- ICH GCP
- Registro degli studi clinici negli Stati Uniti
- Sperimentazione clinica NCT05978947
Metodo del chip microfluidico rispetto al metodo di centrifugazione del gradiente di densità sui parametri del seme
Effetto della preparazione dello sperma mediante un metodo con chip microfluidico rispetto a un metodo di centrifugazione a gradiente di densità sui parametri dello sperma
Panoramica dello studio
Stato
Condizioni
Intervento / Trattamento
Descrizione dettagliata
L'infertilità colpisce una coppia su sei e sta diventando sempre più comune poiché molte donne ritardano il matrimonio e il parto per vari motivi. La fecondazione in vitro (IVF) è il trattamento più efficace per le coppie con infertilità di lunga data e ha curato milioni di coppie infertili in tutto il mondo da quando è stata segnalata la prima nascita della fecondazione in vitro più di 40 anni fa. Tuttavia, nonostante i progressi tecnologici, i tassi di gravidanza e natalità rimangono intorno al 35% e al 25% per trasferimento in Europa nel 2018. Tra tutte le coppie infertili, il 20-30% è dovuto all'infertilità maschile. I parametri seminali possono influenzare i risultati della fecondazione in vitro ed è stato ipotizzato che il contributo relativo dello sperma a un parto vivo sia di circa il 10-15%.
La fecondazione in vitro prevede iniezioni di ormoni per stimolare le ovaie di una donna a produrre un numero di ovociti che vengono raccolti con un'operazione minore e poi mescolati con lo sperma per formare embrioni in laboratorio. Di solito, uno o due embrioni vengono trasferiti nell'utero 2-5 giorni dopo il prelievo degli ovociti. Nella fecondazione in vitro, i campioni di sperma prodotti dai mariti vengono comunemente elaborati mediante un metodo di centrifugazione in gradiente di densità per isolare gli spermatozoi migliori per la fecondazione. La centrifugazione in gradiente di densità può arricchire gli spermatozoi con motilità relativamente buona e morfologia normale. È possibile recuperare gli spermatozoi da campioni di seme con una densità spermatica molto bassa. Può fornire una resa relativamente buona. Tuttavia, è necessaria una formazione tecnica per impostare il gradiente di densità costituito da due mezzi con densità diverse. Durante l'elaborazione del seme, gli spermatozoi vengono centrifugati attraverso il gradiente. È noto che la centrifugazione provoca notevoli danni agli spermatozoi da parte delle specie reattive dell'ossigeno prodotte durante il processo. È noto che le specie reattive dell'ossigeno sono una delle principali cause che portano alla frammentazione del DNA dello sperma e ai conseguenti esiti avversi, tra cui il fallimento dell'impianto e l'aborto spontaneo. Una meta-analisi ha mostrato che il danno al DNA dello sperma ha un effetto negativo sulla gravidanza clinica dopo la fecondazione in vitro.
Un chip microfluidico, che è un dispositivo miniaturizzato contenente canali e camere nell'intervallo di microscala per la preparazione di nanoparticelle, viene utilizzato di recente come tecnica alternativa di preparazione dello sperma. Utilizzando la tecnologia microfluidica, gli spermatozoi possono passare attraverso il chip che simula da vicino la selezione naturale nel microambiente del tratto genitale femminile. La tecnologia consente la selezione di spermatozoi mobili di alta qualità da campioni di seme senza la necessità di centrifugazione, portando a una ridotta formazione di specie reattive dell'ossigeno.
Gli studi hanno costantemente dimostrato che l'uso di un metodo con chip microfluidico riduce notevolmente la frammentazione del DNA e aumenta la motilità rispetto al metodo di centrifugazione in gradiente di densità.
Questo studio controllato randomizzato mira a confrontare l'effetto della preparazione dello sperma mediante un metodo con chip microfluidico rispetto a un metodo di centrifugazione in gradiente di densità sui parametri del seme prima dell'inizio di uno studio randomizzato che confronta gli effetti dei due metodi di preparazione dello sperma sui tassi cumulativi di nati vivi di in fecondazione in vitro.
Obiettivi:
Il primo obiettivo di questo studio controllato randomizzato è confrontare l'effetto della preparazione dello sperma mediante un metodo con chip microfluidico rispetto a una centrifugazione in gradiente di densità sui parametri del seme. L'ipotesi è che l'uso della preparazione dello sperma mediante un metodo con chip microfluidico migliori i parametri del seme.
Il secondo obiettivo è confrontare l'effetto di due diverse piattaforme di chip microfluidici sui parametri del seme.
Progetto di prova:
Verranno reclutati uomini che frequentano il Centro di riproduzione assistita ed embriologia, Queen Mary Hospital per il trattamento della fertilità.
Tipo di studio
Iscrizione (Stimato)
Fase
- Non applicabile
Contatti e Sedi
Contatto studio
- Nome: YU WING TONG, MBBS
- Numero di telefono: 92707722
- Email: ptong@connect.hku.hk
Luoghi di studio
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Hong Kong
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Hong Kong, Hong Kong, Cina
- Reclutamento
- Department of Obstetrics and Gynaecology
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Contatto:
- Ernest HY NG, MD
- Numero di telefono: 852-22553400
- Email: nghye@hku.hk
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Investigatore principale:
- Ernest HY NG, MD
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Criteri di partecipazione
Criteri di ammissibilità
Età idonea allo studio
- Bambino
- Adulto
- Adulto più anziano
Accetta volontari sani
Descrizione
Criterio di inclusione:
- Concentrazione spermatica del seme crudo con almeno 5 milioni di spermatozoi mobili per ml con un volume totale non inferiore a 1,5 ml.
Criteri di esclusione:
- Concentrazione spermatica del seme crudo inferiore a 5 milioni di spermatozoi mobili per ml
- Uomini incapaci di fornire un campione di sperma eiaculato
Piano di studio
Come è strutturato lo studio?
Dettagli di progettazione
- Scopo principale: Trattamento
- Assegnazione: Randomizzato
- Modello interventistico: Assegnazione parallela
- Mascheramento: Quadruplicare
Armi e interventi
Gruppo di partecipanti / Arm |
Intervento / Trattamento |
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Sperimentale: Metodo del chip microfluidico
Verrà utilizzato il dispositivo di separazione dello sperma - dispositivo ZyMōt Multi 850µL (ZyMōt Fertility, Inc).
La camera microfluidica verrà utilizzata in base alle istruzioni del produttore.
850 μL del campione di seme verranno aggiunti alla porta di ingresso del dispositivo e 750 μL di terreno di fertilizzazione verranno aggiunti alla porta di uscita.
Il dispositivo verrà quindi incubato in 6% CO2 a 37°C.
Dopo 30 minuti, 500 μL del campione preparato alla porta di uscita verranno rimossi e pipettati in una provetta etichettata.
Il volume finale verrà regolato a 1 ml per il conteggio degli spermatozoi.
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Il dispositivo ZyMōt Multi 850µL è uno strumento di laboratorio progettato per l'uso nelle procedure di tecnologia di riproduzione assistita (ART) come l'inseminazione intrauterina (IUI) e la fecondazione in vitro (IVF).
Si tratta di un dispositivo per la preparazione dello sperma che utilizza una tecnologia proprietaria brevettata per isolare e selezionare lo sperma mobile da campioni di sperma da utilizzare nelle procedure ART.
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Comparatore attivo: Metodo di centrifugazione in gradiente di densità
Dopo la liquefazione, la preparazione degli spermatozoi sarà completata mediante un metodo di centrifugazione in gradiente di densità discontinuo, utilizzando terreni in gradiente di densità dello sperma Pureception (CooperSurgical, Danimarca).
Il pellet di sperma risultante dopo la centrifugazione verrà lavato una volta con il mezzo di lavaggio dello sperma (G-IVF Plus, Vitrolife, Svezia). Gli spermatozoi lavati verranno risospesi con lo stesso mezzo, regolando il volume finale a 500 μL.
Il volume finale verrà regolato a 1 ml per il conteggio degli spermatozoi.
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La centrifugazione in gradiente di densità è una tecnica di laboratorio utilizzata per separare e isolare diversi tipi di cellule o particelle in base alla loro densità.
È comunemente usato in varie applicazioni, tra cui biologia cellulare, immunologia e tecnologia di riproduzione assistita (ART).
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Cosa sta misurando lo studio?
Misure di risultato primarie
Misura del risultato |
Misura Descrizione |
Lasso di tempo |
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Frammentazione del DNA mediante saggio Comet
Lasso di tempo: 1 mese
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Misurazione della frammentazione del DNA mediante analisi della cometa utilizzando il momento della coda dell'olivo come metrica quantitativa.
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1 mese
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Misure di risultato secondarie
Misura del risultato |
Misura Descrizione |
Lasso di tempo |
|---|---|---|
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Numero di spermatozoi
Lasso di tempo: 1 mese
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Numero di spermatozoi
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1 mese
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Mobilità in avanti
Lasso di tempo: 1 mese
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Valutazione della motilità in avanti degli spermatozoi mediante osservazione manuale utilizzando i criteri dell'Organizzazione mondiale della sanità (OMS).
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1 mese
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Morfologia
Lasso di tempo: 1 mese
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Valutazione quantitativa della morfologia degli spermatozoi mediante osservazione manuale utilizzando i rigidi criteri di Tygerberg.
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1 mese
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Aneuploidia spermatica
Lasso di tempo: 1 mese
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Misurazione quantitativa dell'aneuploidia spermatica mediante ibridazione fluorescente in situ (FISH) utilizzando sonde per i cromosomi X, Y, 13, 18 e 21.
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1 mese
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Analisi della reazione acrosomiale indotta dallo ionoforo di calcio A23187
Lasso di tempo: 1 mese
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Misurazione quantitativa della reazione acrosomiale nello sperma indotta dallo ionoforo di calcio A23187 mediante citometria a flusso.
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1 mese
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Saggio di legame ovocita/emizona intatto
Lasso di tempo: 1 mese
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Misurazione quantitativa del legame degli spermatozoi agli ovociti intatti o all'emizona utilizzando il test di legame dell'ovocita intatto/emizona.
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1 mese
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Velocità degli spermatozoi misurate da CASA
Lasso di tempo: 1 mese
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Analisi quantitativa delle velocità degli spermatozoi utilizzando il sistema di analisi degli spermatozoi assistita da computer (CASA), inclusa la valutazione della motilità in avanti, della velocità curvilinea e della linearità.
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1 mese
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Analisi dell'intelligenza artificiale
Lasso di tempo: 1 mese
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Analisi quantitativa della morfologia degli spermatozoi mediante algoritmi di intelligenza artificiale.
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1 mese
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Collaboratori e investigatori
Sponsor
Studiare le date dei record
Studia le date principali
Inizio studio (Effettivo)
Completamento primario (Stimato)
Completamento dello studio (Stimato)
Date di iscrizione allo studio
Primo inviato
Primo inviato che soddisfa i criteri di controllo qualità
Primo Inserito (Effettivo)
Aggiornamenti dei record di studio
Ultimo aggiornamento pubblicato (Stimato)
Ultimo aggiornamento inviato che soddisfa i criteri QC
Ultimo verificato
Maggiori informazioni
Termini relativi a questo studio
Termini MeSH pertinenti aggiuntivi
Altri numeri di identificazione dello studio
- UW 23-233
Piano per i dati dei singoli partecipanti (IPD)
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Informazioni su farmaci e dispositivi, documenti di studio
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