Sirkadiaanisen kellogeenin ilmentyminen parodontopatiaan liittyen (PERIOCLOCK)
Ientulehdus liittyy ienympärysajan kellogeeneihin ja proteiinien ilmentymisen häiriöihin henkilöillä, joilla on vertailukelpoiset kronotyyppiprofiilit
Tämä havainnointitutkimus pyrkii selvittämään, liittyykö parodontaalinen tulehdus kellonaikageenien ja -proteiinien ilmentymisen muutoksiin ienkudoksessa. Kellonaikarytmit säätelevät monia biologisia prosesseja, mukaan lukien immuunivasteita ja tulehdusta. Vaikka kokeelliset tutkimukset viittaavatkin yhteyteen kellonaikahäiriön ja parodontopatian välillä, ihmisaineistoa kontrolloiduissa kronotyyppiolosuhteissa on vähän.
Mukaan valittiin yhteensä 60 systemisesti terveitä, tupakoimattomia 22–45-vuotiaita henkilöä, joilla oli vertailukelpoiset unirytmit (keskiverto kronotyyppi ja 6–9 tuntia unta). Osallistujat luokiteltiin parodontaalisesti terveiksi, gingiviitiksi tai vaiheen III, luokan B parodontiitiksi vakiintuneiden diagnostisten kriteerien mukaisesti. Ienkudosnäytteet kerättiin kliinisesti perusteltujen toimenpiteiden yhteydessä standardoidun aamuisin ajanikkunan (09:00–11:00) aikana.
Kellonaikakomponenttien (CLOCK, BMAL1, PER1-3, CRY1-2, Rev-Erb-β, ROR-α) ja tulehdusvälittäjäaineiden (IL-1β, IL-6, TNF-α, NF-κB, IFN-γ, RANKL, OPG) geeniekspressiotasoja analysoitiin RT-qPCR-, Western blot- ja ELISA-tekniikoilla. Molekyylilöydösten ja kliinisten parodontaalisten parametrien välisiä yhteyksiä arvioitiin.
Tutkimus pyrkii selvittämään, häiritseekö parodontopatia itse paikallisia kellonaikasäätelymekanismeja ienkudoksessa.
Tutkimuksen yleiskatsaus
Yksityiskohtainen kuvaus
Kiertorytmit syntyvät transkriptionaalisten-translationaalisten takaisinkytkentäsilmukoiden kautta, jotka sisältävät kellogeenit kuten CLOCK, BMAL1, PER1-3, CRY1-2, ROR-α ja REV-ERB-β. Nämä molekyylioskillaattorit säätelevät immuunifunktiota, tulehduksellista signalointia ja luun aineenvaihduntaa. Kokeelliset todisteet viittaavat siihen, että kiertorytmin häiriö voi pahentaa parodontaalista tulehdusta ja alveoliluun häviötä; kuitenkaan kattavia ihmisaineistoja kontrolloiduissa kronotyyppiolosuhteissa on edelleen vähän.
Tämä yksikeskuksinen, havainnollinen tapaus-kontrollitutkimus sisältää 60 systemisesti terveitä, tupakoimattomia henkilöitä (30 miestä, 30 naista) iältään 22–45 vuotta. Kronotyyppi määritettiin Münchenin kronotyyppikyselyllä, ja vain henkilöt, joilla oli välityyppinen kronotyyppi ja itse raportoitu nukkumisaika 6–9 tunnin välillä, sisällytettiin minimoimaan kiertorytmin vaihtelua.
Osallistujat luokiteltiin kolmeen ryhmään (n=20 per ryhmä): parodontaalisti terveet, gingiviitti ja vaihe III luokka B parodontiitti vuoden 2017 Maailman työpajan kriteerien mukaan. Kattava parodontaalitutkimus sisälsi plakkaindeksin, ientaindeksin, verenvuodon kartoituksessa, kartoitussyvyyden ja kliinisen kiinnityshäviön mittaukset. Ientakudosnäytteet saatiin kliinisesti indikoitujen toimenpiteiden aikana ja kerättiin klo 09:00–11:00 välillä standardoimaan kiertorytmin ajoitusta. Näytteet säilytettiin –80 °C:ssa molekyylianalyysiin asti.
Kokonais-RNA eristettiin ientakkuksista, ja geenien ilmentymistä kvantifioitiin RT-qPCR:llä normalisoimalla β-aktiniin ja analysoimalla 2^–ΔΔCT-menetelmällä. Kiertorytmikellokomponenttien proteiinien ilmentymistä arvioitiin Western blot -menetelmällä, ja tulehdussytokiinien tasoja (IL-1β, IL-6) kvantifioitiin ELISA:lla. Korrelaatioanalyysit suoritettiin arvioimaan yhteyksiä kiertorytmigeenien ilmentymän, tulehdusvälittäjäaineiden ja kliinisten parodontaaliparametrien välillä.
Ensisijainen tavoite on määrittää, liittyykö parodontaalinen tulehdus ientakkuksen kiertorytmikellogeenien ja -proteiinien ilmentymän häiriöön henkilöillä, joilla on vertailukelpoiset kronotyyppiprofiilit.
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Todellinen)
Yhteystiedot ja paikat
Opiskelupaikat
-
-
-
Malatya, Turkki (Türkiye), 44210
- Inonu University Faculty of Dentistry
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
- Aikuinen
- Vanhempi Aikuinen
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Näytteenottomenetelmä
Tutkimusväestö
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
- Aikuiset, jotka ovat 18-vuotiaita tai vanhempia
- Systemisesti terveet yksilöt
- Ainakin 20 luonnollisen hampaiden läsnäolo
- Yksilöt, jotka luokitellaan parodontaalisesti terveiksi, gingiviitiksi tai Stage III Grade B parodontiitiksi vuoden 2018 parodontaalitautiluokituksen mukaan
- Halukkuus antaa kirjallinen tietoon perustuva suostumus
Poisjättämiskriteerit:
- Minkä tahansa systemisen sairauden läsnäolo, joka vaikuttaa parodontaalitilaan (esim. diabetes mellitus, autoimmuunisairaudet, sydän- ja verisuonisairaudet)
- Antibioottien tai tulehduslääkkeiden käyttö edellisen 3 kuukauden aikana
- Parodontaalihoidot viimeisen 6 kuukauden aikana
- Nykyiset tupakoitsijat tai yksilöt, jotka lopettivat tupakoinnin viimeisen 5 vuoden aikana
- Raskaus tai imetys
- Lääkkeiden käyttö, jotka tiedetään vaikuttavan immuuni- tai tulehdusvasteisiin
- Systemisten sairauksien historia, jotka voivat vaikuttaa haavan paranemiseen
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
Kohortit ja interventiot
Ryhmä/Kohortti |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
Parodontaalisesti terve
Systeemisesti terveet henkilöt, joilla on kliinisesti terveet parodontaalikudokset, ei tarttumishäviötä eikä radiologista luuhäviötä.
|
Ihokudosnäytteiden kerääminen interproksimaalisilta alueilta kliinisesti indikoidun parodontaalihoidon yhteydessä molekyyli- ja proteiiniekspressioanalyysiä varten.
|
|
Gingiviitti
Systeemisesti terveet yksilöt, joilla on ientulehdusta ilman kliinistä kiinnitystappiota tai radiologista luutappiota.
|
Ihokudosnäytteiden kerääminen interproksimaalisilta alueilta kliinisesti indikoidun parodontaalihoidon yhteydessä molekyyli- ja proteiiniekspressioanalyysiä varten.
|
|
Vaihe III Luokka B Parodontiitti
Systemisesti terveet henkilöt, joilla on diagnosoitu Stage III Grade B periodontiitti 2018 periodontaalisten sairauksien luokituksen mukaan.
|
Ihokudosnäytteiden kerääminen interproksimaalisilta alueilta kliinisesti indikoidun parodontaalihoidon yhteydessä molekyyli- ja proteiiniekspressioanalyysiä varten.
|
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Kiertokellogeeneihin liittyvien mRNA:n suhteelliset ilmentymistasot ienkudoksessa
Aikaikkuna: Ienikudoksen keräyshetkellä (yksi aikapiste)
|
Kvantitatiivinen arviointi BMAL1-, CLOCK-, PER1-, PER2-, PER3-, CRY1-, CRY2-, REV-ERBβ- ja ROR-α-mRNA-ilmentymistasoista ienkudoksenäytteissä käyttäen reaaliaikaista kvantitatiivista polymeraasiketjureaktiota (RT-qPCR).
Ilmentymistasoja lasketaan suhteellisina muutoksina, jotka normalisoidaan kotitalousgeeneihin, ja niitä verrataan periodontaalisesti terveiden, gingiviitti- ja vaiheen III luokan B periodontiittiryhmien välillä.
|
Ienikudoksen keräyshetkellä (yksi aikapiste)
|
Toissijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Pro-inflammatoristen sytokiinien ilmentymistasot
Aikaikkuna: Kudoksen keräämishetkellä
|
IL-1β, IL-6, TNF-α ja IFN-γ:n suhteelliset mRNA-ilmaantumistasot ienkudoksessa arvioitu RT-qPCR:llä ja verrattu tutkimusryhmien välillä.
|
Kudoksen keräämishetkellä
|
|
NF-κB:n ilmentymistaso
Aikaikkuna: Kudoksen keräyshetkellä
|
NF-κB:n suhteellinen ilmentymistaso ikenäkudoksessa, määritetty molekyylianalyysillä ja verrattu tutkimusryhmien kesken.
|
Kudoksen keräyshetkellä
|
|
Luun aineenvaihdunnan merkkiaineet
Aikaikkuna: Kudoksen keräyshetkellä
|
Relatiiviset RANKL:n ja OPG:n mRNA-ekspressiotasoista ienkudosnäytteissä ja RANKL/OPG-suhteen arviointi tutkimusryhmien kesken.
|
Kudoksen keräyshetkellä
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Sponsori
Tutkijat
- Opintojen puheenjohtaja: Cüneyt A Aral, Professor, DDS, PhD, Inonu University
Julkaisuja ja hyödyllisiä linkkejä
Yleiset julkaisut
- Czeisler CA, Duffy JF, Shanahan TL, Brown EN, Mitchell JF, Rimmer DW, Ronda JM, Silva EJ, Allan JS, Emens JS, Dijk DJ, Kronauer RE. Stability, precision, and near-24-hour period of the human circadian pacemaker. Science. 1999 Jun 25;284(5423):2177-81. doi: 10.1126/science.284.5423.2177.
- Kapila YL. Oral health's inextricable connection to systemic health: Special populations bring to bear multimodal relationships and factors connecting periodontal disease to systemic diseases and conditions. Periodontol 2000. 2021 Oct;87(1):11-16. doi: 10.1111/prd.12398.
- Chapple ILC, Mealey BL, Van Dyke TE, Bartold PM, Dommisch H, Eickholz P, Geisinger ML, Genco RJ, Glogauer M, Goldstein M, Griffin TJ, Holmstrup P, Johnson GK, Kapila Y, Lang NP, Meyle J, Murakami S, Plemons J, Romito GA, Shapira L, Tatakis DN, Teughels W, Trombelli L, Walter C, Wimmer G, Xenoudi P, Yoshie H. Periodontal health and gingival diseases and conditions on an intact and a reduced periodontium: Consensus report of workgroup 1 of the 2017 World Workshop on the Classification of Periodontal and Peri-Implant Diseases and Conditions. J Periodontol. 2018 Jun;89 Suppl 1:S74-S84. doi: 10.1002/JPER.17-0719.
- Dibner C, Schibler U, Albrecht U. The mammalian circadian timing system: organization and coordination of central and peripheral clocks. Annu Rev Physiol. 2010;72:517-49. doi: 10.1146/annurev-physiol-021909-135821.
- Hergenhan S, Holtkamp S, Scheiermann C. Molecular Interactions Between Components of the Circadian Clock and the Immune System. J Mol Biol. 2020 May 29;432(12):3700-3713. doi: 10.1016/j.jmb.2019.12.044. Epub 2020 Jan 10.
- Hastings M, O'Neill JS, Maywood ES. Circadian clocks: regulators of endocrine and metabolic rhythms. J Endocrinol. 2007 Nov;195(2):187-98. doi: 10.1677/JOE-07-0378.
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (Todellinen)
Ensisijainen valmistuminen (Todellinen)
Opintojen valmistuminen (Todellinen)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Todellinen)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Todellinen)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Avainsanat
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
Muut tutkimustunnusnumerot
- IUCREC.2024/05.13
- TDH-2024-3463 (Muu apuraha/rahoitusnumero: Inonu University Scientific Research Projects Coordination Office)
Yksittäisten osallistujien tietojen suunnitelma (IPD)
Aiotko jakaa yksittäisten osallistujien tietoja (IPD)?
IPD-suunnitelman kuvaus
Lääke- ja laitetiedot, tutkimusasiakirjat
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää lääkevalmistetta
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää laitetuotetta
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .