비 알코올성 관절염에 대한 mertk 결핍이있는 C-KIT (+) 간 내피 세포의 개선 효과

I. 연구 배경 비 알코올성 지방 간 질환 (NAFLD)은 전 세계적으로 가장 널리 퍼진 간 장애 중 하나가되었습니다 [1]. 높은 발병률과 심각성에도 불구하고 현재 효과적인 치료제는 존재하지 않습니다. 기존의 치료법은 근본적인 병인을 다루기보다는 간 보호 및 효소 감소와 같은 증상 완화에 중점을 둡니다 [2]. 따라서, NAFLD 관련 비 알코올성 감염염 (NASH) 및 간 섬유증의 진행을 유발하는 메커니즘을 설명하는 것은 예방, 개선 또는 심지어 치료 전략을 개발하는 데 중요하며, 상당한 전략적 중요성을 유지하는 데 중요합니다.

1. NAFLD 병인에서 LSEC의 역할 :

   간 정현파 내피 세포 (LSECS), 간 정현파 내피의 주요 성분은 간질과 순환 사이의 물리적 장벽 조절 물질 교환을 형성한다. 간에서 고도로 전문화 된 내피 세포 (EC) 및 가장 풍부한 비유 렌치 세포 (NPC)로서 LSEC는 간 병리 생리학에서 중추적 인 역할을한다 [3-4]. LSEC 기능을 표적화하면 NAFLD 진행 및 합병증을 완화하기위한 유망한 접근법을 나타냅니다.

2. NAFLD에서 LSEC 하위 집단의 이종 전 사체 특징 :

   단일 세포 RNA 시퀀싱 (SCRNA-Seq)은 단일 세포 수준에서 게놈 전체 증폭 및 시퀀싱을 가능하게한다. 간에서, 간세포 (HCS) 및 NPC는 현저한 전 사체 이질성을 나타내며, 대사 및 기능성 구역을 뒷받침한다. 이것은 간 질환을 이해하는 데있어서 단일 세포 분석의 잠재력을 강조한다 [5]. 그러나, NAFLD의 LSEC에 대한 SCRNA-Seq 연구는 여전히 탐구되지 않았다.

3. 가설 : c-kit (+)/gas6 (-) -LSEC 소집단은 Pink1 Mitophagy의 Gas6/mertk- 매개 조절을 통해 NAFLD를 악화시킵니다.

C-KIT (CD117)로 표시된 골수 유래 내피 전구체 세포 (EPC)는 병리학 적 조건 하에서 EC에서 C-KIT를 발현 할 수있다 [6]. TAM 수용체 (Tyro3, ​​Axl, Mertk)에 대한 리간드 인 Gas6은 세포 이동, 염증, 생존 및 미토 파지를 조절하는 하류 신호 전달 캐스케이드를 활성화시킨다 [7]. NAFLD에서, GAS6/Mertk는 세포-특이 적 역할 [8-10] : 간 대 식세포에서 항 염증; 간 성상 세포 (HSC)에서의 프로 섬유; 간세포 (HCS)의 보호. 그러나, NAFLD 동안 LSEC에서 GAS6/Mertk의 역할은 알려져 있지 않다. 미토콘드리아 기능 장애는 NAFLD [11]의 특징이며, 손상된 미토 파이 (예 : Pink1 결핍)는 간 염증, 지방증 및 섬유증을 악화시킨다 [12]. 새로운 증거에 따르면 Gas6/Mertk는 미토콘드리아 기능을 보존하기 위해 미토 파지를 향상시킵니다. 예를 들어, mertk-/- 마우스는 심근 세포 미토콘드리아 기능 장애를 나타내고 [13], GAS6은 미토 파지를 촉진한다 [14].

HFD/ND 마우스의 예비 SCRNA-seq 데이터는 고유 한 C-KIT (+)/GAS6 (-) -LSEC 소집단을 확인했습니다. 이들 LSECS는 공동 배양 된 HCS/HSC에서 미토 포지 손상을 유도하여 미토콘드리아 노화, 산화 스트레스, HSC 활성화, HC 지질 침착 및 염증으로 나타납니다. 이 소집단이 NAFLD 진행을 어떻게 유발하는지 조사하면 새로운 병리 생리 학적 메커니즘 및 치료 표적을 공개 하여이 연구의 기초를 형성합니다.

II. NAFLD 환자의 간 조직에서 C-KIT 및 GAS6/MERTK 리간드-수용체 쌍의 발현 수준을 설명하기위한 연구 목표.

III. 학습 절차

(1) 포함 및 제외 기준

1. 포함 기준 : 비 알코올성 지방 간 질환의 예방 및 치료에 대한 지침 당 NAFLD 진단 (2018 년 판). 18-65 세.
2. 배제 기준 : 간경변 (보상 또는 보상), 간세포 암종, 활성 바이러스 간염 (HBV, HCV), 1 차 담도 담낭염, 1 차 경화성 담관염, 최근의 불법 약물 사용 병력, 남성의 알코올 섭취 20 g/일, 남성, 현재 모유, Comorfiding.

(2) 학습 설계

1. 간 생검 및 조직 수집 :

   6 명의 NAFLD 환자에서 초음파 유도 간 생검. 내쉬 및 섬유증에 대한 조직 병리학 적 평가 (He, Masson 염색) (NAS 및 Scheuer 점수). 임상 데이터 수집 및 간 조직 저장 (-80 ° C).

2. C-Kit 및 Mertk의 발현 분석 :

간 조직의 면역 형광 공동 염색. 3. 통계 분석 : 경증 및 중증 NAFLD 환자에서 C-KIT 및 Mertk 발현 수준을 비교합니다.

(3) 등록 및 워크 플로

1. 기준 데이터 수집 :

   geamogrich 및 임상 매개 변수 : 이름, 성별, 연령, 민족, 생년월일, 높이, 체중, 질병 발병, 접촉 정보.

   ② 실험실 테스트 : CBC, ALT, AST, TBIL, TG, 콜레스테롤, 포도당, 총 단백질, 알부민.

   Clinical 평가 : 혈압, BMI, 복부 초음파, 피브로스 칸.

2. 생검 프로토콜 :

   • 등록 후 1 개월 이내에 초음파 유도 경피 간 생검. wtipsue 시편 요구 사항 : 직경 ≥3 mm, 길이 5-8 mm 길이. C -KIT 및 Mertk 유전자 분석의 경우 -80 ° C.

IV. 예상 결과는 NAFLD 환자 간 조직에서 C-KIT (+) LSECS와 GAS6-Mertk 신호 전달 경로 사이의 조절 관계를 명확하게한다.