Studie zur Empfindlichkeit gegenüber resistentem Stärkeinsulin (RESIST)

Klinikbesuche:

Die Teilnehmer besuchen die Klinik vom Screening bis zum Abschluss der Studie insgesamt 11 Mal. Dazu gehören wöchentliche Besuche bei einem Ernährungsberater und 7 Besuche, bei denen Blutabnahmen erforderlich sind (Untersuchung und zweimal nach jeder Diätperiode). Bei jedem Besuch werden die Teilnehmer gewogen, der Taillen- und Hüftumfang gemessen und der Blutdruck überwacht. Die Gesamtmenge des entnommenen Blutes beträgt 450 ml.

Screening-Besuch (V1: 1 Stunde):

Die Personalvermittler ermitteln die Eignung zunächst anhand eines Screening-Fragebogens und eines Telefon- oder persönlichen Interviews. Wenn ein potenzielles Fach geeignet und interessiert ist, wird ein Orientierungspaket per Post verschickt, das schriftliche Informationen zu den Studienanforderungen enthält. Interessierte Probanden werden für einen Screening-Besuch eingeplant, um die endgültige Eignung durch das klinische Personal festzustellen. Beim Screening-Besuch (V1) wird eine Einverständniserklärung eingeholt, anthropometrische Messungen (Größe, Gewicht, Taillenumfang, Blutdruck) durchgeführt und Blut (30 ml) entnommen, um die Laborkriterien für die Aufnahme (Gesamtcholesterin, LDL-Cholesterin) zu bewerten , HDL-Cholesterin, Triglyceride, Glucose und Insulin zur Bestimmung von HOMA-IR). Screening-Blutproben von Personen, die entweder nicht für den Eingriff geeignet oder nicht bereit sind, werden vernichtet. Wir werden ein Schwangerschaftsscreening durchführen und nach allen „A“-Besuchen (V2a, v3a, v4a) Schwangerschaftstests wiederholen. Menstruierende Frauen erhalten einen Kalender, in dem sie ihren Menstruationszyklus für die Dauer der Studie aufzeichnen können. Berechtigte Personen werden innerhalb von 2 Wochen nach diesem Screening-Besuch kontaktiert und zur Teilnahme an der Studie eingeladen. Wir sind bereit, bis zu 64 Teilnehmer in diese Studie aufzunehmen, um ein Ziel von 52 abgeschlossenen Teilnehmern (20 % Abbrecher) zu erreichen.

Besuche beim Ernährungsberater (Anfang: 1 Stunde, anschließend: 15 Minuten):

Die Teilnehmer treffen sich wöchentlich mit einem Ernährungsberater oder Ernährungsberater, um Beratung einschließlich Gewichtsmanagement und Ernährungsüberprüfung zu erhalten. Bei diesen Treffen erhalten die Teilnehmer eine Woche lang gefrorene Hauptgerichte, standardisierte Menüs mit Checklisten und detaillierte Einkaufslisten. Zu diesem Zeitpunkt werden auch Backwaren und Produkte mit den Teststärken bereitgestellt. Die Form, in der sie bereitgestellt werden (gefroren oder frisch), hängt von der Art des Produkts und seiner Fähigkeit ab, einer gekühlten oder gefrorenen Lagerung standzuhalten. Während der Auswaschphase (Tage 28–42) verzichten die Probanden weiterhin auf Alkohol, nehmen aber 7 Tage lang ihre übliche Hausdiät zu sich, gefolgt von der Basisdiät für weitere 7 Tage. Wir gehen davon aus, dass die Erlaubnis der Teilnehmer, sieben Tage lang während des Auswaschens zu essen, was sie wollen, ihre Compliance während des restlichen Diätprotokolls verbessern wird.

Die Teilnehmer bringen Lebensmittelbelege der Vorwoche mit, damit die Ernährungsberater den Kauf verschriebener Lebensmittel sicherstellen können, die nicht von der Bionutrition Unit bereitgestellt werden.

Besuche nach der Diät, bei denen Blutabnahmen erforderlich sind (A-Besuche: 2,5 Stunden, B-Besuche: 5 Stunden):

Die Teilnehmer werden die Klinik an zwei verschiedenen Tagen nach Abschluss jeder Diät besuchen, um Blutproben abzugeben. Doppelte Probenahmen verringern die biologische Variabilität und verbessern somit die Aussagekraft der Studie zur Erkennung signifikanter ernährungsbedingter Messänderungen. Am vorletzten Tag jeder Diät (Besuche 2A, 3A, 4A) besuchen die Teilnehmer die Klinik im nüchternen Zustand und geben eine Nüchternblutprobe (30 ml) zur Messung von Gesamt-, LDL- und HDL-Cholesterin, Triglyceriden, Apolipoproteinen A1 und ab B und Lipoprotein-Subfraktionsanalyse anhand der Ionenmobilität. Die Lipoproteinlipase- und Leberlipaseaktivitäten werden auch in Plasma (20 ml) gemessen, das 15 Minuten nach intravenöser Heparingabe (75 Einheiten/kg) gewonnen wird. Am letzten Tag jeder Diät (Besuche 2B, 3B, 4B) geben die Teilnehmer eine zweite Nüchternblutprobe (für Lipide und Lipoproteine ​​wie oben) und eine Fettgewebeaspiration ab, um die lipogene Genexpression zu messen. Darüber hinaus wird bei den Besuchen 3B und 4B eine dreistündige Stärketoleranzmahlzeit durchgeführt, wobei Blutproben zur Messung von Glukose und Insulin im nüchternen Zustand und 30, 60, 120 und 180 Minuten nach einer Stärkemahlzeit (insgesamt 60 ml) entnommen werden.

Klinische Verfahren:

Klinische Messungen: Der Blutdruck wird dreimal im Sitzen gemessen und die letzten beiden Werte gemittelt. Anthropometrische Messungen umfassen Größe, Gewicht, Taillen- und Hüftumfang sowie den prozentualen Körperfettanteil anhand der Bioimpedanz (Tanita-Skala). Der Taillenumfang wird zweimal am Beckenkamm und der Hüftumfang an der breitesten Stelle der Hüfte gemessen.

Standard-Blutentnahme: Unter Verwendung von Standard-Blutentnahmeverfahren werden den Teilnehmern nach einem 12-14-stündigen Fasten Blutproben entnommen. Das Blut wird in Röhrchen gesammelt, die die folgende Konservierungslösung enthalten: 3,0 g EDTA (Dikalium), 1,7 mg P-Pack, 0,15 g Gentamycinsulfat, 0,15 g Chloramphenicol, 5,96 ml Aprotinin (Sigma A-6279) und 0,30 g Natriumazid Alle werden mit doppelt entionisiertem Wasser auf 20 ml verdünnt. Das Plasma wird durch sofortige Zentrifugation bei 4 °C abgetrennt. Es werden Lipid- und Lipoproteinmessungen durchgeführt und Plasmaaliquots für zukünftige Analysen eingefroren.

Blutentnahme nach Heparin:

Eine Blutprobe (20 ml) wird 15 Minuten nach der intravenösen Verabreichung eines Heparinbolus (75 U/kg, Begründung siehe Abschnitt „Risiko“) zur Analyse der Plasmalipaseaktivität entnommen. Vor der Verabreichung werden die Teilnehmer hinsichtlich der familiären Vorgeschichte von Gerinnungsstörungen oder persönlichen Kontraindikationen befragt, einschließlich der Verwendung von Antikoagulanzien, der Vorgeschichte von Blutungen oder Blutergüssen, Anomalien oder anderen Krankheiten, Allergien oder kürzlich durchgeführten zahnärztlichen Eingriffen. Nach der Verabreichung bleiben die Teilnehmer 2 Stunden lang unter Beobachtung in der Klinik. Sie erhalten außerdem ein Informationsblatt zu Heparin und dem Verfahren.

Fettgewebebiopsie:

Fettbiopsien werden von einem R.N. aus der subkutanen flankierenden Region entnommen. unter Verwendung eines standardisierten, sterilen Verfahrens. Die Teilnehmer werden angewiesen, innerhalb von 2 Tagen nach dem Eingriff keine Medikamente einzunehmen, die die Blutgerinnung beeinträchtigen würden. Dieses Verfahren wird mindestens 24 Stunden nach der Post-Heparin-Lipase-Analyse durchgeführt. Da die Halbwertszeit von Heparin 2 Stunden beträgt, reicht diese Zeit aus, um die Clearance sicherzustellen. Nach der Reinigung des Bereichs über dem Gesäß des Teilnehmers mit Betadin wird Lidocainhydrochlorid 1 % (10 mg/ml) in die subkutane Haut injiziert. Mit einer Nadel Nr. 14G werden 1–1,5 cm³ Fett abgesaugt. An der Stelle wird ein kalter Druck ausgeübt und anschließend die Wunde verbunden. Die Teilnehmer werden angewiesen, den Verband zwei Tage lang einmal täglich zu wechseln. Sie erhalten zwei Verbände, Anweisungen zur Wundreinigung und eine Telefonnummer, unter der das Klinikpersonal erreichbar ist.

Stärkemehltest:

Unmittelbar nach der Biopsie des Fettgewebes und der Nüchternblutentnahme erhalten die Teilnehmer eine Stärkemahlzeit, die 1/3 der täglichen Kalorien liefert und in 15 Minuten aufgenommen werden muss. Die Zusammensetzung der Makronährstoffe ähnelt der Testdiät, der der Teilnehmer zugewiesen wird, und enthält entweder viel Amylose oder Amylopektin. Die Blutentnahme erfolgt 30, 60, 120 und 180 Minuten nach dem Verzehr der Mahlzeit über eine Infusion. Bei diesem Verfahren wird eine intravenöse Kanüle oder Nadel in die Vena antecubitalis eingeführt. An der Ekubitalstelle wird eine normale Kochsalzlösung mit einer offenen Rate laufen gelassen.