAM受容体（Tyro3、Axl、Mertk）のリガンドであるGas6は、細胞の移動、炎症、生存、およびマイトファジーを調節する下流シグナル伝達カスケードを活性化します[7]。 NAFLDでは、GAS6/MERTKは細胞固有の役割を示し[8-10]：肝マクロファージの抗炎症性。肝臓の星状細胞（HSC）における線維性促進;肝細胞（HC）の保護。 ただし、NAFLD中のLSECにおけるGas6/Mertkの役割は不明のままです。 ミトコンドリア機能障害はNAFLD [11]の特徴であり、障害のあるマイトファジー（PINK1欠乏症など）は、肝炎症、脂肪症、および線維症[12]を悪化させます。 新たな証拠は、GAS6/MERTKがミトコンドリア機能を維持するためにマイトファジーを強化することを示唆しています。 たとえば、MERTK - / - マウスは心筋細胞ミトコンドリア機能障害を示し[13]、Gas6はミトファジーを促進します[14]。

HFD/NDマウスからの予備のSCRNA-seqデータは、一意のC-KIT（+）/GAS6（ - ）-LSECサブポピュレーションを特定しました。 これらのLSECは、共培養HCS/HSCのマイトファジー障害を誘発し、ミトコンドリアの老化、酸化ストレス、HSC活性化、HC脂質沈着、および炎症として顕在化しました。 この亜集団がNAFLDの進行をどのように促進するかを調査すると、新規の病態生理学的メカニズムと治療標的が明らかになり、この研究の基礎が形成されます。

ii。 NAFLD患者の肝臓組織におけるC-KITおよびGAS6/MERTKリガンド受容体の発現レベルを解明する研究の目的。

iii。研究手順

（1）包含および除外基準

1. 包含基準：非アルコール性脂肪肝疾患の予防と治療に関するガイドラインごとのNAFLD診断（2018年版）。 18〜65歳。
2. 除外基準：肝硬変（補償または代償性）、肝細胞癌、活性ウイルス性肝炎（HBV、HCV）、原発性胆管炎、原発性硬化性胆管炎、最近の違法薬物使用の歴史、女性のためのアルコール摂取以上のg/日、および≥30g/day for men for men for men、現在の妊娠中の妊娠。

（2）研究デザイン

1. 肝生検と組織の収集：

   6人のNAFLD患者における超音波誘導肝生検。 ナッシュおよび線維症の組織病理学的評価（HE、マッソン染色）（NASおよびScheuerスコアリング）。 臨床データ収集と肝臓組織貯蔵（-80°C）。

2. c-kitとmertkの発現分析：

肝臓組織の免疫蛍光共染色。 3。統計分析：軽度および重度のNAFLD患者のC-KITとMERTKの発現レベルを比較します。

（3）登録とワークフロー

1. ベースラインデータ収集：

   人口統計学的および臨床パラメーター：名前、性別、年齢、民族、生年月日、身長、体重、疾患の発症、連絡先情報。

   drabor臨床検査：CBC、ALT、AST、TBIL、TG、コレステロール、グルコース、総タンパク質、アルブミン。

   症候性評価：血圧、BMI、腹部超音波、フィブロスカン。

2. 生検プロトコル：

   • 登録から1か月以内に超音波誘導経皮肝生検。 extissues標本要件：直径3 mm以上、長さ5〜8 mm。 storage：c -kitおよびmertk遺伝子分析の-80°C。

IV。予想される結果は、NAFLD患者の肝臓組織におけるC-KIT（+）LSECSとGAS6-MERTKシグナル伝達経路との間の規制関係を明確にします。