저항성 전분 인슐린 감수성 시험 (RESIST)

진료소 방문:

참가자는 스크린에서 연구가 완료될 때까지 총 11번 클리닉을 방문하게 됩니다. 여기에는 영양사와의 주간 방문 및 채혈이 필요한 7회 방문이 포함됩니다(각 식이 요법 기간 이후 선별 및 2회). 방문할 때마다 참가자의 체중을 측정하고 허리와 엉덩이 둘레를 측정하며 혈압을 모니터링합니다. 채취한 혈액의 총량은 450ml입니다.

스크리닝 방문(V1: 1시간):

채용 담당자는 처음에 선별 설문지 검토와 전화 또는 개인 인터뷰를 통해 자격을 결정합니다. 잠재적인 과목이 자격이 있고 관심이 있는 경우 학습 요구 사항에 대한 서면 정보가 포함된 오리엔테이션 패키지가 우편으로 발송됩니다. 임상 직원이 최종 적격성을 결정하기 위해 관심있는 피험자는 스크리닝 방문 일정을 잡을 것입니다. 스크리닝 방문(V1)에서 정보에 입각한 동의를 얻고 인체 측정값(신장, 체중, 허리둘레, 혈압) 및 혈액(30ml)을 채취하여 등록을 위한 실험실 기준(총 콜레스테롤, LDL-콜레스테롤)을 평가합니다. , HDL-콜레스테롤, 트리글리세리드, 포도당, HOMA-IR 측정을 위한 인슐린). 중재를 진행할 자격이 없거나 진행할 의사가 없는 개인의 선별 혈액 샘플은 파기됩니다. 우리는 임신 여부를 선별하고 모든 "A" 방문(V2a, v3a, v4a) 후에 임신 검사를 반복합니다. 월경 중인 여성에게는 연구 기간 동안 월경 주기를 기록하는 달력이 제공됩니다. 적격한 개인은 이 화면 방문 후 2주 이내에 연락을 받고 연구에 참여하도록 초대됩니다. 우리는 이 연구에 최대 64명의 참가자를 등록하여 52명의 완료 참가자(20% 탈락)를 목표로 할 준비가 되어 있습니다.

영양사 방문(초기: 1시간, 이후: 15분):

참가자는 매주 영양사 또는 영양사 보조원과 만나 체중 관리 및 다이어트 검토를 포함한 상담을 받습니다. 이 회의에서 참가자들은 일주일 분량의 냉동 식품, 체크리스트가 포함된 표준화된 메뉴, 품목별 장보기 목록을 받게 됩니다. 테스트 전분을 함유한 구운 제품 및 제품도 이때 제공됩니다. 제공되는 형태(냉동 또는 신선)는 제품의 특성과 냉장 보관과 냉동 보관을 견딜 수 있는 용량에 따라 다릅니다. 워시아웃 기간(28-42일) 동안 피험자는 계속해서 알코올을 삼가하지만 7일 동안 일반적인 가정 식단을 섭취한 후 추가 7일 동안 기본 식단을 섭취합니다. 우리는 참가자들에게 씻는 동안 7일 동안 원하는 것을 먹을 수 있는 권한을 부여하면 나머지 식이 프로토콜 동안 순응도가 향상될 것으로 기대합니다.

참가자는 영양사가 Bionutrition Unit에서 제공하지 않는 처방된 식품의 구매를 보장할 수 있도록 지난주 식료품점 영수증을 가져올 것입니다.

채혈이 필요한 식사 후 방문(A 방문: 2.5시간, B 방문: 5시간):

참가자는 혈액 샘플을 제공하기 위해 각 다이어트 완료 후 별도의 이틀에 클리닉을 방문합니다. 중복 샘플링은 생물학적 변동성을 감소시키므로 연구의 힘을 향상시켜 식이로 인한 측정의 중요한 변화를 감지합니다. 각 다이어트의 마지막 두 번째 날(방문 2A, 3A, 4A) 참가자는 공복 상태에서 클리닉을 방문하고 총, LDL- 및 HDL-콜레스테롤, 트리글리세리드, 아포지단백 A1 및 측정을 위한 공복 혈액 샘플(30ml)을 제공합니다. B, 및 이온 이동성에 의한 지단백질 하위분획 분석. 지단백 리파아제 및 간 리파아제 활성도 IV 헤파린(75 단위/kg) 후 15분에 얻은 혈장(20ml)에서 측정됩니다. 각 다이어트의 마지막 날(방문 2B, 3B, 4B)에 참가자는 두 번째 공복 혈액 샘플(위와 같은 지질 및 지단백질용)과 지방 생성 유전자 발현을 측정하기 위한 지방 조직 흡인을 제공합니다. 또한, 3시간 전분 내성 식사는 3B 및 4B 방문에서 공복 상태에서 그리고 전분 식사(총 60ml) 후 30, 60, 120 및 180분에 채취한 포도당 및 인슐린을 측정하기 위한 혈액 샘플과 함께 수행될 것입니다.

임상 절차:

임상 측정: 앉은 자세에서 혈압을 3회 측정하고 마지막 2개 값의 평균을 냅니다. 인체측정학적 측정에는 신장, 체중, 허리 및 엉덩이 둘레, 생체 임피던스별 체지방률(타니타 척도)이 포함됩니다. 허리둘레는 장골능에서 2회 측정하고 엉덩이둘레는 엉덩이의 가장 넓은 지점에서 측정합니다.

표준 혈액 샘플링: 표준 혈액 수집 절차를 사용하여 12-14시간 금식 후 참가자로부터 혈액 샘플을 수집합니다. 혈액은 다음 보존 용액을 포함하는 튜브에 수집됩니다: 3.0gms EDTA(이칼륨), 1.7mg P-Pack, 0.15gms 황산 젠타마이신, 0.15gms 클로람페니콜, 5.96mls 아프로티닌(Sigma A-6279) 및 0.30gms 아지드화나트륨 이중 탈 이온수로 모두 20ml로 희석됩니다. 혈장은 4°C에서 즉시 원심분리하여 분리합니다. 지질 및 지단백질 측정을 수행하고 혈장 분취량을 향후 분석을 위해 동결합니다.

헤파린 후 혈액 샘플링:

혈장 리파제 활성 분석을 위해 헤파린 볼루스(75U/kg, 타당성에 대해서는 위험 섹션 참조)를 정맥 투여한 후 15분 후에 혈액 샘플(20ml)을 채취합니다. 투여 전에 참가자는 응고 장애의 가족력 또는 항응고제 사용, 출혈 또는 타박상 이상 또는 기타 질병, 알레르기 또는 최근 치과 작업을 포함한 개인 금기 사항에 대해 인터뷰합니다. 투여 후 참가자는 관찰하에 2시간 동안 클리닉에 남게 됩니다. 또한 헤파린 및 절차에 관한 정보 시트가 제공됩니다.

지방 조직 생검:

지방 생검은 R.N.에 의해 피하 측면 영역에서 수집됩니다. 표준화된 멸균 절차를 사용합니다. 참가자는 시술 후 2일 이내에 응고를 저해할 수 있는 약물을 복용하지 않도록 지시받습니다. 이 절차는 헤파린 리파아제 분석 후 최소 24시간 후에 수행됩니다. 헤파린의 반감기는 2시간이므로 제거를 보장하기에 충분한 시간입니다. 참가자의 엉덩이 위 부위를 베타딘으로 세척한 후 리도카인 염산염 1%(10mg/ml)를 피하 피부에 주사합니다. 14G 바늘을 사용하여 1~1.5cc의 지방을 흡인합니다. 현장에서 냉찜질을 한 후 상처에 붕대를 감습니다. 참가자는 이틀 동안 하루에 한 번 붕대를 교체하도록 지시받습니다. 그들은 두 개의 붕대, 상처를 깨끗하게 유지하기 위한 지침 및 의료진과 연락할 수 있는 전화번호를 제공받을 것입니다.

전분 식사 시험:

지방 조직 생검 및 공복 채혈 직후 참가자는 15분 안에 섭취할 일일 칼로리의 1/3을 제공하는 전분 식사를 받게 됩니다. 그것은 참가자가 할당된 테스트 식단과 다량 영양소 구성이 유사하고 아밀로오스 또는 아밀로펙틴이 높을 것입니다. IV를 통해 식후 30, 60, 120, 180분에 채혈합니다. 이 시술을 위해 정맥 캐뉼라 또는 바늘을 전주정맥에 삽입합니다. 정상 식염수는 전주위 부위에서 열린 속도로 유지됩니다.