렌즈콩이 신진대사 및 염증에 미치는 영향

조사관은 T2D 및 CVD에 대한 위험이 입증된 OW/OB 성인에서 12주 동안 렌즈콩 대 다량 영양소 일치(섬유질 제외) 대조 치료의 병렬 개입을 활용할 것입니다. 두 번째 식사 효과를 활용하고 저녁 식사 시 칼로리 섭취를 줄이기 위해 참가자들에게 미리 만들어진 정오 식사 형태로 실험 식단을 제공할 예정입니다. 개입 전후 평가는 다음 변수에 대해 이루어질 것입니다: 장내 미생물의 구성(미생물 종 및 상대적 존재비), 장내 대사체, TG의 식후 반응, 염증성 사이토카인 및 고지방 식사 도전에 대한 혈청 대사체( 확립된 염증 자극), 공복 혈청 포도당, 지질, 인슐린, 염증 표지자 및 대사체, 혈압, 체중, 체성분, 허리 둘레 및 내장 지방 조직의 양을 포함한 인체 측정 측정. 신체 활동, 좌식 행동 및 습관적인 식단을 측정하여 이러한 변수를 사용하여 참가자의 특성을 파악하고 데이터 분석 및 해석을 돕습니다.

절차:

식후 지질혈증 및 염증 반응: 40~100g의 식이 지방을 포함하는 고지방 식사 챌린지는 식후 트리글리세라이드혈증 및 염증 반응을 모두 측정하기 위해 확립된 실험실 테스트입니다. 조사관은 50명 이상의 개인에게 토스트에 버터 형태로 전달되는 50g 용량의 지방을 사용했는데, 이는 이 특정 용량이 낮은 TG와 높은 TG 및 염증 반응자를 구별하는 데 효과적이기 때문입니다. 간단히 말해서, 참가자는 하룻밤 금식 후 실험실에 보고하고 내재하는 정맥 카테터를 전주정맥에 배치하고 혈액 샘플을 고혈당 섭취 전, 섭취 후 1, 2, 4, 6시간에 수집합니다. 뚱뚱한 식사. 샘플은 임상 화학 분석기(Piccolo xpress)를 사용하여 TG(및 전체 지질 패널 + 글루코스)에 대해 실시간으로 분석되는 반면, 혈청 샘플은 분주되어 염증성 사이토카인, 대사체학 및 인슐린에 대한 분석까지 -80C에서 저장됩니다. 연구자들은 고감도 Luminex 다중화 기술(Bio- Millipore에서 준비한 Rad Bio-Plex® 200 HTS).

식이 개입: 렌틸콩을 사용한 진행 중인 CRT를 위해 확립된 방법을 사용하여 조사관은 실험군과 대조군에 대해 매주 참가자당 4.6컵 또는 0컵의 렌틸콩을 제공하기 위해 7끼 식사를 준비합니다. 식사는 다량영양소 함량(섬유질 제외)과 일치하며, 간 칠면조는 대조 식사에서 렌틸콩을 대체합니다. 검은콩을 위한 유사한 식사가 개발될 것입니다. 참가자는 정오 식사로 제공되는 음식을 섭취한 다음, 사전에 분량을 줄이고 저녁 식사 때 배부르게 먹지 않도록 지시받습니다. 이 전략은 정오 식사 시 맥박의 포만감 효과와 다음 식사인 저녁 식사 시 자발적 소비가 감소하는 '두 번째 식사 효과'를 활용한 것이다. 각 참가자는 매주 한 번 그날 실험 식사를 섭취했는지 여부, 배고픔, 포만감, 포만감, 당일 식사에 대한 만족도(오후 4시), 위장 편안함(팽만감 정도, 헛배 부름, 경련 및 편안함) 하루 종일(오후 8시). 이 방법론은 렌즈 콩 식사가 똑같이 만족스럽고 더 큰 포만감을 유발하며 잘 견디는 것을 입증하기 위해 진행중인 연구에서 성공적으로 구현되었습니다.

장내 마이크로바이옴 분석: Powersoil® DNA Isolation Kit(Mo Bio Laboratories Inc.)를 사용하여 배설물 샘플에서 벌크 DNA를 추출합니다. DNA는 16S V4 가변 영역의 Illumina MiSeq 증폭 시퀀싱을 위해 미시간 대학의 미생물 시스템 센터로 밤새 배송됩니다. 원시 시퀀싱 읽기는 mothur MiSeq 표준 운영 절차에 따라 mothur(v.1.39.5) 소프트웨어 패키지를 사용하여 처리 및 선별되며 잠재적인 키메라 시퀀스는 Uchime(v4.2.40) 알고리즘 및 분류학적 분류를 사용하여 식별 및 제거됩니다. Ribosomal Database Project의 Bayesian 분류기를 사용하여 할당되고 작동 분류 단위(OTU)는 97% 시퀀스 유사성 임계값에서 VSEARCH 거리 기반 클러스터링 알고리즘을 사용하여 mothur에서 할당됩니다.

대사 분석: 샘플은 고해상도 액체 크로마토그래피 질량 분석법(LCMS)으로 분석됩니다. 친수성 상호작용 크로마토그래피(HILIC) 및 역상(RP) 컬럼은 심층 분석에 사용됩니다. 대사산물 식별은 METLIN 및 HDB(Human Metabome Database)와 일치하는 단편화 패턴 일치, 실제 표준 및 데이터베이스 일치를 사용합니다. 중요한 관심을 끄는 새로운 기능은 액체 크로마토그래피 질량 분석법 고체상 추출 핵 자기 공명(LCMS-SPE-NMR)으로 특징지어질 것입니다. Pathway 분석은 XCMS와 mummichog를 사용합니다.

식이 분석. 장기간의 식습관은 아로니아와 렌즈콩의 단기 보충에 대한 반응에 영향을 미치는 적응을 만들 수 있습니다. 이 연구는 19세 이상의 성인을 위해 고안된 식품 빈도 설문지인 웹 기반 식이력 설문지(DHQ III)의 가장 최신 버전(2018)을 사용할 예정입니다. NIH 국립 암 연구소. DHQ III의 출력에는 탄수화물 성분, 카로티노이드 및 토코페롤, 보충제의 식이 성분, 지방, 지방산 및 콜레스테롤, 다량 영양소 및 에너지, 미네랄, 단백질 성분 및 비타민이 DHQ III 출력 파일에서 사용 가능한 식이 성분 및 식품군이 포함됩니다. .

신체 활동 및 좌식 행동 모니터링: 참가자는 개입 1주 및 12주 동안 Actical 전방향 가속도계를 착용하여 총 신체 활동, 저강도 활동 시간, 중등도에서 격렬한 활동, 격렬한 활동, 좌식 활동을 분 단위로 측정합니다. .

통계 분석: H1은 개입 전 평가와 개입 후 평가 간의 차이를 비교하기 위해 2-샘플 t-테스트를 ​​사용하여 테스트됩니다. TG 반응에 대한 예비 데이터와 동물 모델에서 발표된 결과와 일치하는 50% 효과 크기를 사용하여 알파 = 0.05에서 0.76에서 0.86의 검정력을 달성하기 위해 그룹당 18-24명의 참가자가 필요할 것으로 추정되었습니다. H2를 테스트하기 위해 조사관은 예비 연구에서 사용된 방법을 사용하여 장내 미생물군집의 변화를 식별하여 낮은 TG 반응자와 높은 TG 반응자를 구별하는 장내 미생물군집의 특성을 식별한 다음 회귀 분석을 사용하여 변화의 가변성 수준을 결정합니다. 장내 미생물 종의 상대적 풍부도 변화로 설명되는 펄스 및 제어 처리. H3를 테스트하기 위해 조사관은 장 및 혈청 대사체의 변화를 확인한 다음 대사체 변화와 관련된 대사 경로를 결정하여 맥박이 건강에 미치는 잠재적인 메커니즘을 식별합니다.