Resistent stivelse insulinsensitivitetsforsøk (RESIST)

Klinikkbesøk:

Deltakerne vil besøke klinikken totalt 11 ganger fra skjermbilde til fullføring av studien. Dette vil inkludere ukentlige besøk hos en dietetiker og 7 besøk som krever blodprøvetaking (skjerm og to ganger etter hver diettperiode). Ved hvert besøk vil deltakerne bli veid, midje- og hofteomkrets vil bli målt, og blodtrykket vil bli overvåket. Den totale mengden blod som samles inn er 450 ml.

Screeningbesøk (V1: 1 time):

Rekrutterere vil i utgangspunktet avgjøre kvalifisering gjennom gjennomgang av et screeningsskjema og et telefon- eller personlig intervju. Hvis et potensielt emne er kvalifisert og interessert, sendes en orienteringspakke som vil inneholde skriftlig informasjon om studiekravene. Interesserte forsøkspersoner vil bli planlagt for et screeningbesøk for å fastslå endelig kvalifisering av det kliniske personalet. Ved screeningbesøket (V1) vil informert samtykke innhentes, antropometriske mål oppnås (høyde, vekt, midjeomkrets, blodtrykk), og blod (30 ml) vil bli tappet for å vurdere laboratoriekriterier for registrering (totalkolesterol, LDL-kolesterol). , HDL-kolesterol, triglyserider, glukose og insulin for bestemmelse av HOMA-IR). Screening av blodprøver fra personer som enten ikke er kvalifisert eller uvillige til å fortsette med intervensjonen vil bli ødelagt. Vi vil screene for graviditet, og gjenta graviditetstester etter alle "A"-besøk (V2a, v3a, v4a). Menstruerende kvinner vil få en kalender for å registrere menstruasjonssyklusen deres for varigheten av studien. Kvalifiserte personer vil bli kontaktet innen 2 uker etter dette skjermbesøket og invitert til å delta i studien. Vi er forberedt på å registrere opptil 64 deltakere i denne studien for å oppnå et mål på 52 fullførte deltakere (20 % frafall).

Kostholdsekspertbesøk (innledende: 1 time, etterfølgende: 15 min):

Deltakerne vil møte ukentlig med en ernæringsfysiolog eller diettist for å motta rådgivning inkludert vektkontroll og diettgjennomgang. På disse møtene vil deltakerne motta en ukes frosne hovedretter, standardiserte menyer med sjekklister og spesifiserte dagligvarelister. Bakevarer og produkter som inneholder teststivelsen vil også bli levert på dette tidspunktet. Formen de vil bli levert i (frosne eller ferske) vil avhenge av produktets art og dets kapasitet til å tåle kjøling kontra frossen lagring. I løpet av utvaskingsperioden (dager 28-42) vil forsøkspersonene fortsette å avstå fra alkohol, men vil innta sitt vanlige hjemmekosthold i 7 dager, etterfulgt av baseline-dietten i ytterligere 7 dager. Vi forventer at å gi deltakerne tillatelse til å spise det de vil i 7 dager under utvaskingen vil forbedre deres etterlevelse under resten av kostholdsprotokollen.

Deltakerne tar med kvitteringer fra forrige uke slik at kostholdsekspertene kan sørge for kjøp av foreskrevet mat som ikke leveres av Bioernæringsenheten.

Besøk etter diett som krever blodprøver (A-besøk: 2,5 timer, B-besøk: 5 timer):

Deltakerne vil besøke klinikken på to separate dager etter fullføring av hver diett for å gi blodprøver. Duplikatprøvetaking reduserer biologisk variasjon, og forbedrer dermed kraften til studien for å oppdage betydelige diett-induserte endringer i måling. På den nest siste dagen av hver diett (besøk 2A, 3A, 4A) vil deltakerne besøke klinikken i fastende tilstand og gi en fastende blodprøve (30 ml) for måling av totalt, LDL- og HDL-kolesterol, triglyserider, apolipoproteiner A1 og B, og lipoprotein-subfraksjonsanalyse ved ionemobilitet. Lipoproteinlipase- og hepatisk lipaseaktivitet vil også bli målt i plasma (20 ml) oppnådd 15 minutter etter IV-heparin (75 enheter/kg). På den siste dagen av hver diett (besøk 2B, 3B, 4B), vil deltakerne gi en andre fastende blodprøve (for lipider og lipoproteiner som ovenfor) og en fettvevsaspirasjon for å måle lipogent genuttrykk. I tillegg vil et 3 timers stivelsestoleransemåltid bli utført ved besøk 3B og 4B, med blodprøver for måling av glukose og insulin tatt i fastende tilstand og 30, 60, 120 og 180 minutter etter et stivelsesmåltid (totalt 60 ml).

Kliniske prosedyrer:

Kliniske målinger: Blodtrykket vil bli målt 3 ganger i sittende stilling og gjennomsnittet av de 2 siste verdiene. Antropometriske mål inkluderer høyde, vekt, midje- og hofteomkrets, og % kroppsfett etter bioimpedans (Tanita-skala). Midjeomkretsen måles to ganger ved hoftekammen og hofteomkretsen måles på det bredeste punktet av hoftene.

Standard blodprøvetaking: Ved å bruke standard blodprøvetakingsprosedyrer vil blodprøver bli samlet inn fra deltakerne etter en 12-14 timers faste. Blodet samles opp i rør som inneholder følgende konserveringsløsning: 3,0 g EDTA (dikalium), 1,7 mg P-Pack, 0,15 g gentamycinsulfat, 0,15 g kloramfenikol, 5,96 ml aprotinin (Sigma A-62730 g natrium) og som alle er fortynnet til 20 ml med dobbelt avionisert vann. Plasma separeres ved umiddelbar sentrifugering ved 4°C. Lipid- og lipoproteinmålinger utføres og alikvoter av plasma fryses for fremtidige analyser.

Post-heparin blodprøvetaking:

En blodprøve (20 ml) vil bli tatt 15 minutter etter intravenøs administrering av en heparinbolus (75 U/kg, se risikoavsnittet for begrunnelse) for analyse av plasmalipaseaktivitet. Før administrering vil deltakerne bli intervjuet for familiehistorie med koagulasjonsforstyrrelser eller personlige kontraindikasjoner, inkludert bruk av antikoagulantia, historie med blødninger eller blåmerker eller andre sykdommer, allergier eller nylig tannlegearbeid. Etter administrering vil deltakerne forbli på klinikken i 2 timer under observasjon. De vil også få et informasjonsark om heparin og prosedyren.

Fettvevsbiopsi:

Fettbiopsier vil bli samlet inn fra den subkutane flankerende regionen av en R.N. ved hjelp av en standardisert, steril prosedyre. Deltakerne vil bli bedt om å ikke ta noen medisiner innen 2 dager etter prosedyren som kan svekke koagulering. Denne prosedyren vil finne sted minst 24 timer etter post-heparinlipaseanalyse. Fordi halveringstiden til heparin er 2 timer, er dette tilstrekkelig tid til å sikre clearance. Etter å ha renset området over deltakerens rumpe med betadin, vil Lidocaine hydrochloride 1% (10mg/ml) injiseres i den subkutane huden. Ved å bruke en tall 14G nål, vil 1-1,5 c.c. med fett aspireres. Kaldt trykk vil bli holdt på stedet og deretter bandasjeres såret. Deltakerne vil bli bedt om å skifte bandasje en gang daglig i to dager. De vil få to bandasjer, instruksjoner for å holde såret rent, og et telefonnummer der klinisk personale kan nås.

Test av stivelsesmåltid:

Umiddelbart etter fettvevsbiopsi og fastende blodprøver, vil deltakerne få et stivelsesmåltid som gir 1/3 av de daglige kaloriene som skal konsumeres på 15 minutter. Den vil i makronæringsstoffsammensetning være lik testdietten som deltakeren er tildelt og vil enten være høy i amylose eller amylopektin. Blod vil bli tappet 30, 60, 120 og 180 minutter etter inntak av måltid gjennom en IV. For denne prosedyren vil en intravenøs kanyle eller nål plasseres i den antecubitale venen. En normal saltvannsløsning vil bli kjørt med en holde åpen hastighet på det antecubitale stedet.