비만 및 제2형 당뇨병 환자에서 혈장 가용성 프로레닌 수용체의 영향

Tulane University, HSC(Christopher G. Ducoin, MD, MPH; Bariatric Surgery Clinic and Surgeon 의장, 및 Shauna Levy, MD, Bariatric Surgeon Specialist). 각 환자에게 사용된 비만 수술 유형이 기록됩니다. 비만 수술 6개월 후 약 50-60%의 BW 손실이 있는 것으로 나타났기 때문에 각각 5mL의 혈액이 들어 있는 두 개의 혈액 샘플 튜브를 얻을 계획입니다. 수술 전 방문 및 비만 수술 후 3회 방문 동안 혈액을 채취합니다: 1주 ± 2-3일, 1개월 ± 2주 및 6개월 ± 1 - 2개월. 혈액 샘플은 혈당, HbA1c, 지질 프로필(LDL, HDL, 트리글리세리드) 및 sPRR의 혈장 측정에 사용됩니다. RAS에 대한 일주기 리듬의 잠재적 영향으로 인해 혈액 샘플 채취 시간이 기록됩니다. ELISA에 의한 혈장 sPRR의 정량화는 Tulane University School of Medicine에 위치한 Dr. Minolfa Prieto의 실험실에서 수행됩니다. 환자의 생물학적 샘플은 샘플을 환자와 연결하는 코드로 식별됩니다. 연구 종료 후 샘플은 비만 및 T2DM 관련 조건 연구에만 독점적으로 사용됩니다. 배경 요인은 다음을 포함합니다: 성별, 나이, 인종, 민족, 건강 보험 상태 및 개인 병력은 다음 조건의 존재를 평가합니다: 진성 당뇨병 또는 고혈압(다음 치료 중 하나 포함: 항고혈압제 -ACEi, AT1R 차단제 , 이뇨제 또는 칼슘 길항제), 경구 피임약 또는 호르몬 대체제 사용, 이전 수술(유형, 날짜), 월경 불규칙을 포함한 마지막 월경 날짜, 울혈성 심부전(CHF), 말초 혈관 질환(PVD), 폐고혈압(PHTN) ), 또는 허혈성 심장 질환, 폐쇄성 수면 무호흡증(OSA), 천식, 심부 정맥 혈전증/폐색전증(DVT/PE), 위식도 역류 질환(GERD), 간 질환, 이상지질혈증, 다낭성 난소 증후군, 우울증, 알코올 사용, 물질 남용 및/또는 담배 사용. 신체 검사에는 다음이 포함됩니다. BW, BMI, 허리 둘레, 키, 진료실 혈압(최소 5분 동안 휴식을 취한 후 환자가 앉은 자세로 외래 진료소에서 측정한 DBP 및 SBP) 및 맥박수 환자의 생체 샘플을 확인합니다. 샘플과 환자를 연결하는 코드로. ELISA 측정을 위한 혈장 샘플은 맹검 방식으로 중복 분석됩니다. ELISA 키트는 상업적으로 이용 가능하며 IBL America, Inc.에서 제조합니다. 이 분석은 PI의 실험실에서 일상적으로 수행되며 적절한 표준(제조업체에서 제공)을 사용하여 검증되었습니다. 분석 시 중복 또는 삼중 샘플을 사용합니다. Buffer as blank와 같은 생물학적 컨트롤이 기술적 컨트롤로 사용됩니다. ELISA 키트는 상용 공급업체에서 구입하기 때문에 공급업체의 인증에는 반응성, 순도, 응용 프로그램에 대한 인증이 포함됩니다. 이러한 방법과 결과는 이전에 보고되었습니다. 다양한 농도의 sPRR에 대한 내부 대조군 표준 곡선이 비교 목적을 위해 각 플레이트 판독값에 포함될 것입니다. 편향을 줄이기 위해 가능한 한 샘플을 무작위로 분석하고 비교 목적으로 농도를 알고 있는 양성 표준 대조군을 포함합니다. 데이터 처리 계획(이상값, 누락 데이터 보고) 및 통계 분석 계획(통계 분석 계획, 끝점[1차 및 2차], 다중 테스트 포함)이 모두 사용됩니다. 우리 연구실은 sPRR ELISA를 인증했으며 다른 사람이 발표한 측정값과 비교했습니다. 의미 있고 실제적인 차이를 감지하기 위해 샘플 수는 각 분석을 수행하기 위한 요구 사항을 기반으로 합니다(검정력 및 샘플 크기 계산). 재현성을 보장하기 위해 모든 실험 조건을 포함한 모든 프로토콜이 자세히 보고됩니다. 연구 종료 후 샘플은 비만 및 DM 관련 연구에만 독점적으로 사용됩니다. 목표 1: 비만 환자의 비만 환자에서 sPRR의 혈장 수치가 감소하는지 여부를 결정합니다. 과학적 전제 및 근거: 비만 쥐에서 PRR과 레닌은 지방 조직에서 2배 증가합니다. 고지 방식에 의해 유도된 T2DM을 가진 마우스의 예비 데이터는 비만, 증가된 SBP, 포도당 불내성, 현저한 인슐린 저항성 및 식이 요법에서 18주까지 혈장 내 sPRR 수준 증가를 특징으로 하는 표현형의 존재를 보여주었습니다. 이 마우스는 또한 내장 지방의 지방 세포에서 PRR 발현이 증가한 것으로 나타났습니다. 우리의 예비 연구는 혈장 sPRR 수준이 마른 여성보다 마른 남성에서 더 높다는 것을 보여주었습니다. 대조적으로, 혈장 sPRR 수치는 남성보다 비만 당뇨병 여성에서 더 높았습니다. 또한, 우리는 T2DM을 가진 비만 환자가 혈장 sPRR과 BMI 사이에 양의 상관관계를 나타내지만 남성에서는 그렇지 않음을 발견했습니다. 이 목표는 지방 조직이 비만 환자에서 혈장 sPRR의 주요 공급자라는 가설을 테스트하고자 합니다.

실험 설계: 비만 수술을 받는 50명의 비만 환자로부터 얻은 혈장 샘플에서 정량화를 수행합니다. ELISA에 의한 혈장 sPRR의 평가를 위해 비만 수술 전(수술 전 방문) 및 2회의 후속 방문(1개월 ± 1-2주 및 6개월 ± 1-2개월) 각각에서 혈장 샘플을 채취할 것입니다. Prieto's Lab, Tulane University)(전력 분석 참조). 이 샘플은 Tulane HSC(협력자)의 Christopher G. Ducoin, MD의 Bariatric and Minimal Invasive Surgery Clinic의 환자에게서 얻을 것입니다. Tulane Obesity-Endocannabinoids 연구(Tina Thethi, M.D, Collaborator)의 일부로 이미 수집되어 이용 가능한 야윈 대조군 환자의 인간 생물학적 비식별 혈장 샘플과 비교가 확립될 것입니다. 환자의 동의 후, 환자는 바이탈 사인, BP(SBP 및 DBP, 혈압계 측정), 허리-엉덩이 비율 및 BMI에 대해 Bariatric and Minimal Invasive Surgery Clinic에서 검사를 받게 됩니다. 혈당, HbA1c, 지질 프로파일(LDL, HDL, 트리글리세리드) 및 sPRR에 대해 공복 혈액 샘플을 정맥 천자에 의해 채취합니다. 배경 요인 및 개인 병력은 연구 설계 섹션에 설명된 대로 취해질 것입니다. 전력 분석 및 통계적 고려 사항: 각 시점의 모든 결과는 평균 및 표준 편차(SD)로 요약됩니다. 시점에 따른 변화를 평가하기 위해 분산의 반복 측정 분석 및 대응 테스트를 수행합니다. 역사적 데이터는 약 10명의 환자가 Tulane University의 외래 환자 비만 클리닉에서 매달 비만 수술을 받는 것을 시사합니다. 이 프로젝트의 첫 6개월 동안 최소 50명의 적격 환자가 모집될 것으로 예상합니다.

목표 2: sPRR의 혈장 수준 변화가 비만 환자의 비만 수술 후 체중 감소 후 T2DM 매개변수의 개선과 상관관계가 있는지 정의합니다. 과학적 전제 및 근거: 비만과 T2DM은 CVD의 주요 위험 요소입니다.

RAS의 활성화는 CV 위험 인자의 병인과 관련이 있습니다. 종종 T2DM은 비만 수술 직후에 개선되고 상당한 BW 손실이 지속되면서 더욱 개선됩니다. 그러나 지방 조직이 비만 환자의 혈장에서 sPRR의 주요 공급자인지 여부와 혈장 sPRR이 이러한 환자의 T2DM 및 CV 합병증에 기여하는지 여부는 아직 알려지지 않았습니다. sPRR 억제제의 사용은 여성의 비만과 CV 합병증을 관리하기 위한 새로운 치료 접근법을 구성할 것입니다. 우리는 bariatric 수술 후 혈장 sPRR 수준의 감소가 비만 환자의 혈당 조절 및 지질 프로파일의 개선과 관련이 있다는 가설을 테스트할 것입니다. 분석 및 통계적 고려 사항: sPRR, 혈당, HbA1c, 지질 프로필(LDL, HDL, 트리글리세리드) 사이의 연관성을 측정하기 위해 다중 선형 회귀 모델을 사용할 것입니다. 비교는 수술 전 및 수술 후 2회 방문 값으로 설정됩니다. 제안된 n=50은 최대 7개의 예측 변수가 있는 모델에 적합하고 sPRR의 총 가변성의 최소 12.25%가 예측 변수에 의해 설명되는 경우 sPRR과 임의의 하나의 예측 변수 사이의 중요한 연관성을 탐지하는 데 80%의 검정력을 갖기에 충분합니다. . 조정되지 않은 상관 관계 및 조정된 상관 관계 및 관련 P 값이 보고됩니다.

예상 결과, 함정 및 대안적 접근 목표 1: 우리가 아는 한, 혈장 sPRR-비만-T2DM 사이의 관계를 정의하거나 혈장 sPRR과 BMI, WHR 또는 HbA1c 사이의 상관 관계를 확립한 이전 연구는 없습니다. 우리는 혈장 sPRR 수준이 마른 대조군 샘플보다 비만에서 더 높을 것으로 예상하고, 대조군과 비교하여 혈장 sPRR 수준이 T2DM 비만 환자에서 더 높을 것으로 예상합니다. 우리는 혈장 sPRR 수치가 배경 요인을 조정한 후 T2DM 비만 여성의 비만과 양의 상관관계가 있지만 남성 대조군에서는 그렇지 않을 것으로 예상하여 여성의 혈장 sPRR 증가가 고안드로겐혈증으로 인한 것일 수 있음을 시사합니다. 목표 2: 혈장 sPRR의 변화가 비만 수술 후 비만 환자의 T2DM 및 지질 프로파일의 개선과 상관관계가 있는지 여부를 정의합니다. 우리의 강력한 예비 데이터를 기반으로 결과가 비만 환자의 sPRR 및 대사 위험 요인의 역할을 더 잘 이해할 수 있을 것으로 기대합니다. 잠재적 함정: 비만 수술을 받는 환자는 일반적으로 여성이기 때문에 남성 모집/등록 결과가 낮으면 여성 대 남성 빈도 데이터 비율이 4:19인 분석을 정당화할 것입니다. 혈장 sPRR 및 인슐린 저항성에 대한 비만 수술의 직접적인 효과 대 장기적 효과(아마도 체중 감소와 관련됨)의 영향. 모집 인원이 예상보다 적을 경우 옥스너클리닉 등 다른 지방 비만 수술 센터에 연락할 예정입니다.