Resistente zetmeel-insulinegevoeligheidsproef (RESIST)

Kliniekbezoeken:

Deelnemers bezoeken de kliniek in totaal 11 keer vanaf het scherm tot de voltooiing van het onderzoek. Dit omvat wekelijkse bezoeken aan een diëtist en 7 bezoeken waarbij bloed moet worden afgenomen (screening en tweemaal na elke dieetperiode). Bij elk bezoek worden de deelnemers gewogen, worden de taille- en heupomtrekken gemeten en wordt de bloeddruk gecontroleerd. De totale hoeveelheid verzameld bloed is 450 ml.

Screeningsbezoek (V1: 1 uur):

Recruiters zullen in eerste instantie bepalen of ze in aanmerking komen door een screeningvragenlijst en een telefonisch of persoonlijk interview te bekijken. Als een potentiële proefpersoon in aanmerking komt en geïnteresseerd is, wordt een oriëntatiepakket gemaild met schriftelijke informatie over de studievereisten. Geïnteresseerde proefpersonen zullen worden ingepland voor een screeningbezoek om te bepalen of ze uiteindelijk in aanmerking komen door de klinische staf. Tijdens het screeningsbezoek (V1) wordt geïnformeerde toestemming verkregen, worden antropometrische metingen verkregen (lengte, gewicht, middelomtrek, bloeddruk) en wordt bloed (30 ml) afgenomen om de laboratoriumcriteria voor inschrijving te beoordelen (totaal cholesterol, LDL-cholesterol , HDL-cholesterol, triglyceriden, glucose en insuline voor de bepaling van HOMA-IR). Screeningsbloedmonsters van personen die niet in aanmerking komen of niet bereid zijn om door te gaan met de ingreep, worden vernietigd. We screenen op zwangerschap en herhalen zwangerschapstesten na alle "A"-bezoeken (V2a, v3a, v4a). Menstruerende vrouwen krijgen een kalender om hun menstruatiecyclus voor de duur van het onderzoek bij te houden. In aanmerking komende personen zullen binnen 2 weken na dit schermbezoek worden gecontacteerd en worden uitgenodigd om deel te nemen aan het onderzoek. We zijn bereid om maximaal 64 deelnemers in te schrijven voor dit onderzoek om een ​​doel van 52 voltooide deelnemers (20% uitval) te behalen.

Diëtistenbezoeken (aanvankelijk: 1 uur, vervolg: 15 min):

Deelnemers zullen wekelijks een diëtist of diëtist-assistent ontmoeten om advies te krijgen, inclusief gewichtsbeheersing en dieetbeoordeling. Tijdens deze bijeenkomsten ontvangen de deelnemers voor een week diepvriesmaaltijden, gestandaardiseerde menu's met checklists en gespecificeerde boodschappenlijstjes. Gebakken goederen en producten die de testzetmelen bevatten, zullen op dit moment ook worden verstrekt. De vorm waarin ze worden geleverd (diepgevroren of vers) hangt af van de aard van het product en het vermogen ervan om gekoelde vs. diepgevroren opslag te weerstaan. Tijdens de wash-outperiode (dag 28-42) blijven proefpersonen afzien van alcohol, maar zullen ze hun gebruikelijke thuisdieet gedurende 7 dagen consumeren, gevolgd door het basisdieet gedurende nog eens 7 dagen. We verwachten dat het geven van toestemming aan de deelnemers om 7 dagen lang te eten wat ze willen tijdens de wash-out, hun naleving gedurende de rest van het dieetprotocol zal verbeteren.

Deelnemers zullen de bonnetjes van de supermarkt van de vorige week meenemen, zodat de diëtisten kunnen zorgen voor de aankoop van voorgeschreven voedingsmiddelen die niet door de Bionutrition Unit worden geleverd.

Bezoeken na het dieet waarbij bloed moet worden afgenomen (A-bezoeken: 2,5 uur, B-bezoeken: 5 uur):

Deelnemers bezoeken de kliniek op twee afzonderlijke dagen na voltooiing van elk dieet om bloedmonsters te geven. Dubbele bemonstering vermindert de biologische variabiliteit en verbetert daarmee de kracht van de studie om significante door voeding veroorzaakte veranderingen in de meting te detecteren. Op de voorlaatste dag van elk dieet (Bezoeken 2A, 3A, 4A) bezoeken deelnemers de kliniek in nuchtere toestand en geven ze een nuchter bloedmonster (30 ml) voor meting van totaal, LDL- en HDL-cholesterol, triglyceriden, apolipoproteïnen A1 en B, en analyse van subfractie van lipoproteïnen door ionenmobiliteit. Lipoproteïnelipase- en hepatische lipase-activiteiten zullen ook worden gemeten in plasma (20 ml), verkregen 15 minuten na intraveneuze heparine (75 eenheden/kg). Op de laatste dag van elk dieet (Bezoeken 2B, 3B, 4B) zullen de deelnemers een tweede nuchter bloedmonster geven (voor lipiden en lipoproteïnen zoals hierboven) en een vetweefselaspiratie om de lipogene genexpressie te meten. Daarnaast zal er een zetmeeltolerantiemaaltijd van 3 uur worden uitgevoerd bij bezoeken 3B en 4B, waarbij bloedmonsters voor het meten van glucose en insuline worden afgenomen in nuchtere toestand en 30, 60, 120 en 180 minuten na een zetmeelmaaltijd (60 ml totaal).

Klinische Procedures:

Klinische metingen: De bloeddruk wordt 3 keer in zittende houding gemeten en de laatste 2 waarden worden gemiddeld. Antropometrische metingen omvatten lengte, gewicht, taille- en heupomtrek en % lichaamsvet door bio-impedantie (Tanita-schaal). De tailleomtrek wordt tweemaal gemeten op de bekkenkam en de heupomtrek wordt gemeten op het breedste punt van de heupen.

Standaard bloedafname: Met behulp van standaard bloedafnameprocedures worden bloedmonsters verzameld van deelnemers na 12-14 uur vasten. Het bloed wordt verzameld in buizen die de volgende conserveringsoplossing bevatten: 3,0 g EDTA (dikalium), 1,7 mg P-Pack, 0,15 g gentamycinesulfaat, 0,15 g chlooramfenicol, 5,96 ml aprotinine (Sigma A-6279) en 0,30 g natriumazide die allemaal worden verdund tot 20 ml met dubbel gedeïoniseerd water. Plasma wordt gescheiden door onmiddellijk centrifugeren bij 4°C. Lipiden- en lipoproteïnemetingen worden uitgevoerd en aliquots plasma worden ingevroren voor toekomstige analyses.

Post-heparine bloedafname:

15 minuten na intraveneuze toediening van een heparinebolus (75 E/kg, zie risicorubriek voor verantwoording) wordt een bloedmonster (20 ml) afgenomen voor de analyse van plasmalipase-activiteit. Voorafgaand aan toediening zullen deelnemers worden geïnterviewd voor familiegeschiedenis van stollingsstoornissen of persoonlijke contra-indicaties, waaronder het gebruik van anticoagulantia, voorgeschiedenis van bloedingen of blauwe plekken, afwijkingen of andere ziekten, allergieën of recent tandheelkundig werk. Na toediening blijven de deelnemers 2 uur ter observatie in de kliniek. Ook krijgen ze een informatieblad over heparine en de procedure.

Vetweefselbiopsie:

Vetbiopten zullen worden verzameld uit het subcutane flankerende gebied door een R.N. volgens een gestandaardiseerde, steriele procedure. Deelnemers zullen worden geïnstrueerd om binnen 2 dagen na de procedure geen medicijnen te gebruiken die de stolling zouden kunnen schaden. Deze procedure vindt ten minste 24 uur na post-heparinelipase-analyse plaats. Omdat de halfwaardetijd van heparine 2 uur is, is dit voldoende tijd om de klaring te verzekeren. Na het reinigen van het gebied boven de bil van de deelnemer met betadine wordt lidocaïne hydrochloride 1% (10 mg/ml) in de onderhuid geïnjecteerd. Met behulp van een naald nummer 14G wordt 1-1,5 cc vet opgezogen. Er wordt ter plekke koude druk uitgeoefend en daarna wordt de wond verbonden. Deelnemers krijgen de instructie om het verband één keer per dag gedurende twee dagen te vervangen. Ze krijgen twee verbandmiddelen, instructies om de wond schoon te houden en een telefoonnummer waarop het klinisch personeel bereikbaar is.

Zetmeel Maaltijd Test:

Onmiddellijk na de biopsie van het vetweefsel en de nuchtere bloedafname krijgen de deelnemers een zetmeelmaaltijd die zorgt voor 1/3 van de dagelijkse calorieën die in 15 minuten moeten worden geconsumeerd. Het zal wat de samenstelling van macronutriënten betreft vergelijkbaar zijn met het testdieet waaraan de deelnemer is toegewezen en zal ofwel veel amylose of amylopectine bevatten. Bloed wordt 30, 60, 120 en 180 minuten na maaltijdconsumptie via een infuus afgenomen. Voor deze procedure wordt een intraveneuze canule of naald in de antecubitale ader geplaatst. Een normale zoutoplossing zal worden uitgevoerd met een openhoudsnelheid op de antecubitale plaats.