Questa pagina è stata tradotta automaticamente e l'accuratezza della traduzione non è garantita. Si prega di fare riferimento al Versione inglese per un testo di partenza.

Metodo del chip microfluidico rispetto al metodo di centrifugazione del gradiente di densità sui parametri del seme

3 dicembre 2024 aggiornato da: Professor Ernest Hung-Yu Ng

Effetto della preparazione dello sperma mediante un metodo con chip microfluidico rispetto a un metodo di centrifugazione a gradiente di densità sui parametri dello sperma

L'infertilità colpisce molte coppie, con l'infertilità maschile che è una causa comune. La fecondazione in vitro (FIV) è un trattamento efficace, ma le sue percentuali di successo non sono elevate. La qualità dello sperma può influenzare i risultati della fecondazione in vitro e l'attuale metodo utilizzato per processare lo sperma può danneggiare lo sperma e il DNA. Gli scienziati stanno ora testando un nuovo metodo chiamato tecnologia dei chip microfluidici, che riduce i danni al DNA e aumenta il movimento degli spermatozoi. Questo studio confronterà l'efficacia del metodo con chip e l'attuale metodo sulla qualità dello sperma negli uomini che frequentano una clinica per la fertilità. Lo studio assegnerà in modo casuale lo sperma raccolto a uno dei due metodi e valuterà la qualità dello sperma utilizzando diversi test, nonché la differenza nell'utilizzo di due diverse piattaforme di chip microfluidici. L'esito primario sarà la frammentazione del DNA e altri esiti includono il conteggio e la motilità degli spermatozoi. I campioni di sperma sarebbero stati raccolti dai soggetti dello studio per l'analisi e che sia i campioni che i risultati non sarebbero stati utilizzati nel trattamento dei pazienti.

Panoramica dello studio

Descrizione dettagliata

L'infertilità colpisce una coppia su sei e sta diventando sempre più comune poiché molte donne ritardano il matrimonio e il parto per vari motivi. La fecondazione in vitro (IVF) è il trattamento più efficace per le coppie con infertilità di lunga data e ha curato milioni di coppie infertili in tutto il mondo da quando è stata segnalata la prima nascita della fecondazione in vitro più di 40 anni fa. Tuttavia, nonostante i progressi tecnologici, i tassi di gravidanza e natalità rimangono intorno al 35% e al 25% per trasferimento in Europa nel 2018. Tra tutte le coppie infertili, il 20-30% è dovuto all'infertilità maschile. I parametri seminali possono influenzare i risultati della fecondazione in vitro ed è stato ipotizzato che il contributo relativo dello sperma a un parto vivo sia di circa il 10-15%.

La fecondazione in vitro prevede iniezioni di ormoni per stimolare le ovaie di una donna a produrre un numero di ovociti che vengono raccolti con un'operazione minore e poi mescolati con lo sperma per formare embrioni in laboratorio. Di solito, uno o due embrioni vengono trasferiti nell'utero 2-5 giorni dopo il prelievo degli ovociti. Nella fecondazione in vitro, i campioni di sperma prodotti dai mariti vengono comunemente elaborati mediante un metodo di centrifugazione in gradiente di densità per isolare gli spermatozoi migliori per la fecondazione. La centrifugazione in gradiente di densità può arricchire gli spermatozoi con motilità relativamente buona e morfologia normale. È possibile recuperare gli spermatozoi da campioni di seme con una densità spermatica molto bassa. Può fornire una resa relativamente buona. Tuttavia, è necessaria una formazione tecnica per impostare il gradiente di densità costituito da due mezzi con densità diverse. Durante l'elaborazione del seme, gli spermatozoi vengono centrifugati attraverso il gradiente. È noto che la centrifugazione provoca notevoli danni agli spermatozoi da parte delle specie reattive dell'ossigeno prodotte durante il processo. È noto che le specie reattive dell'ossigeno sono una delle principali cause che portano alla frammentazione del DNA dello sperma e ai conseguenti esiti avversi, tra cui il fallimento dell'impianto e l'aborto spontaneo. Una meta-analisi ha mostrato che il danno al DNA dello sperma ha un effetto negativo sulla gravidanza clinica dopo la fecondazione in vitro.

Un chip microfluidico, che è un dispositivo miniaturizzato contenente canali e camere nell'intervallo di microscala per la preparazione di nanoparticelle, viene utilizzato di recente come tecnica alternativa di preparazione dello sperma. Utilizzando la tecnologia microfluidica, gli spermatozoi possono passare attraverso il chip che simula da vicino la selezione naturale nel microambiente del tratto genitale femminile. La tecnologia consente la selezione di spermatozoi mobili di alta qualità da campioni di seme senza la necessità di centrifugazione, portando a una ridotta formazione di specie reattive dell'ossigeno.

Gli studi hanno costantemente dimostrato che l'uso di un metodo con chip microfluidico riduce notevolmente la frammentazione del DNA e aumenta la motilità rispetto al metodo di centrifugazione in gradiente di densità.

Questo studio controllato randomizzato mira a confrontare l'effetto della preparazione dello sperma mediante un metodo con chip microfluidico rispetto a un metodo di centrifugazione in gradiente di densità sui parametri del seme prima dell'inizio di uno studio randomizzato che confronta gli effetti dei due metodi di preparazione dello sperma sui tassi cumulativi di nati vivi di in fecondazione in vitro.

Obiettivi:

Il primo obiettivo di questo studio controllato randomizzato è confrontare l'effetto della preparazione dello sperma mediante un metodo con chip microfluidico rispetto a una centrifugazione in gradiente di densità sui parametri del seme. L'ipotesi è che l'uso della preparazione dello sperma mediante un metodo con chip microfluidico migliori i parametri del seme.

Il secondo obiettivo è confrontare l'effetto di due diverse piattaforme di chip microfluidici sui parametri del seme.

Progetto di prova:

Verranno reclutati uomini che frequentano il Centro di riproduzione assistita ed embriologia, Queen Mary Hospital per il trattamento della fertilità.

Tipo di studio

Interventistico

Iscrizione (Stimato)

80

Fase

  • Non applicabile

Contatti e Sedi

Questa sezione fornisce i recapiti di coloro che conducono lo studio e informazioni su dove viene condotto lo studio.

Contatto studio

Luoghi di studio

    • Hong Kong
      • Hong Kong, Hong Kong, Cina
        • Reclutamento
        • Department of Obstetrics and Gynaecology
        • Contatto:
          • Ernest HY NG, MD
          • Numero di telefono: 852-22553400
          • Email: nghye@hku.hk
        • Investigatore principale:
          • Ernest HY NG, MD

Criteri di partecipazione

I ricercatori cercano persone che corrispondano a una certa descrizione, chiamata criteri di ammissibilità. Alcuni esempi di questi criteri sono le condizioni generali di salute di una persona o trattamenti precedenti.

Criteri di ammissibilità

Età idonea allo studio

  • Bambino
  • Adulto
  • Adulto più anziano

Accetta volontari sani

Sì

Descrizione

Criterio di inclusione:

  • Concentrazione spermatica del seme crudo con almeno 5 milioni di spermatozoi mobili per ml con un volume totale non inferiore a 1,5 ml.

Criteri di esclusione:

  • Concentrazione spermatica del seme crudo inferiore a 5 milioni di spermatozoi mobili per ml
  • Uomini incapaci di fornire un campione di sperma eiaculato

Piano di studio

Questa sezione fornisce i dettagli del piano di studio, compreso il modo in cui lo studio è progettato e ciò che lo studio sta misurando.

Come è strutturato lo studio?

Dettagli di progettazione

  • Scopo principale: Trattamento
  • Assegnazione: Randomizzato
  • Modello interventistico: Assegnazione parallela
  • Mascheramento: Quadruplicare

Armi e interventi

Gruppo di partecipanti / Arm
Intervento / Trattamento
Sperimentale: Metodo del chip microfluidico
Verrà utilizzato il dispositivo di separazione dello sperma - dispositivo ZyMōt Multi 850µL (ZyMōt Fertility, Inc). La camera microfluidica verrà utilizzata in base alle istruzioni del produttore. 850 μL del campione di seme verranno aggiunti alla porta di ingresso del dispositivo e 750 μL di terreno di fertilizzazione verranno aggiunti alla porta di uscita. Il dispositivo verrà quindi incubato in 6% CO2 a 37°C. Dopo 30 minuti, 500 μL del campione preparato alla porta di uscita verranno rimossi e pipettati in una provetta etichettata. Il volume finale verrà regolato a 1 ml per il conteggio degli spermatozoi.
Il dispositivo ZyMōt Multi 850µL è uno strumento di laboratorio progettato per l'uso nelle procedure di tecnologia di riproduzione assistita (ART) come l'inseminazione intrauterina (IUI) e la fecondazione in vitro (IVF). Si tratta di un dispositivo per la preparazione dello sperma che utilizza una tecnologia proprietaria brevettata per isolare e selezionare lo sperma mobile da campioni di sperma da utilizzare nelle procedure ART.
Comparatore attivo: Metodo di centrifugazione in gradiente di densità
Dopo la liquefazione, la preparazione degli spermatozoi sarà completata mediante un metodo di centrifugazione in gradiente di densità discontinuo, utilizzando terreni in gradiente di densità dello sperma Pureception (CooperSurgical, Danimarca). Il pellet di sperma risultante dopo la centrifugazione verrà lavato una volta con il mezzo di lavaggio dello sperma (G-IVF Plus, Vitrolife, Svezia). Gli spermatozoi lavati verranno risospesi con lo stesso mezzo, regolando il volume finale a 500 μL. Il volume finale verrà regolato a 1 ml per il conteggio degli spermatozoi.
La centrifugazione in gradiente di densità è una tecnica di laboratorio utilizzata per separare e isolare diversi tipi di cellule o particelle in base alla loro densità. È comunemente usato in varie applicazioni, tra cui biologia cellulare, immunologia e tecnologia di riproduzione assistita (ART).

Cosa sta misurando lo studio?

Misure di risultato primarie

Misura del risultato
Misura Descrizione
Lasso di tempo
Frammentazione del DNA mediante saggio Comet
Lasso di tempo: 1 mese
Misurazione della frammentazione del DNA mediante analisi della cometa utilizzando il momento della coda dell'olivo come metrica quantitativa.
1 mese

Misure di risultato secondarie

Misura del risultato
Misura Descrizione
Lasso di tempo
Numero di spermatozoi
Lasso di tempo: 1 mese
Numero di spermatozoi
1 mese
Mobilità in avanti
Lasso di tempo: 1 mese
Valutazione della motilità in avanti degli spermatozoi mediante osservazione manuale utilizzando i criteri dell'Organizzazione mondiale della sanità (OMS).
1 mese
Morfologia
Lasso di tempo: 1 mese
Valutazione quantitativa della morfologia degli spermatozoi mediante osservazione manuale utilizzando i rigidi criteri di Tygerberg.
1 mese
Aneuploidia spermatica
Lasso di tempo: 1 mese
Misurazione quantitativa dell'aneuploidia spermatica mediante ibridazione fluorescente in situ (FISH) utilizzando sonde per i cromosomi X, Y, 13, 18 e 21.
1 mese
Analisi della reazione acrosomiale indotta dallo ionoforo di calcio A23187
Lasso di tempo: 1 mese
Misurazione quantitativa della reazione acrosomiale nello sperma indotta dallo ionoforo di calcio A23187 mediante citometria a flusso.
1 mese
Saggio di legame ovocita/emizona intatto
Lasso di tempo: 1 mese
Misurazione quantitativa del legame degli spermatozoi agli ovociti intatti o all'emizona utilizzando il test di legame dell'ovocita intatto/emizona.
1 mese
Velocità degli spermatozoi misurate da CASA
Lasso di tempo: 1 mese
Analisi quantitativa delle velocità degli spermatozoi utilizzando il sistema di analisi degli spermatozoi assistita da computer (CASA), inclusa la valutazione della motilità in avanti, della velocità curvilinea e della linearità.
1 mese
Analisi dell'intelligenza artificiale
Lasso di tempo: 1 mese
Analisi quantitativa della morfologia degli spermatozoi mediante algoritmi di intelligenza artificiale.
1 mese

Collaboratori e investigatori

Qui è dove troverai le persone e le organizzazioni coinvolte in questo studio.

Studiare le date dei record

Queste date tengono traccia dell'avanzamento della registrazione dello studio e dell'invio dei risultati di sintesi a ClinicalTrials.gov. I record degli studi e i risultati riportati vengono esaminati dalla National Library of Medicine (NLM) per assicurarsi che soddisfino specifici standard di controllo della qualità prima di essere pubblicati sul sito Web pubblico.

Studia le date principali

Inizio studio (Effettivo)

1 luglio 2023

Completamento primario (Stimato)

31 marzo 2025

Completamento dello studio (Stimato)

31 marzo 2025

Date di iscrizione allo studio

Primo inviato

29 giugno 2023

Primo inviato che soddisfa i criteri di controllo qualità

29 luglio 2023

Primo Inserito (Effettivo)

7 agosto 2023

Aggiornamenti dei record di studio

Ultimo aggiornamento pubblicato (Stimato)

5 dicembre 2024

Ultimo aggiornamento inviato che soddisfa i criteri QC

3 dicembre 2024

Ultimo verificato

1 dicembre 2024

Maggiori informazioni

Termini relativi a questo studio

Termini MeSH pertinenti aggiuntivi

Altri numeri di identificazione dello studio

  • UW 23-233

Piano per i dati dei singoli partecipanti (IPD)

Hai intenzione di condividere i dati dei singoli partecipanti (IPD)?

NO

Informazioni su farmaci e dispositivi, documenti di studio

Studia un prodotto farmaceutico regolamentato dalla FDA degli Stati Uniti

No

Studia un dispositivo regolamentato dalla FDA degli Stati Uniti

Sì

prodotto fabbricato ed esportato dagli Stati Uniti

Sì

Queste informazioni sono state recuperate direttamente dal sito web clinicaltrials.gov senza alcuna modifica. In caso di richieste di modifica, rimozione o aggiornamento dei dettagli dello studio, contattare register@clinicaltrials.gov. Non appena verrà implementata una modifica su clinicaltrials.gov, questa verrà aggiornata automaticamente anche sul nostro sito web .

Sottoscrivi