歯周病における概日時計遺伝子発現 (PERIOCLOCK)
歯周炎は、比較可能なクロノタイププロファイルを持つ個人の歯肉概日時計遺伝子およびタンパク質発現の破壊と関連している
この観察研究は、歯周組織における概日時計関連遺伝子およびタンパク質の発現変化が、歯周炎症と関連しているかどうかを調査することを目的としています。 概日リズムは、免疫応答や炎症を含む多くの生物学的プロセスを調節します。 実験的研究は概日リズムの乱れと歯周疾患との関連を示唆していますが、制御されたクロノタイプ条件下でのヒトデータは限られています。
合計60人の全身的に健康な非喫煙者(年齢22~45歳)で、睡眠パターンが類似している者(中間型クロノタイプ、睡眠時間6~9時間)が含まれました。 参加者は、確立された診断基準に基づき、歯周的に健康、歯肉炎、またはステージIIIグレードB歯周炎に分類されました。 歯肉組織サンプルは、標準化された午前の時間帯(09:00~11:00)に、臨床的に適応のある処置中に採取されました。
概日時計構成要素(CLOCK、BMAL1、PER1-3、CRY1-2、Rev-Erb-β、ROR-α)および炎症性メディエーター(IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB、IFN-γ、RANKL、OPG)の遺伝子発現レベルは、RT-qPCR、ウェスタンブロット、およびELISA技術を用いて分析されました。 分子所見と臨床的歯周パラメータとの関連が評価されました。
本研究は、歯周疾患自体が歯肉組織における局所的な概日調節機構を乱す可能性があるかどうかを明らかにすることを目指しています。
調査の概要
詳細な説明
概日リズムは、CLOCK、BMAL1、PER1-3、CRY1-2、ROR-α、REV-ERB-βなどのコア時計遺伝子を含む転写翻訳フィードバックループによって生成されます。 これらの分子オシレーターは、免疫機能、炎症シグナル伝達、骨代謝を調節します。 実験的証拠は、概日リズムの調節異常が歯周炎と歯槽骨喪失を悪化させる可能性があることを示唆していますが、管理されたクロノタイプ条件下での包括的なヒトデータは依然として限られています。
この単一施設観察症例対照研究には、全身的に健康な非喫煙者60名(男性30名、女性30名、年齢22-45歳)が含まれています。 クロノタイプはミュンヘンクロノタイプ質問票を用いて決定され、概日変動を最小限に抑えるため、中間型クロノタイプかつ自己申告による睡眠時間が6〜9時間の個人のみが対象となりました。
参加者は、2017年世界ワークショップ基準に基づき、歯周的に健康な群、歯肉炎群、ステージIIIグレードB歯周炎群の3群(各群n=20)に分類されました。 包括的な歯周検査には、プラーク指数、歯肉指数、プロービング時の出血、プロービングデプス、臨床的付着喪失の測定が含まれました。 歯肉組織生検は、臨床的に適応のある処置中に実施され、概日タイミングを標準化するため午前9時から11時の間に採取されました。 サンプルは分子分析まで-80℃で保存されました。
歯肉組織から全RNAを抽出し、RT-qPCRを用いて遺伝子発現を定量化しました(β-アクチンで正規化、2^-ΔΔCT法により解析)。 概日時計構成要素のタンパク質発現はウェスタンブロット法で評価し、炎症性サイトカインレベル(IL-1β、IL-6)はELISA法で定量化しました。 相関分析を実施し、概日遺伝子発現、炎症メディエーター、臨床歯周パラメーター間の関連性を評価しました。
主目的は、歯周炎が、類似したクロノタイププロファイルを持つ個人において、歯肉の概日時計遺伝子およびタンパク質発現の障害と関連しているかどうかを明らかにすることです。
研究の種類
入学 (実際)
連絡先と場所
研究場所
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Malatya、トルコ(Türkiye)、44210
- Inonu University Faculty of Dentistry
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参加基準
適格基準
就学可能な年齢
- 大人
- 高齢者
健康ボランティアの受け入れ
サンプリング方法
調査対象母集団
説明
選定基準:
- 18歳以上の成人
- 全身的に健康な個人
- 少なくとも20本の天然歯を有する個人
- 2018年の歯周病分類に従い、歯周的に健康、歯肉炎、またはステージIIIグレードBの歯周炎と分類される個人
- 文面によるインフォームド・コンセントを提供する意思のある個人
除外基準:
- 歯周状態に影響を与える全身性疾患(例:糖尿病、自己免疫疾患、心血管疾患)の存在
- 過去3ヶ月以内の抗生物質または抗炎症薬の使用
- 過去6ヶ月以内の歯周治療
- 現在の喫煙者または過去5年以内に禁煙した個人
- 妊娠中または授乳中
- 免疫または炎症反応に影響を与えることが知られている薬剤の使用
- 創傷治癒に影響を与える可能性のある全身性疾患の既往歴
研究計画
研究はどのように設計されていますか?
デザインの詳細
コホートと介入
グループ/コホート |
介入・治療 |
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歯周組織が健康な
全身的に健康で、臨床的に健康な歯周組織を有し、付着喪失もなく、放射線学的骨吸収も認めない個人。
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臨床的に適応された歯周治療中に近接部位から採取した歯肉組織サンプルの、分子およびタンパク質発現解析のための収集。
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歯肉炎
臨床的付着喪失またはX線写真による骨吸収のない歯肉炎症を呈する全身的に健康な個体。
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臨床的に適応された歯周治療中に近接部位から採取した歯肉組織サンプルの、分子およびタンパク質発現解析のための収集。
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ステージIII グレードB 歯周炎
2018年の歯周病分類に従って、第III段階Bグレードの歯周炎と診断された全身的に健康な個人。
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臨床的に適応された歯周治療中に近接部位から採取した歯肉組織サンプルの、分子およびタンパク質発現解析のための収集。
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この研究は何を測定していますか?
主要な結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
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歯肉組織における概日時計遺伝子の相対的mRNA発現レベル
時間枠:歯肉組織採取時(単一の時点)
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リアルタイム定量ポリメラーゼ連鎖反応(RT-qPCR)を用いて、歯肉組織サンプル中のBMAL1、CLOCK、PER1、PER2、PER3、CRY1、CRY2、REV-ERBβ、およびROR-αのmRNA発現レベルの定量的評価。
発現レベルは、ハウスキーピング遺伝子で正規化した相対的倍数変化として計算され、歯周的に健康な群、歯肉炎群、およびステージIIIグレードB歯周炎群間で比較されます。
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歯肉組織採取時(単一の時点)
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二次結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
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プロ炎症性サイトカイン発現レベル
時間枠:組織採取時
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歯肉組織サンプルにおけるIL-1β、IL-6、TNF-α、およびIFN-γの相対的mRNA発現レベルをRT-qPCRで評価し、研究群間で比較しました。
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組織採取時
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NF-κB発現レベル
時間枠:組織採取時
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分子解析により決定された歯肉組織サンプル中のNF-κBの相対的発現レベルを、研究グループ間で比較した。
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組織採取時
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骨代謝マーカー
時間枠:組織採取時
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歯肉組織サンプルにおけるRANKLおよびOPGの相対的mRNA発現レベルと、研究群間でのRANKL/OPG比の評価。
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組織採取時
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協力者と研究者
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捜査官
- スタディチェア:Cüneyt A Aral, Professor, DDS, PhD、Inonu University
出版物と役立つリンク
一般刊行物
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- Chapple ILC, Mealey BL, Van Dyke TE, Bartold PM, Dommisch H, Eickholz P, Geisinger ML, Genco RJ, Glogauer M, Goldstein M, Griffin TJ, Holmstrup P, Johnson GK, Kapila Y, Lang NP, Meyle J, Murakami S, Plemons J, Romito GA, Shapira L, Tatakis DN, Teughels W, Trombelli L, Walter C, Wimmer G, Xenoudi P, Yoshie H. Periodontal health and gingival diseases and conditions on an intact and a reduced periodontium: Consensus report of workgroup 1 of the 2017 World Workshop on the Classification of Periodontal and Peri-Implant Diseases and Conditions. J Periodontol. 2018 Jun;89 Suppl 1:S74-S84. doi: 10.1002/JPER.17-0719.
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研究記録日
主要日程の研究
研究開始 (実際)
一次修了 (実際)
研究の完了 (実際)
試験登録日
最初に提出
QC基準を満たした最初の提出物
最初の投稿 (実際)
学習記録の更新
投稿された最後の更新 (実際)
QC基準を満たした最後の更新が送信されました
最終確認日
詳しくは
本研究に関する用語
キーワード
その他の研究ID番号
- IUCREC.2024/05.13
- TDH-2024-3463 (その他の助成金/資金番号:Inonu University Scientific Research Projects Coordination Office)
個々の参加者データ (IPD) の計画
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IPD プランの説明
医薬品およびデバイス情報、研究文書
米国FDA規制医薬品の研究
米国FDA規制機器製品の研究
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