Resistant Starch Insuliinin herkkyyskoe (RESIST)

Klinikkakäynnit:

Osallistujat vierailevat klinikalla yhteensä 11 kertaa näytöstä tutkimuksen loppuun asti. Tämä sisältää viikoittaiset käynnit ravitsemusterapeutin luona ja 7 käyntiä, jotka edellyttävät verenottoa (näyttö ja kahdesti jokaisen ruokavaliojakson jälkeen). Jokaisella käynnillä osallistujat punnitaan, vyötärön ja lantion ympärysmitat mitataan ja verenpainetta seurataan. Kerätyn veren kokonaismäärä on 450 ml.

Seulontakäynti (V1: 1 tunti):

Rekrytoijat määrittävät kelpoisuuden aluksi seulontakyselyn ja puhelin- tai henkilökohtaisen haastattelun avulla. Mikäli potentiaalinen aine on kelvollinen ja kiinnostunut, lähetetään postitse perehdytyspaketti, joka sisältää kirjalliset tiedot opintovaatimuksista. Kiinnostuneet kohteet ajoitetaan seulontakäynnille kliinisen henkilökunnan lopullisen kelpoisuuden määrittämiseksi. Seulontakäynnillä (V1) hankitaan tietoinen suostumus, otetaan antropometriset mittaukset (pituus, paino, vyötärön ympärysmitta, verenpaine) ja verta (30 ml) laboratoriokriteerien (kokonaiskolesteroli, LDL-kolesteroli) arvioimiseksi. , HDL-kolesteroli, triglyseridit, glukoosi ja insuliini HOMA-IR:n määrittämiseen). Seulontaverinäytteet henkilöiltä, ​​jotka eivät ole kelvollisia tai eivät halua jatkaa interventiota, tuhotaan. Seulomme raskauden ja toistamme raskaustestit kaikkien A-käyntien jälkeen (V2a, v3a, v4a). Kuukautiset naiset saavat kalenterin kuukautiskierron kirjaamiseen tutkimuksen ajaksi. Tukikelpoisiin henkilöihin otetaan yhteyttä kahden viikon kuluessa tästä näyttökäynnistä ja heidät kutsutaan osallistumaan tutkimukseen. Olemme valmiita ottamaan mukaan tähän tutkimukseen jopa 64 osallistujaa, jotta saavutetaan tavoitteeksi 52 osallistujaa (20 % keskeyttäneistä).

Ravitsemusterapeutin käynnit (alku: 1 h, seuraavat: 15 min):

Osallistujat tapaavat viikoittain ravitsemusterapeutin tai ravitsemusterapeutin avustajan kanssa saadakseen neuvoja, mukaan lukien painonhallinta ja ruokavalion tarkistus. Näissä kokouksissa osallistujat saavat viikon verran pakasteruokia, standardoidut menut tarkistuslistoineen ja eriteltyjä päivittäistavaraluetteloita. Tällä hetkellä tarjotaan myös leivonnaisia ​​ja koetärkkelyksiä sisältäviä tuotteita. Muoto, jossa ne toimitetaan (pakastettu tai tuore), riippuu tuotteen luonteesta ja sen kyvystä kestää kylmäsäilytystä tai pakastettua säilytystä. Huuhtelujakson aikana (päivät 28-42) koehenkilöt jatkavat alkoholin pidättymistä, mutta nauttivat tavanomaista kotiruokavalioonsa 7 päivän ajan, jota seuraa perusruokavalio vielä 7 päivää. Odotamme, että jos osallistujille annetaan lupa syödä mitä he haluavat 7 päivän ajan pesun aikana, heidän noudattamisensa paranee ruokavalion loppuosan aikana.

Osallistujat tuovat ruokakaupan kuitit edelliseltä viikolta, jotta ravitsemusterapeutit voivat varmistaa muiden kuin Bioravitsemusyksikön tarjoamien määrättyjen ruokien hankinnan.

Laihdutuskäynnit, jotka vaativat verenottoa (A-käynnit: 2,5 tuntia, B-käynnit: 5 tuntia):

Osallistujat vierailevat klinikalla kahtena erillisenä päivänä kunkin ruokavalion päätyttyä antamaan verinäytteitä. Kaksinkertainen näytteenotto vähentää biologista vaihtelua ja parantaa siten tutkimuksen kykyä havaita merkittäviä ruokavalion aiheuttamia mittausmuutoksia. Kunkin ruokavalion toiseksi viimeisenä päivänä (käynnit 2A, 3A, 4A) osallistujat vierailevat klinikalla paastotilassa ja tarjoavat paastoverinäytteen (30 ml) kokonais-, LDL- ja HDL-kolesterolin, triglyseridien, apolipoproteiinien A1 ja apolipoproteiinien mittaamiseksi. B ja lipoproteiinien alafraktioanalyysi ionien liikkuvuuden perusteella. Lipoproteiinilipaasi- ja maksalipaasiaktiivisuudet mitataan myös plasmasta (20 ml), joka saadaan 15 minuuttia IV hepariinin (75 yksikköä/kg) jälkeen. Jokaisen ruokavalion viimeisenä päivänä (käynnit 2B, 3B, 4B) osallistujat antavat toisen paastoverinäytteen (lipideille ja lipoproteiineille, kuten yllä) ja rasvakudoksen aspiraation lipogeenisen geenin ilmentymisen mittaamiseksi. Lisäksi käynneillä 3B ja 4B suoritetaan 3 tunnin tärkkelystoleranssiateria, jossa otetaan verinäytteitä glukoosin ja insuliinin mittaamiseksi paastotilassa ja 30, 60, 120 ja 180 minuuttia tärkkelysaterian jälkeen (yhteensä 60 ml).

Kliiniset toimenpiteet:

Kliiniset mittaukset: Verenpaine mitataan 3 kertaa istuma-asennossa ja kahdesta viimeisestä arvosta lasketaan keskiarvo. Antropometriset mittaukset sisältävät pituuden, painon, vyötärön ja lantion ympärysmitan sekä kehon rasvaprosentin bioimpedanssilla (Tanitan asteikolla). Vyötärön ympärysmitta mitataan kaksi kertaa suoliluun harjasta ja lantion ympärysmitta mitataan lantion leveimmästä kohdasta.

Normaali verinäytteenotto: Verinäytteet otetaan osallistujilta 12–14 tunnin paaston jälkeen käyttämällä tavallisia verenkeräysmenetelmiä. Veri kerätään putkiin, jotka sisältävät seuraavan säilöntäaineliuoksen: 3,0 g EDTA:ta (dikalium), 1,7 mg P-Packia, 0,15 g gentamysiinisulfaattia, 0,15 g kloramfenikolia, 5,96 ml aprotiniinia (Sigma A-62309) ja natrium 0. jotka kaikki laimennetaan 20 ml:ksi kahdesti deionisoidulla vedellä. Plasma erotetaan sentrifugoimalla välittömästi 4 °C:ssa. Lipidi- ja lipoproteiinimittaukset suoritetaan ja plasman alikvootit jäädytetään tulevia analyyseja varten.

Hepariinin jälkeinen verinäyte:

Verinäyte (20 ml) otetaan 15 minuuttia sen jälkeen, kun hepariinibolus (75 U/kg, katso perustelut kohdasta Riski) laskimoon, plasman lipaasiaktiivisuuden analysointia varten. Ennen antoa osallistujilta haastatellaan sukuhistorian hyytymishäiriöitä tai henkilökohtaisia ​​vasta-aiheita, mukaan lukien antikoagulanttien käyttö, verenvuoto- tai mustelmapoikkeavuudet tai muut sairaudet, allergiat tai viimeaikaiset hammaslääkärityöt. Annon jälkeen osallistujat pysyvät klinikalla 2 tunnin ajan tarkkailtuna. Heille toimitetaan myös tiedot hepariinista ja menettelystä.

Rasvakudoksen biopsia:

Rasvabiopsiat kerätään ihonalaiselta viereiseltä alueelta R.N. käyttämällä standardisoitua, steriiliä menettelyä. Osallistujia kehotetaan olemaan ottamatta 2 päivän kuluessa toimenpiteestä mitään lääkkeitä, jotka voivat heikentää hyytymistä. Tämä toimenpide suoritetaan vähintään 24 tuntia hepariinilipaasianalyysin jälkeen. Koska hepariinin puoliintumisaika on 2 tuntia, tämä aika on riittävä puhdistuman varmistamiseksi. Kun osallistujan pakaran yläpuolella oleva alue on puhdistettu betadiinilla, Lidocaine hydrochloride 1% (10mg/ml) ruiskutetaan ihonalaiseen ihoon. Numero 14G neulalla imetään 1-1,5 cc rasvaa. Paikan päällä pidetään kylmää painetta ja sitten haava sidotaan. Osallistujia neuvotaan vaihtamaan side kerran päivässä kahden päivän ajan. Heille toimitetaan kaksi sidettä, ohjeet haavan puhtaanapitoon sekä puhelinnumero, josta klinikan henkilökunta on tavoitettavissa.

Tärkkelysateriatesti:

Välittömästi rasvakudoksen biopsian ja paastoverenoton jälkeen osallistujille annetaan tärkkelysateria, joka tarjoaa 1/3 päivittäisistä kaloreista kulutettavaksi 15 minuutissa. Se on makroravinnekoostumukseltaan samanlainen kuin testiruokavalio, johon osallistuja on määrätty, ja siinä on joko runsaasti amyloosia tai amylopektiiniä. Veri otetaan suonensisäisesti 30, 60, 120 ja 180 minuuttia aterian jälkeen. Tätä toimenpidettä varten suonensisäinen kanyyli tai neula asetetaan kyynärpäälaskimoon. Normaalia suolaliuosta ajetaan auki pitämisen nopeudella kyynärpäähän.