- ICH GCP
- 미국 임상 시험 레지스트리
- 임상시험 NCT05978947
정액 매개변수에 대한 미세유체 칩 방법 대 밀도 구배 원심분리 방법
밀도구배 원심분리법에 따른 미세유동칩법에 의한 정자조제가 정액 매개변수에 미치는 영향 원문보기 KCI 원문보기 인용
연구 개요
상세 설명
불임은 부부 6쌍 중 1쌍에게 영향을 미치며 많은 여성들이 다양한 이유로 결혼과 출산을 미루면서 점점 더 흔해지고 있습니다. 체외 수정(IVF)은 오래 지속된 불임 부부에게 가장 효과적인 치료법이며 40년 이상 전 IVF의 첫 출산이 보고된 이후 전 세계 수백만 명의 불임 부부를 치료해 왔습니다. 그러나 기술의 발전에도 불구하고 2018년 유럽에서 임신 및 출산율은 전이당 약 35% 및 25%에 머물고 있습니다. 모든 불임 부부 중 20~30%는 남성 불임 때문입니다. 정액 매개변수는 IVF 결과에 영향을 미칠 수 있으며 정상 출산에 대한 정자의 상대적 기여도는 약 10-15%라는 가설을 세웠습니다.
IVF는 호르몬 주사를 통해 여성의 난소를 자극하여 작은 수술로 채취한 여러 개의 난모세포를 생성한 다음 정자와 혼합하여 실험실에서 배아를 형성합니다. 보통 난자 채취 후 2~5일 후에 1~2개의 배아를 자궁으로 이식합니다. IVF에서 남편이 생산한 정액 샘플은 일반적으로 밀도 구배 원심 분리 방법으로 처리되어 수정을 위해 더 나은 정자를 분리합니다. 밀도 구배 원심 분리는 상대적으로 좋은 운동성과 정상적인 형태로 정자를 풍부하게 할 수 있습니다. 정자 밀도가 매우 낮은 정액 표본에서 정자 회수가 가능합니다. 비교적 좋은 수익률을 낼 수 있습니다. 그러나 밀도가 다른 두 개의 매체로 구성된 밀도 구배를 설정하려면 기술 교육이 필요합니다. 정액 처리 중에 정자는 구배를 통해 원심분리됩니다. 원심분리는 그 과정에서 생성되는 활성산소종에 의해 정자에 상당한 피해를 주는 것으로 알려져 있다. 반응성 산소종은 정자 DNA 단편화 및 착상 실패, 유산 등의 부작용을 일으키는 주요 원인 중 하나로 알려져 있습니다. 메타 분석에 따르면 정자 DNA 손상은 IVF 후 임상 임신에 부정적인 영향을 미칩니다.
나노입자 제조를 위한 마이크로 스케일 범위의 채널과 챔버를 포함하는 소형화된 장치인 미세유체 칩(microfluidic chip)이 최근 대안적인 정자 제조 기술로 사용되고 있다. 미세 유체 기술을 사용함으로써 정자는 여성 생식기 미세 환경에서 자연 선택을 밀접하게 시뮬레이션하는 칩을 통과할 수 있습니다. 이 기술은 원심분리 없이 정액 샘플에서 고품질의 운동성 정자를 선별할 수 있게 하여 활성산소종 형성을 감소시킵니다.
미세유체 칩 방법을 사용하면 밀도 구배 원심분리 방법에 비해 DNA 단편화가 크게 감소하고 운동성이 증가한다는 연구 결과가 일관되게 입증되었습니다.
이 무작위 통제 시험의 목적은 무작위 시험을 시작하기 전에 정액 매개변수에 대한 미세 유체 칩 방법과 밀도 구배 원심 분리 방법에 의한 정자 준비의 효과를 비교하여 두 가지 정자 준비 방법이 여성의 누적 출생률에 미치는 영향을 비교하는 것입니다. 체외 수정.
목표:
이 무작위 통제 시험의 첫 번째 목적은 정액 매개변수에 대한 밀도 구배 원심분리와 미세 유체 칩 방법에 의한 정자 준비의 효과를 비교하는 것입니다. 가설은 미세 유체 칩 방법에 의한 정자 준비를 사용하면 정액 매개 변수가 향상된다는 것입니다.
두 번째 목표는 정액 매개변수에 대한 두 개의 서로 다른 미세유체 칩 플랫폼의 효과를 비교하는 것입니다.
시험 디자인:
불임 치료를 위해 Queen Mary 병원의 보조 생식 및 배아학 센터에서 참석하는 남성을 모집합니다.
연구 유형
등록 (추정된)
단계
- 해당 없음
연락처 및 위치
연구 연락처
- 이름: YU WING TONG, MBBS
- 전화번호: 92707722
- 이메일: ptong@connect.hku.hk
연구 장소
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Hong Kong
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Hong Kong, Hong Kong, 중국
- 모병
- Department of Obstetrics and Gynaecology
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연락하다:
- Ernest HY NG, MD
- 전화번호: 852-22553400
- 이메일: nghye@hku.hk
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수석 연구원:
- Ernest HY NG, MD
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참여기준
자격 기준
공부할 수 있는 나이
- 어린이
- 성인
- 고령자
건강한 자원 봉사자를 받아들입니다
설명
포함 기준:
- 총 부피가 1.5ml 이상이고 ml당 운동성 정자가 500만 개 이상인 생 정액의 정자 농도.
제외 기준:
- ml당 운동성 정자가 500만개 미만인 생정액의 정자 농도
- 사정한 정액 샘플을 제공할 수 없는 남성
공부 계획
연구는 어떻게 설계됩니까?
디자인 세부사항
- 주 목적: 치료
- 할당: 무작위
- 중재 모델: 병렬 할당
- 마스킹: 네 배로
무기와 개입
참가자 그룹 / 팔 |
개입 / 치료 |
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실험적: 미세 유체 칩 방법
정자 분리 장치 - ZyMōt Multi 850µL 장치(ZyMōt Fertility, Inc)가 사용됩니다.
미세 유체 챔버는 제조업체의 지침에 따라 사용됩니다.
850μL의 정액 샘플이 장치의 입구 포트에 추가되고 750μL의 수정 배지가 출구 포트에 추가됩니다.
그런 다음 장치는 37°C에서 6% CO2에서 배양됩니다.
30분 후 출구 포트에서 준비된 샘플 500μL를 제거하고 라벨이 붙은 테스트 튜브에 피펫팅합니다.
최종 부피는 정자 계수를 위해 1mL로 조정됩니다.
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ZyMōt Multi 850µL 장치는 자궁내 수정(IUI) 및 체외 수정(IVF)과 같은 보조 생식 기술(ART) 절차에 사용하도록 설계된 실험실 도구입니다.
독점적인 특허 기술을 사용하여 ART 절차에 사용하기 위해 정액 샘플에서 운동성 정자를 분리하고 선택하는 정자 준비 장치입니다.
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활성 비교기: 밀도 구배 원심분리 방법
액화 후 Pureception(CooperSurgical, 덴마크) 정자 밀도 구배 배지를 사용하여 불연속 밀도 구배 원심분리 방법으로 정자 준비를 완료합니다.
원심분리 후 생성된 정자 펠렛을 정자 세척 배지(G-IVF Plus, Vitrolife, Sweden)로 1회 세척합니다. 세척된 정자는 최종 부피를 500 μL로 조정하여 동일한 배지로 재현탁합니다.
최종 부피는 정자 계수를 위해 1mL로 조정됩니다.
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밀도 구배 원심분리는 밀도를 기준으로 다양한 유형의 세포 또는 입자를 분리하고 분리하는 데 사용되는 실험실 기술입니다.
그것은 일반적으로 세포 생물학, 면역학 및 보조 생식 기술(ART)을 포함한 다양한 응용 분야에서 사용됩니다.
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연구는 무엇을 측정합니까?
주요 결과 측정
결과 측정 |
측정값 설명 |
기간 |
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Comet 분석에 의한 DNA 단편화
기간: 1개월
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Olive tail moment를 정량적 측정 기준으로 사용하는 Comet 분석에 의한 DNA 단편화 측정.
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1개월
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2차 결과 측정
결과 측정 |
측정값 설명 |
기간 |
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정자 수
기간: 1개월
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정자 수
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1개월
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전방 운동성
기간: 1개월
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세계보건기구(WHO) 기준을 사용한 수동 관찰에 의한 정자의 전방 운동성 평가.
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1개월
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형태
기간: 1개월
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Tygerberg 엄격한 기준을 사용한 수동 관찰에 의한 정자 형태의 정량적 평가.
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1개월
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정자 이수성
기간: 1개월
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염색체 X, Y, 13, 18 및 21에 대한 프로브를 사용하여 FISH(Fluorescence in situ hybridization)에 의한 정자 이수성의 정량적 측정.
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1개월
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칼슘 이오노포어 A23187 유도 첨체 반응 검정
기간: 1개월
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유세포 분석법을 이용한 칼슘 이온통로구 A23187에 의해 유도된 정자 내 첨체 반응의 정량적 측정.
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1개월
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손상되지 않은 난모세포/헤미조나 결합 분석
기간: 1개월
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온전한 난모세포/헤미조나 결합 분석을 사용하여 온전한 난모세포 또는 헤미조나에 결합하는 정자의 정량적 측정.
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1개월
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CASA로 측정한 정자 속도
기간: 1개월
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컴퓨터 지원 정자 분석(CASA) 시스템을 사용하여 전방 운동성, 곡선 속도 및 선형성 평가를 포함하는 정자 속도의 정량 분석.
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1개월
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인공 지능 분석
기간: 1개월
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인공지능 알고리즘을 이용한 정자 형태의 정량 분석.
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1개월
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공동 작업자 및 조사자
연구 기록 날짜
연구 주요 날짜
연구 시작 (실제)
기본 완료 (추정된)
연구 완료 (추정된)
연구 등록 날짜
최초 제출
QC 기준을 충족하는 최초 제출
처음 게시됨 (실제)
연구 기록 업데이트
마지막 업데이트 게시됨 (추정된)
QC 기준을 충족하는 마지막 업데이트 제출
마지막으로 확인됨
추가 정보
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