Resistent stivelsesinsulinfølsomhedsforsøg (RESIST)

Klinikbesøg:

Deltagerne vil besøge klinikken i alt 11 gange fra screening til afslutning af undersøgelsen. Dette vil omfatte ugentlige besøg hos en diætist og 7 besøg, der kræver blodudtagning (skærm og to gange efter hver diætperiode). Ved hvert besøg vil deltagerne blive vejet, talje- og hofteomkreds vil blive målt, og blodtrykket vil blive overvåget. Den samlede mængde blod opsamlet er 450 ml.

Screeningsbesøg (V1: 1 time):

Rekrutterere vil i første omgang afgøre berettigelsen gennem gennemgang af et screeningsspørgeskema og et telefon- eller personligt interview. Hvis et potentielt emne er kvalificeret og interesseret, vil der blive sendt en orienteringspakke med skriftlig information om studiekravene. Interesserede forsøgspersoner vil blive planlagt til et screeningsbesøg for at afgøre den endelige berettigelse af det kliniske personale. Ved screeningbesøget (V1) vil der blive indhentet informeret samtykke, opnået antropometriske målinger (højde, vægt, taljeomkreds, blodtryk), og blod (30 ml) vil blive udtaget for at vurdere laboratoriekriterier for tilmelding (total kolesterol, LDL-kolesterol). , HDL-kolesterol, triglycerider, glucose og insulin til bestemmelse af HOMA-IR). Screening af blodprøver fra personer, der enten ikke er kvalificerede eller uvillige til at fortsætte med interventionen, vil blive destrueret. Vi screener for graviditet og gentager graviditetstest efter alle "A"-besøg (V2a, v3a, v4a). Menstruerende kvinder vil få en kalender til at registrere deres menstruationscyklus i hele undersøgelsens varighed. Kvalificerede personer vil blive kontaktet inden for 2 uger efter dette skærmbesøg og inviteret til at deltage i undersøgelsen. Vi er parate til at tilmelde op til 64 deltagere i denne undersøgelse for at opnå et mål på 52 fuldførte deltagere (20 % frafald).

Diætistbesøg (indledende: 1 time, efterfølgende: 15 min):

Deltagerne mødes ugentligt med en diætist eller diætisthjælper for at modtage rådgivning, herunder vægtkontrol og diætgennemgang. På disse møder vil deltagerne modtage en uges frosne hovedretter, standardiserede menuer med tjeklister og specificerede indkøbslister. Bagværk og produkter, der indeholder teststivelsen, vil også blive leveret på dette tidspunkt. Den form, som de vil blive leveret i (frosne eller friske) vil afhænge af produktets art og dets evne til at modstå nedkølet vs. frossen opbevaring. I udvaskningsperioden (dage 28-42) vil forsøgspersonerne fortsætte med at afholde sig fra alkohol, men vil indtage deres sædvanlige hjemmediæt i 7 dage, efterfulgt af basisdiæten i yderligere 7 dage. Vi forventer, at hvis deltagerne får tilladelse til at spise, hvad de har lyst til i 7 dage under udvaskningen, vil det forbedre deres overholdelse i resten af ​​diætprotokollen.

Deltagerne medbringer købmandskvitteringer fra den foregående uge, så diætisterne kan sikre køb af ordinerede fødevarer, som ikke leveres af Bioernæringsenheden.

Besøg efter diæt, der kræver blodprøver (A-besøg: 2,5 timer, B-besøg: 5 timer):

Deltagerne vil besøge klinikken to separate dage efter afslutningen af ​​hver diæt for at give blodprøver. Duplikatprøvetagning reducerer biologisk variabilitet og forbedrer dermed undersøgelsens kraft til at opdage væsentlige diæt-inducerede ændringer i måling. På den næstsidste dag for hver diæt (besøg 2A, 3A, 4A) vil deltagerne besøge klinikken i fastende tilstand og give en fastende blodprøve (30 ml) til måling af total-, LDL- og HDL-kolesterol, triglycerider, apolipoproteiner A1 og B og lipoprotein-subfraktionsanalyse ved ionmobilitet. Lipoproteinlipase- og hepatisk lipaseaktiviteter vil også blive målt i plasma (20 ml) opnået 15 minutter efter IV-heparin (75 enheder/kg). På den sidste dag af hver diæt (besøg 2B, 3B, 4B) vil deltagerne give en anden fastende blodprøve (for lipider og lipoproteiner som ovenfor) og en fedtvævsaspiration for at måle lipogen genekspression. Derudover vil der blive udført et 3 timers stivelsestolerancemåltid ved besøg 3B og 4B, med blodprøver til måling af glukose og insulin udtaget i fastende tilstand og 30, 60, 120 og 180 minutter efter et stivelsesmåltid (60 ml i alt).

Kliniske procedurer:

Kliniske målinger: Blodtrykket måles 3 gange i siddende stilling og gennemsnittet af de sidste 2 værdier. Antropometriske mål inkluderer højde, vægt, talje- og hofteomkreds og % kropsfedt ved bioimpedans (Tanita-skalaen). Taljeomkredsen måles to gange ved hoftekammen, og hofteomkredsen måles på det bredeste sted af hofterne.

Standard blodprøvetagning: Ved hjælp af standard blodprøvetagningsprocedurer vil der blive indsamlet blodprøver fra deltagerne efter en 12-14 timers faste. Blodet vil blive opsamlet i rør indeholdende følgende konserveringsopløsning: 3,0 g EDTA (dikalium), 1,7 mg P-Pack, 0,15 g gentamycinsulfat, 0,15 g chloramphenicol, 5,96 ml aprotinin (Sigma A-6270 g sodium 6279) og som alle fortyndes til 20 ml med dobbelt deioniseret vand. Plasma separeres ved øjeblikkelig centrifugering ved 4°C. Lipid- og lipoproteinmålinger udføres, og alikvoter af plasma fryses til fremtidige analyser.

Post-heparin blodprøvetagning:

En blodprøve (20 ml) vil blive udtaget 15 minutter efter intravenøs administration af en heparinbolus (75 U/kg, se risikoafsnittet for begrundelse) til analyse af plasmalipaseaktivitet. Forud for administration vil deltagerne blive interviewet for familiehistorie med koagulationsforstyrrelser eller personlige kontraindikationer, herunder brug af antikoagulantia, historie med blødninger eller blå mærker eller andre sygdomme, allergier eller nyligt tandarbejde. Efter administration forbliver deltagerne i klinikken i 2 timer under observation. De vil også få et informationsark vedrørende heparin og proceduren.

Fedtvævsbiopsi:

Fedtbiopsier vil blive indsamlet fra den subkutane flankerende region af en R.N. ved hjælp af en standardiseret, steril procedure. Deltagerne vil blive instrueret i ikke at tage medicin inden for 2 dage efter proceduren, som ville forringe koagulationen. Denne procedure vil finde sted mindst 24 timer efter post-heparin lipase analyse. Da halveringstiden for heparin er 2 timer, er dette tilstrækkelig tid til at sikre clearance. Efter rengøring af området over deltagerens balde med betadin, vil Lidocain hydrochloride 1% (10mg/ml) blive injiceret i den subkutane hud. Ved at bruge en nummer 14G nål, vil 1-1,5 c.c.'s fedt blive aspireret. Der vil blive holdt koldt tryk på stedet, og såret vil blive bandageret. Deltagerne vil blive instrueret i at skifte bandagen én gang dagligt i to dage. De får to bandager, instruktioner til at holde såret rent og et telefonnummer, hvor det kliniske personale kan kontaktes.

Test af stivelsesmåltid:

Umiddelbart efter fedtvævsbiopsi og fastende blodprøver vil deltagerne få et stivelsesmåltid, der giver 1/3 af de daglige kalorier, der skal indtages på 15 minutter. Den vil i makronæringsstofsammensætning ligne den testdiæt, som deltageren er tildelt, og vil enten være høj i amylose eller amylopektin. Blod vil blive tappet 30, 60, 120 og 180 minutter efter indtagelse af et måltid gennem en IV. Til denne procedure vil en intravenøs kanyle eller nål blive placeret i den antecubitale vene. En normal saltvandsopløsning vil blive kørt med en holde åben hastighed på det antecubitale sted.