난소암 관련 항체에 대한 혈액 검사(CAAb)

일반 정보

항체는 "외래" 항원에 대한 특이적 반응이며 일반적으로 처음 노출된 후 5-7일 이내에 혈청에서 검출할 수 있습니다. 그러나 종양의 경우와 같이 특정 면역 반응이 억제되는 경우가 있습니다. 현재까지 암과 관련된 혈청 항체에 대한 보고는 없습니다. 일부 종양은 수술로 제거하고 연구했을 때 T 림프구의 침윤물과 종양 세포에 결합된 항체를 모두 가지고 있는 것으로 밝혀졌습니다. 이러한 항체(및 기타 특정 면역 반응)는 종양 성장의 후기 단계에서 형성되는 것으로 추정되지만, 이러한 경우에도 혈청 항체는 보고되지 않았습니다(아마도 항체가 대부분 종양 덩어리에 의해 "흡수"되기 때문일 것입니다). .

악성 세포 덩어리로 이어지는 정상 세포의 돌연변이는 세포의 구조와 기능의 변화를 수반하기 때문에 면역 체계가 이러한 변화 중 일부를 반응해야 하는 항원 결정인자로 인식했다고 가정할 수 있습니다. 그렇다면 종양으로 인한 억제보다 항체가 부족한 이유가 될 것입니다.

이 면역 억제를 극복할 수 있다면 시험관 내에서 혈청에서 검출할 수 없는 항체 형성으로 이어질 수 있습니다(이 과정을 Cimmunology라고 합니다). 항체가 결합하는 구조를 식별하고 종양 병리와 항체의 특이성 사이의 상관관계를 찾는 것은 혈액 검사를 통해 종양에 대한 추가 정보를 제공할 수 있습니다.

향후 CAAb 테스트

Cimmunology 기반 테스트는 체외 자극 단계와 항체 검출 단계로 구성됩니다.

분석은 난소암 환자에서 암 관련 항체를 찾는 데 사용될 것입니다.

난소암 관련 항체의 확인은 임상의에게 환자의 상태 또는 의학적 상태에 관한 추가 면역학적 및 항원 정보를 제공할 수 있습니다.

Cimmunology 프로세스는 혈액 수집 및 처리 단계와 습한 37oC 인큐베이터에서 5% CO2로 인큐베이션(CimTube라고 하는 특수 자극 "튜브"에서) 기간으로 구성됩니다.

특정 항체 검출을 위한 테스트는 ELISA 기반이며 잠재적으로 흥미로운 다른 항원을 포함합니다.

환자의 파일에서 수집된 관련 의료 및 병리학적 정보를 통해 테스트 결과를 보다 자세히 분석할 수 있습니다.

연구 목적

기본 목표:

• 암 관련 항체를 찾기 위해

유효성:

• 체외 항체 생산을 유도하는 Cimmunology 과정의 능력, 그러한 항체를 검출하는 ELISA 분석의 능력, ELISA 결과와 환자의 임상/병리학적 상태 사이의 관계를 확립하는 능력을 결정하기 위해. CAAb 테스트 결과의 통계적 유의성이 결정됩니다.

연구 모집단 및 환자 선택

난소암 환자

연구 모집단은 임의의 수술 절차 또는 임의의 다른 항암 치료 전에 난소암에 대해 의심되고 치료될 대상을 포함할 것이다. 임상적 의심에는 다음 중 하나가 포함됩니다. 골반 종괴(골반 검사 또는 기타 영상 기법에 의한) 또는 폐경 후 여성의 높은 CA-125 수치, 복수, 또는 원격 전이의 우연한 발견으로 인해. 최종 분석은 병리학과 관련해서만 수행됩니다.

대조군

대조군에는 이전에 암 병력이 없는 산부인과(또는 다른 적절한 진료실)의 환자가 포함됩니다.

연구 설계

전반적인 설명

현재 연구는 연구 기간 동안 연속적인 모든 난소암 환자와 연령이 일치하는 대조군 대상자를 포함하는 비교 관찰 2군 연구입니다. 이 연구의 목적은 난소암 관련 항체를 검출하는 CAAb 테스트의 효과를 평가하는 것입니다.

대상은 포함 및 제외 기준에 따라 연구에 참여할 가능성이 있는지 선별됩니다. 모집된 환자는 정보에 입각한 동의서에 서명해야 합니다.

환자에 대한 데이터에는 환자의 임상 및 병리학적 상태, CimTube 배양 단계의 결과 및 실험 키트의 매개변수가 포함됩니다. CAAb 테스트의 유효성은 사용된 CAAb 테스트의 통계적 유의성을 평가하여 평가합니다.

이 연구는 O'Brian-Fleming' 경계를 사용하여 2개의 중간 및 1개의 최종 분석과 함께 3단계 그룹 순차 설계를 활용합니다. 한도에 도달하면 데이터 수집이 첫 번째 또는 두 번째 중간 분석 후 중지될 수 있습니다. 이것은 최대 환자 수를 약간만 늘리는 동안 환자 수와 연구 시간을 크게 줄일 수 있습니다. (아래 샘플 크기 고려 사항 참조).

주요 제한 요인인 필요한 암 환자 수를 줄이기 위해 암 환자와 대조군 환자 사이의 1:2 비율을 사용할 것입니다.

후원자는 난소암 사례의 1/3 및 2/3에 따라 중간 분석을 수행하고 샘플 크기는 두 그룹에서 얻은 테스트의 평균 및 분산 추정치에 따라 다시 계산됩니다.

현재까지 수집된 데이터는 상피 세포 암종에 대한 것이므로 본 연구도 상피 세포 암종에 초점을 맞출 것입니다. 따라서 OC 사례의 10% 미만을 차지하는 간질 및 생식 세포 종양은 최종 병리 분석에 따라 제외됩니다. 또한, 난소 암종으로 오인된 비난소 사례는 OC 수술을 받는 여성의 약 10%를 구성합니다. 이들은 또한 최종 병리학에 따라 삭제됩니다.

따라서 통계적으로 예상되는 50개의 난소암 샘플의 필요한 샘플 크기를 얻기 위해 적어도 60명의 환자가 연구에 등록될 것입니다. 대조군은 120명의 환자가 될 것입니다.

연구 절차

병원에서:

첫째, 식별된 연구 환자는 정보에 입각한 동의서에 서명해야 하고 그녀의 적격성 양식을 작성해야 합니다. 둘 다 바코드가 있어야 합니다.

연령, 출신 국가, 병력 및 난소암의 진단적 평가로 이어진 검사 결과(대조군과 관련 없음)를 포함하여 환자의 의료 파일에서 얻은 환자 인구 통계 및 임상 정보는 해당 막대에 기록됩니다. -코딩된 사전 연구 사례 보고서 양식. 보고서는 전자(전용 및 보안 인터넷 사이트) 또는 하드 카피를 통해 작성됩니다. 기록의 인쇄본은 해당 부서에 보관됩니다. 연구는 익명이며 부서는 환자의 이름을 연구자와 연구 후원자에게 공개하지 않고 유지합니다.

연구 후원자는 모니터링을 위해 튜브와 바코드 라벨을 제공할 것입니다. 의사/간호사/정혈 전문의는 3개의 헤파린 진공관(20-24ml)을 수집하고 라벨(바코드)을 지정하고 "샘플 추적 양식"(SFF)의 초기 단계를 채웁니다. 혈액이 담긴 튜브는 이중 밀봉 용기에 포장됩니다(후원자 제공). 부서는 혈액을 채취한 시간으로부터 최대 1시간 동안 혈액을 채취하도록 지정된 배송업체에 알릴 것입니다.

각 OC 샘플에 대해 2개의 연령 일치 컨트롤(+/- 3년)도 모집됩니다.

병원에서 취급 연구실까지 교통편:

혈액은 관련 규정에 따라 실온(18-250C)에서 실험실로 운반됩니다. 운송 시간은 6시간을 넘지 않습니다. SFF에 기록할 시간입니다.

혈액 취급 실험실에서:

혈액 취급 실험실(채취 장소에서 200km 이내에 위치)은 PBMC(말초 혈액 단핵 세포)를 분리하여 샘플링 시간(SFF의 충전 시간)으로부터 20시간 이내에 Cimmunology 배양에 넣습니다.

자세한 프로토콜과 Cimmunology 배지는 Lab Discoveries에서 참여 실험실(해당되는 경우)에 제공합니다. 이스라엘의 모든 병원은 혈액 샘플을 Lab Discoveries의 실험실로 보냅니다. 배양 단계 후, 배양액을 수집하고 적절하게 라벨이 붙은 분취량으로 -80에서 동결합니다. 동결된 샘플은 항체 검사를 위해 진단 실험실로 보내질 것입니다.

진단 실험실에서:

ELISA와 같은 항체 검사는 다른 항원을 사용하여 준비됩니다. 샘플은 과거에 확인된 두 항원에 대한 반응과 추가로 새로운 항원에 대한 반응에 대해 테스트됩니다. 모든 데이터는 전용 컴퓨터에 직접 영구적으로 기록됩니다. 각 샘플에 대해 모든 항체 결과가 코딩된 환자 파일에 저장됩니다. 결과는 암 인구 연구에 대한 전문 지식을 갖춘 통계학자가 분석합니다.

병원에서 수술 후:

수술 2~3주 후 CRO는 환자의 파일에서 병리학 실험실의 결과와 수술 중 제거된 종양의 특성 및 상태에 대한 기타 관련 정보를 수집합니다. 이러한 결과는 전용 보안 인터넷 사이트에 기록되며 인쇄된 바코드 CRF-OC는 부서에 보관됩니다.

통계적 고려 사항

본 연구는 연구 기간 동안 연속적인 모든 난소암 환자와 연령이 일치하는 대조군을 포함하는 비교 관찰 2군 연구입니다. 이 연구의 주요 목적은 CAAb 테스트의 효과를 평가하는 것입니다. 이 유효성은 d = |m1-m2|/2로 정의되는 Fisher' 거리(종종 "효과 크기"라고 함)로 측정됩니다. 여기서 m1은 대조군의 테스트 평균값이고 m2는 난소암 환자, |m1-m2| 차이(m1-m2)의 절대값을 나타내고 s는 한 그룹(대조군 또는 난소암)에서 테스트 분포의 표준 편차의 일반적인 추정치입니다.

통계적 가설

귀무 가설: OC와 CAAb의 존재 또는 부재 사이에는 관계가 없습니다. 즉, d=0

대체 가설: 암 집단에서 CAAb의 기대치는 대조군 집단의 기대치와 다릅니다. 즉, m1은 m2와 같지 않습니다. 차이의 부호가 중요하지 않기 때문에 테스트는 양측이 됩니다.

일반 고려 사항

이전 결과에 따르면 다음과 같이 가정합니다.

1. 각 그룹의 테스트 결과 분포는 정규에 가깝거나 로그 변환을 통해 정규로 변환될 수 있습니다.
2. 두 그룹의 분포 분산은 거의 동일합니다.
3. 이것은 파일럿 연구라는 점을 염두에 두고 양측 p-값이 0.1 이하인 경우 결과가 중요한 것으로 간주합니다. 잠재적으로 유익한 일부 테스트의 무작위 배제 가능성을 줄이기 위해 0.05 대신 0.1 범위를 선택했습니다.

연구의 지속을 결정할 때 다중 비교에 대한 수정은 가정하지 않습니다. 그러나 결과는 Benjamini & Hochberg 접근 방식(Benjamini, Hochberg 1995)의 FDR을 사용하여 수정하지 않은 상태와 수정한 상태로 제시될 것입니다.

신뢰 한계가 적절한 경우 신뢰 수준은 95%입니다.

표본의 크기

샘플 크기는 펩티드 P3 및 P1과 난소암에 대한 이전 연구의 관련 정보를 사용하여 계산되었습니다. 암 관련 항체에 관한 문헌 정보는 없습니다.

샘플 크기는 암의 경우 0.1 및 0.05, 검정력 0.8, D가 0.5인 경우 대조군 비율 1:2인 3단계 순차 그룹 설계에 대해 계산됩니다. 계산은 t-테스트에 의해 두 개의 독립적인 그룹의 평균값을 비교하는 데 필요한 샘플 크기에 대한 표준 공식을 사용했습니다. O'Bien 및 Fleming의 테스트를 사용하여 그룹 순차 절차를 수정하면 유의값 0.05 및 0.1에 대해 숫자가 1.017 및 1.027 증가합니다. (C. Jennison, B.W.Turnbill Group Sequential Methods with Applications to Clinical Trials Chapmann & Hall (2000) Boca Raton FL US pp30 table 2.4 참조).

계산은 NCSS-PASS 소프트웨어를 사용하여 수행되었습니다.

종점 평가

효율성 분석

0.3에서 0.5 사이의 계산된 D는 테스트를 단독으로 사용하기에 비효율적인 것으로 표시합니다. 그러나 다변량 테스트 절차의 일부로 다른 테스트와 함께 사용하는 것이 중요할 수 있습니다. d < 0.3인 테스트는 비효과적인 것으로 간주됩니다. d > 0.5인 테스트 또는 테스트 조합은 CAAb 테스트를 효과적인 것으로 표시합니다.