간, 장 및 다장기 이식 수혜자의 약물 내성 병원체에 대한 전향적 연구

행동 양식:

1일차는 환자가 간, 장 또는 다장기 이식 후 이식 중환자실(ICU)에 입원하는 날입니다. 세포탁심 내성 그람 음성 막대에 대한 대변 샘플(직장 주머니 및/또는 설사가 있는 환자의 경우)은 ICU에 입원한 후 24시간 이내에 그리고 그 후 병원에서 퇴원하거나 MDR P. aeruginosa 및 MDR P. aeruginosa 및 ESBL- K. pneumoniae 중 먼저 발생한 것. 환자가 삽관되는 동안 기관내 흡인물도 매주 채취됩니다. MRSA에 대한 비강 면봉 채취는 ICU에 입원한 후 24시간 이내에 그리고 그 이후에는 퇴원 또는 MRSA 격리 중 먼저 도래하는 때까지 매주 채취합니다.

대변을 채취하는 날에 배변이 없으면 직장 면봉을 채취합니다. 또한, 기관내관을 잡아당기면 더 이상 기관내 흡인물을 채취할 수 없습니다. 샘플은 가능한 경우에만 얻을 수 있습니다. 1일째 채취한 면봉이 연구 중인 유기체에 대해 양성이면 더 이상 샘플을 채취하지 않습니다.

이식을 받는 모든 잠재적 환자는 임신하지 않아야 하므로 임신 검사는 실시하지 않습니다. 임산부 또는 현재 유아에게 모유 수유 중인 여성은 이 연구에 참여할 수 없습니다.

약물 내성 유기체(MDR P. aeruginosa, ESBL K. pneumoniae 및/또는 MRSA)가 분리되면 서혜부 및 쇄골하 부위에서 피부 면봉을 한 번 채취합니다. 환자로부터 더 이상 면봉을 채취하지 않지만 환자의 임상 결과에 대한 유기체의 영향을 결정하기 위해 임상적으로 추적될 것입니다.

치료 의사의 재량에 따라 얻은 배양균을 검토하고 P. aeruginosa, ESBL-K. pneumoniae 또는 MRSA가 분리되면 진단 미생물학 실험실에서 수집하여 저항 분자 메커니즘의 추가 분석을 위해 Paterson 박사의 실험실에 보관합니다. 이 샘플은 진단 실험실에서 식별 및 감수성 테스트가 완료되면 폐기되었을 것입니다.

다음 정보도 수집됩니다: 연령, 성별, 키, 체중 및 출생 상태를 포함하는 인구통계학적 데이터(주소, 생년월일 등), 참가자의 상태와 관련된 이전 보고서, 실험실 결과, 현재 약물 사용, 및 기타 이전 의학적 문제/이력, 이전 입원 이력, 이식 이유, 이전 이식 이력, 사용된 면역억제제, 받은 항균제, 수행된 기타 수술, 기계 환기 기간, 투석 요구 사항, 이용 가능한 미생물 연구, 단순화된 급성 생리학적 점수 (SAPS) 입원 시, ICU 체류 기간. 이 정보는 의료 기록 및/또는 피험자로부터 획득되며 연구 기록의 일부가 됩니다.

환자는 University of Pittsburgh Medical Center에서 입원 환자로 보게 되며 각 방문에는 약 30분이 소요됩니다. 환자는 연구팀의 일원이 볼 것입니다.

유기체의 샘플 보관

생물학적 샘플은 이 연구 프로젝트의 수석 연구원의 통제하에 있게 됩니다. 기밀성을 보호하기 위해 모든 개인 식별자(예: 이름, 주민등록번호, 생년월일)를 제거(비식별화)하고 특정 코드 번호로 대체합니다. 이러한 코드 번호를 해당 피험자의 신원과 연결하는 정보는 별도의 안전한 위치에 보관됩니다. 이 연구의 조사관은 샘플을 무기한 보관합니다. 모든 샘플은 익명으로 제공됩니다. 피험자가 철회하고 요청을 서면으로 제공하는 경우 수집되고 아직 처리되지 않은 샘플은 파기됩니다. 모든 샘플은 Scaife Hall, Room 812, 3550 Terrace Street, Pittsburgh, PA에 있는 Dr Paterson의 실험실에 보관됩니다.

환자는 병원에서 퇴원하면 연구를 완료했습니다.

실험실 방법:

P. aeruginosa 및 ESBL-K에 대한 면봉. pneumoniae는 세트리마이드 한천과 세포탁심, 반코마이신 및 암포테리신 B가 보충된 영양 한천에 심을 것입니다. 항균 감수성 테스트는 디스크 확산 테스트와 E-테스트를 ​​사용하여 수행됩니다. ESBL 스크리닝은 cefotaxime-cefotaxime/clavulanic acid 및 ceftazidime-ceftazidime/clavulanic acid를 사용한 이중 디스크 확산 테스트 및 E-테스트를 ​​사용하여 수행됩니다.

MRSA에 대한 면봉은 MRSA에 대해 선택적인 발색 배지에 심을 것입니다.

P. aeruginosa 균주의 항균제 내성 발현에 관여하는 분자기전을 연구하기 위하여 일반적인 유출 펌프를 코딩하는 유전자에 대한 정량적 실시간 PCR, 퀴놀론 내성 결정 영역 gyrA, gyrB 및 parC 유전자의 돌연변이에 대한 PCR 및 베타-락타마제가 수행됩니다.

PFGE(Pulsed-field gel electrophoresis)는 각 단일 환자의 분리주에서 수행되어 분리주가 유전형적으로 유사한지 확인합니다. PFGE는 또한 ICU 내의 단일 또는 다중 클론에 속하는지 확인하기 위해 모든 MDR P. aeruginosa 분리주에서 수행됩니다.