Gyógyszerrezisztens kórokozók prospektív vizsgálata máj-, bél- és multivisceralis transzplantált betegek körében

Mód:

Az 1. nap az, amikor a betegeket a transzplantációs intenzív osztályra (ICU) veszik fel máj-, bél- vagy multizsigeri transzplantációt követően. A cefotaxim-rezisztens Gram-negatív rudak székletmintáját (rektális zacskós és/vagy hasmenéses betegek esetében) az intenzív osztályra való felvételt követő 24 órán belül, majd ezt követően hetente a kórházból való elbocsátásig vagy az MDR P. aeruginosa izolálásáig, ill. ESBL-K. pneumoniae, amelyik előbb bekövetkezik. Amíg a betegeket intubálják, hetente endotracheális aspirátumot is kapnak. Az MRSA kimutatására szolgáló orrmintát az intenzív osztályra való felvételt követő 24 órán belül, majd hetente kell venni a kórházból való elbocsátásig vagy az MRSA elkülönítéséig, attól függően, hogy melyik következik be előbb.

Ha nincs székletürítés azokon a napokon, amikor a székletet le kell venni, akkor végbéltamponot veszünk. Ezen túlmenően, ha az endotracheális csövet meghúzzák, nem történik további endotracheális aspirátum. A mintákat csak akkor kapjuk meg, ha rendelkezésre állnak. Ha az 1. napon vett tampon pozitív a vizsgált organizmusokra, akkor további mintákat nem vesznek.

Terhességi tesztre nem kerül sor, mivel a transzplantáción átesett potenciális betegek nem lehetnek terhesek. Terhes nők vagy nők, akik jelenleg csecsemőt szoptatnak, nem vehetnek részt ebben a vizsgálatban.

Ha egy gyógyszerrezisztens organizmust (MDR P. aeruginosa, ESBL K. pneumoniae és/vagy MRSA) izoláltak, a lágyéki és a kulcscsont alatti területekről egyszer vesznek mintát. A pácienstől nem vesznek további tampont, de klinikailag követik, hogy meghatározzák a szervezetnek a páciens klinikai kimenetelére gyakorolt ​​hatását.

A kezelőorvos döntése alapján kapott tenyészeteket felülvizsgálják, és ha a P. aeruginosa, ESBL-K. pneumoniae-t vagy MRSA-t izolálnak, a diagnosztikai mikrobiológiai laboratóriumból összegyűjtik és Dr. Paterson laboratóriumában tárolják a rezisztencia molekuláris mechanizmusainak további elemzése céljából. Ezeket a mintákat eldobták volna, miután a diagnosztikai laboratórium befejezte az azonosítási és érzékenységi vizsgálatot.

A következő információkat is gyűjtjük: demográfiai adatok (cím, születési dátum stb.), amelyek magukban foglalják az életkort, nemet, magasságot, súlyt és születési állapotot, a résztvevő állapotával kapcsolatos korábbi jelentések, laboratóriumi eredmények, jelenlegi gyógyszerhasználat, és bármely egyéb korábbi egészségügyi probléma/előzmény, előzetes felvételi előzmény, transzplantáció oka, korábbi transzplantáció kórtörténete, alkalmazott immunszuppresszió, kapott antimikrobiális szerek, egyéb műtétek, gépi lélegeztetés időtartama, dialízis szükségessége, elérhető mikrobiológiai vizsgálatok, egyszerűsített akut fiziológiai pontszám (SAPS) felvételkor, intenzív osztályos tartózkodás időtartama. Ezeket az információkat az orvosi feljegyzésekből és/vagy az alanyból szerzik be, és a kutatási rekord részévé válnak.

A pácienst a Pittsburghi Egyetem Orvosi Központjában fekvőbetegként látják el, és minden egyes látogatás körülbelül 30 percet vesz igénybe. A pácienst a kutatócsoport egyik tagja fogja látni.

A szervezet mintatárolása

A biológiai minták a kutatási projekt vezető kutatójának ellenőrzése alatt állnak. A titoktartás érdekében az összes személyes azonosítót (azaz név, társadalombiztosítási szám és születési dátum) eltávolítjuk (az azonosítás megszűntetése), és egy meghatározott kódszámmal helyettesítjük. Azokat az információkat, amelyek ezeket a kódszámokat a megfelelő alanyok személyazonosságához kötik, külön, biztonságos helyen tárolják. A vizsgálatban részt vevő kutatók korlátlan ideig megőrzik a mintákat. Az összes mintát azonosítás nélkül adjuk át. Ha az alany visszalép és írásban benyújtja kérelmét, a begyűjtött és még fel nem dolgozott mintákat megsemmisítjük. Minden mintát Dr. Paterson laboratóriumában tárolnak a Scaife Hallban, a 812-es szobában, 3550 Terrace Street, Pittsburgh, PA.

A beteg a kórházból való elbocsátást követően befejezte a vizsgálatot.

Laboratóriumi módszerek:

P. aeruginosa és ESBL-K tamponok. pneumoniae-t cetrimid agarra és cefotaximmal, vankomicinnel és amfotericin B-vel kiegészített tápagarra ültetik. Az antimikrobiális érzékenységi vizsgálatot korong diffúziós teszttel és E-teszttel végzik. Az ESBL-szűrést kettős korong diffúziós teszttel és E-teszttel végezzük cefotaxim-cefotaxim/klavulánsavval és ceftazidim-ceftazidim/klavulánsavval.

Az MRSA-tamponokat MRSA-ra szelektív kromogén táptalajba ültetik.

A P. aeruginosa izolátumok antimikrobiális rezisztenciájának kialakulásáért felelős molekuláris mechanizmusok tanulmányozása érdekében kvantitatív valós idejű PCR a közös efflux pumpákat kódoló géneken, PCR a kinolon rezisztenciát meghatározó gyrA, gyrB és parC gének mutációira és PCR a béta-laktamázt végeznek.

Minden egyes beteg izolátumán impulzusmezős gélelektroforézist (PFGE) végeznek annak megállapítására, hogy az izolátumok genotípusosan hasonlóak-e. A PFGE-t minden MDR P. aeruginosa izolátumon is elvégezzük annak megállapítására, hogy az intenzív osztályon belül egyetlen vagy több klónhoz tartoznak-e.