Expressão dos Genes do Relógio Circadiano na Doença Periodontal (PERIOCLOCK)
A Inflamação Periodontal Está Associada à Perturbação da Expressão Gênica e Proteica do Relógio Circadiano Gengival em Indivíduos com Perfis de Cronotipo Comparáveis
Este estudo observacional visa investigar se a inflamação periodontal está associada a alterações na expressão de genes e proteínas relacionados com o relógio circadiano em tecidos gengivais. Os ritmos circadianos regulam muitos processos biológicos, incluindo respostas imunitárias e inflamação. Embora estudos experimentais sugiram uma ligação entre a perturbação circadiana e a doença periodontal, os dados humanos em condições de cronotipo controlado são limitados.
Foram incluídos um total de 60 indivíduos sistemicamente saudáveis, não fumadores, com idades entre 22 e 45 anos e padrões de sono comparáveis (cronotipo intermédio e 6-9 horas de sono). Os participantes foram classificados como periodontalmente saudáveis, com gengivite ou com periodontite de estágio III grau B, de acordo com critérios de diagnóstico estabelecidos. Amostras de tecido gengival foram recolhidas durante procedimentos clinicamente indicados dentro de uma janela de tempo matinal padronizada (09:00-11:00).
Os níveis de expressão genética dos componentes do relógio circadiano (CLOCK, BMAL1, PER1-3, CRY1-2, Rev-Erb-β, ROR-α) e mediadores inflamatórios (IL-1β, IL-6, TNF-α, NF-κB, IFN-γ, RANKL, OPG) foram analisados utilizando técnicas de RT-qPCR, Western blot e ELISA. As associações entre os achados moleculares e os parâmetros clínicos periodontais foram avaliadas.
O estudo procura esclarecer se a doença periodontal em si pode perturbar os mecanismos regulatórios circadianos locais em tecidos gengivais.
Visão geral do estudo
Status
Condições
Intervenção / Tratamento
Descrição detalhada
Os ritmos circadianos são gerados através de ciclos de retroação transcricional-traducional envolvendo genes centrais do relógio, tais como CLOCK, BMAL1, PER1-3, CRY1-2, ROR-α e REV-ERB-β. Estes osciladores moleculares regulam a função imunitária, a sinalização inflamatória e o metabolismo ósseo. Evidência experimental sugere que a desregulação circadiana pode agravar a inflamação periodontal e a perda óssea alveolar; no entanto, dados humanos abrangentes em condições controladas de cronotipo permanecem limitados.
Este estudo de caso-controlo observacional, monocêntrico, inclui 60 indivíduos sistemicamente saudáveis, não fumadores (30 homens, 30 mulheres) com idades entre 22 e 45 anos. O cronotipo foi determinado usando o Questionário de Cronotipo de Munique, e apenas indivíduos com cronotipo intermédio e duração de sono auto-reportada entre 6 e 9 horas foram incluídos para minimizar a variabilidade circadiana.
Os participantes foram classificados em três grupos (n=20 por grupo): periodontalmente saudáveis, gengivite e periodontite estádio III grau B de acordo com os critérios do Workshop Mundial de 2017. O exame periodontal abrangente incluiu índice de placa, índice gengival, sangramento à sondagem, profundidade de sondagem e medições de perda de inserção clínica. Biópsias de tecido gengival foram obtidas durante procedimentos clinicamente indicados e recolhidas entre as 09:00 e as 11:00 para padronizar o timing circadiano. As amostras foram armazenadas a -80°C até à análise molecular.
O ARN total foi extraído dos tecidos gengivais, e a expressão génica foi quantificada usando RT-qPCR com normalização para β-actina e análise através do método 2^-ΔΔCT. A expressão proteica dos componentes do relógio circadiano foi avaliada por Western blot, e os níveis de citocinas inflamatórias (IL-1β, IL-6) foram quantificados por ELISA. Análises de correlação foram realizadas para avaliar associações entre a expressão de genes circadianos, mediadores inflamatórios e parâmetros periodontais clínicos.
O objetivo principal é determinar se a inflamação periodontal está associada à perturbação da expressão de genes e proteínas do relógio circadiano gengival em indivíduos com perfis de cronotipo comparáveis.
Tipo de estudo
Inscrição (Real)
Contactos e Locais
Locais de estudo
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Malatya, Turquia (Türkiye), 44210
- Inonu University Faculty of Dentistry
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Critérios de participação
Critérios de elegibilidade
Idades elegíveis para estudo
- Adulto
- Adulto mais velho
Aceita Voluntários Saudáveis
Método de amostragem
População do estudo
Descrição
Critérios de Inclusão:
- Adultos com 18 anos ou mais
- Indivíduos sistemicamente saudáveis
- Presença de pelo menos 20 dentes naturais
- Indivíduos classificados como periodontalmente saudáveis, com gengivite, ou periodontite Estádio III Grau B de acordo com a classificação de 2018 das doenças periodontais
- Disposição para fornecer consentimento informado por escrito
Critérios de Exclusão:
- Presença de qualquer doença sistémica que afete o estado periodontal (por exemplo, diabetes mellitus, doenças autoimunes, doenças cardiovasculares)
- Uso de antibióticos ou medicamentos anti-inflamatórios nos últimos 3 meses
- Terapia periodontal nos últimos 6 meses
- Fumadores atuais ou indivíduos que deixaram de fumar nos últimos 5 anos
- Gravidez ou lactação
- Uso de medicamentos conhecidos por influenciar respostas imunes ou inflamatórias
- Histórico de condições sistémicas que possam afetar a cicatrização de feridas
Plano de estudo
Como o estudo é projetado?
Detalhes do projeto
Coortes e Intervenções
Grupo / Coorte |
Intervenção / Tratamento |
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Periodonticamente Saudável
Indivíduos sistemicamente saudáveis com tecidos periodontais clinicamente saudáveis, sem perda de inserção e sem perda óssea radiográfica.
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Recolha de amostras de tecido gengival de locais interproximais durante procedimentos periodontais clinicamente indicados para análises de expressão molecular e proteica.
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Gengivite
Indivíduos sistemicamente saudáveis que apresentam inflamação gengival sem perda de inserção clínica ou perda óssea radiográfica.
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Recolha de amostras de tecido gengival de locais interproximais durante procedimentos periodontais clinicamente indicados para análises de expressão molecular e proteica.
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Periodontite de Estágio III Grau B
Indivíduos sistemicamente saudáveis diagnosticados com periodontite de Estágio III Grau B de acordo com a classificação de 2018 das doenças periodontais.
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Recolha de amostras de tecido gengival de locais interproximais durante procedimentos periodontais clinicamente indicados para análises de expressão molecular e proteica.
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O que o estudo está medindo?
Medidas de resultados primários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
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Níveis Relativos de Expressão de mRNA dos Genes do Relógio Circadiano em Tecido Gengival
Prazo: Na altura da recolha de tecido gengival (momento único)
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Avaliação quantitativa dos níveis de expressão de mRNA de BMAL1, CLOCK, PER1, PER2, PER3, CRY1, CRY2, REV-ERBβ e ROR-α em amostras de tecido gengival utilizando a reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real (RT-qPCR).
Os níveis de expressão serão calculados como alterações relativas de expressão normalizadas para genes de referência e comparados entre os grupos de indivíduos periodontalmente saudáveis, com gengivite e com periodontite de Estágio III Grau B.
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Na altura da recolha de tecido gengival (momento único)
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Medidas de resultados secundários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
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Níveis de Expressão de Citocinas Pró-Inflamatórias
Prazo: Na altura da recolha de tecido
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Níveis relativos de expressão de mRNA de IL-1β, IL-6, TNF-α e IFN-γ em amostras de tecido gengival avaliados por RT-qPCR e comparados entre os grupos do estudo.
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Na altura da recolha de tecido
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Nível de Expressão de NF-κB
Prazo: No momento da recolha do tecido
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Nível de expressão relativa de NF-κB em amostras de tecido gengival determinado por análise molecular e comparado entre os grupos de estudo.
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No momento da recolha do tecido
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Marcadores de Metabolismo Ósseo
Prazo: No momento da colheita do tecido
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Níveis relativos de expressão de mRNA de RANKL e OPG em amostras de tecido gengival e avaliação da razão RANKL/OPG entre os grupos do estudo.
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No momento da colheita do tecido
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Colaboradores e Investigadores
Patrocinador
Investigadores
- Cadeira de estudo: Cüneyt A Aral, Professor, DDS, PhD, Inonu University
Publicações e links úteis
Publicações Gerais
- Czeisler CA, Duffy JF, Shanahan TL, Brown EN, Mitchell JF, Rimmer DW, Ronda JM, Silva EJ, Allan JS, Emens JS, Dijk DJ, Kronauer RE. Stability, precision, and near-24-hour period of the human circadian pacemaker. Science. 1999 Jun 25;284(5423):2177-81. doi: 10.1126/science.284.5423.2177.
- Kapila YL. Oral health's inextricable connection to systemic health: Special populations bring to bear multimodal relationships and factors connecting periodontal disease to systemic diseases and conditions. Periodontol 2000. 2021 Oct;87(1):11-16. doi: 10.1111/prd.12398.
- Chapple ILC, Mealey BL, Van Dyke TE, Bartold PM, Dommisch H, Eickholz P, Geisinger ML, Genco RJ, Glogauer M, Goldstein M, Griffin TJ, Holmstrup P, Johnson GK, Kapila Y, Lang NP, Meyle J, Murakami S, Plemons J, Romito GA, Shapira L, Tatakis DN, Teughels W, Trombelli L, Walter C, Wimmer G, Xenoudi P, Yoshie H. Periodontal health and gingival diseases and conditions on an intact and a reduced periodontium: Consensus report of workgroup 1 of the 2017 World Workshop on the Classification of Periodontal and Peri-Implant Diseases and Conditions. J Periodontol. 2018 Jun;89 Suppl 1:S74-S84. doi: 10.1002/JPER.17-0719.
- Dibner C, Schibler U, Albrecht U. The mammalian circadian timing system: organization and coordination of central and peripheral clocks. Annu Rev Physiol. 2010;72:517-49. doi: 10.1146/annurev-physiol-021909-135821.
- Hergenhan S, Holtkamp S, Scheiermann C. Molecular Interactions Between Components of the Circadian Clock and the Immune System. J Mol Biol. 2020 May 29;432(12):3700-3713. doi: 10.1016/j.jmb.2019.12.044. Epub 2020 Jan 10.
- Hastings M, O'Neill JS, Maywood ES. Circadian clocks: regulators of endocrine and metabolic rhythms. J Endocrinol. 2007 Nov;195(2):187-98. doi: 10.1677/JOE-07-0378.
Datas de registro do estudo
Datas Principais do Estudo
Início do estudo (Real)
Conclusão Primária (Real)
Conclusão do estudo (Real)
Datas de inscrição no estudo
Enviado pela primeira vez
Enviado pela primeira vez que atendeu aos critérios de CQ
Primeira postagem (Real)
Atualizações de registro de estudo
Última Atualização Postada (Real)
Última atualização enviada que atendeu aos critérios de controle de qualidade
Última verificação
Mais Informações
Termos relacionados a este estudo
Palavras-chave
Termos MeSH relevantes adicionais
Outros números de identificação do estudo
- IUCREC.2024/05.13
- TDH-2024-3463 (Número de outro subsídio/financiamento: Inonu University Scientific Research Projects Coordination Office)
Plano para dados de participantes individuais (IPD)
Planeja compartilhar dados de participantes individuais (IPD)?
Descrição do plano IPD
Informações sobre medicamentos e dispositivos, documentos de estudo
Estuda um medicamento regulamentado pela FDA dos EUA
Estuda um produto de dispositivo regulamentado pela FDA dos EUA
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