Эта страница была переведена автоматически, точность перевода не гарантируется. Пожалуйста, обратитесь к английской версии для исходного текста.

Метод микрофлюидного чипа по сравнению с методом центрифугирования в градиенте плотности на параметры спермы

3 декабря 2024 г. обновлено: Professor Ernest Hung-Yu Ng

Влияние подготовки спермы методом микрофлюидного чипа по сравнению с методом центрифугирования в градиенте плотности на параметры спермы

Бесплодие затрагивает многие пары, причем мужское бесплодие является частой причиной. Экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО) является эффективным методом лечения, но показатели его успеха невелики. Качество спермы может повлиять на результаты ЭКО, а текущий метод обработки спермы может повредить сперму и ДНК. В настоящее время ученые тестируют новый метод, называемый технологией микрофлюидных чипов, который уменьшает повреждение ДНК и увеличивает подвижность сперматозоидов. В этом исследовании будет сравниваться эффективность метода чипа и текущего метода в отношении качества спермы у мужчин, посещающих клинику по лечению бесплодия. В ходе исследования сперматозоиды, собранные случайным образом, будут распределены по одному из двух методов и оценены качество спермы с использованием различных тестов, а также разница в использовании двух разных платформ микрожидкостных чипов. Основным результатом будет фрагментация ДНК, а другие результаты включают количество сперматозоидов и их подвижность. Образцы спермы будут взяты у испытуемых для анализа, и что ни образцы, ни результаты не будут использоваться при лечении пациентов.

Обзор исследования

Подробное описание

Бесплодие затрагивает каждую шестую пару и становится все более распространенным явлением, поскольку многие женщины по разным причинам откладывают вступление в брак и рождение детей. Экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО) является наиболее эффективным методом лечения пар с давним бесплодием и вылечило миллионы бесплодных пар по всему миру с тех пор, как более 40 лет назад было сообщено о первых родах ЭКО. Однако, несмотря на достижения в области технологий, показатели беременности и рождаемости в Европе в 2018 году остаются на уровне около 35% и 25% на перевод. Среди всех бесплодных пар 20-30% приходится на мужское бесплодие. Параметры спермы могут влиять на результаты ЭКО, и было высказано предположение, что относительный вклад сперматозоидов в живорождение составляет около 10-15%.

ЭКО включает в себя инъекции гормонов, чтобы стимулировать яичники женщины к производству определенного количества ооцитов, которые собираются с помощью небольшой операции, а затем смешиваются со спермой для формирования эмбрионов в лаборатории. Обычно один или два эмбриона переносят в матку через 2-5 дней после забора ооцитов. В ЭКО образцы спермы, полученные мужьями, обычно обрабатываются методом центрифугирования в градиенте плотности, чтобы выделить лучшие сперматозоиды для оплодотворения. Центрифугирование в градиенте плотности может обогатить сперматозоиды с относительно хорошей подвижностью и нормальной морфологией. Можно выделить сперматозоиды из образцов спермы с очень низкой плотностью сперматозоидов. Он может обеспечить относительно хороший урожай. Однако для настройки градиента плотности, состоящего из двух сред с разной плотностью, требуется техническая подготовка. В процессе обработки спермы сперматозоиды центрифугируются в градиенте. Известно, что центрифугирование вызывает значительное повреждение сперматозоидов активными формами кислорода, образующимися в процессе. Известно, что активные формы кислорода являются одной из основных причин, приводящих к фрагментации ДНК сперматозоидов и последующим неблагоприятным последствиям, включая отказ от имплантации и выкидыш. Мета-анализ показал, что повреждение ДНК сперматозоидов оказывает негативное влияние на клиническую беременность после ЭКО.

Микрожидкостный чип, который представляет собой миниатюрное устройство, содержащее каналы и камеры в микромасштабном диапазоне для подготовки наночастиц, в последнее время используется в качестве альтернативного метода подготовки спермы. Используя микрожидкостную технологию, сперматозоиды могут проходить через чип, который точно имитирует естественный отбор в микросреде женских половых путей. Технология позволяет выбирать высококачественные подвижные сперматозоиды из образцов спермы без необходимости центрифугирования, что приводит к уменьшению образования активных форм кислорода.

Исследования последовательно демонстрировали, что использование метода микрофлюидного чипа значительно снижает фрагментацию ДНК и увеличивает подвижность по сравнению с методом центрифугирования в градиенте плотности.

Целью этого рандомизированного контролируемого исследования является сравнение влияния подготовки спермы методом микрожидкостного чипа и метода центрифугирования в градиенте плотности на параметры спермы до начала рандомизированного исследования, сравнивающего влияние двух методов подготовки спермы на кумулятивную частоту живорождения в экстракорпоральное оплодотворение.

Цели:

Первой целью этого рандомизированного контролируемого исследования является сравнение влияния подготовки спермы методом микрофлюидного чипа по сравнению с центрифугированием в градиенте плотности на параметры спермы. Гипотеза состоит в том, что использование подготовки спермы методом микрофлюидного чипа улучшает параметры спермы.

Вторая цель — сравнить влияние двух разных платформ микрофлюидных чипов на параметры спермы.

Пробный дизайн:

Будут набраны мужчины, посещающие Центр вспомогательной репродукции и эмбриологии больницы Королевы Марии для лечения бесплодия.

Тип исследования

Интервенционный

Регистрация (Оцененный)

80

Фаза

  • Непригодный

Контакты и местонахождение

В этом разделе приведены контактные данные лиц, проводящих исследование, и информация о том, где проводится это исследование.

Контакты исследования

  • Имя: YU WING TONG, MBBS
  • Номер телефона: 92707722
  • Электронная почта: ptong@connect.hku.hk

Места учебы

    • Hong Kong
      • Hong Kong, Hong Kong, Китай
        • Рекрутинг
        • Department of Obstetrics and Gynaecology
        • Контакт:
          • Ernest HY NG, MD
          • Номер телефона: 852-22553400
          • Электронная почта: nghye@hku.hk
        • Главный следователь:
          • Ernest HY NG, MD

Критерии участия

Исследователи ищут людей, которые соответствуют определенному описанию, называемому критериям приемлемости. Некоторыми примерами этих критериев являются общее состояние здоровья человека или предшествующее лечение.

Критерии приемлемости

Возраст, подходящий для обучения

  • Ребенок
  • Взрослый
  • Пожилой взрослый

Принимает здоровых добровольцев

Да

Описание

Критерии включения:

  • Концентрация спермы сырой спермы с содержанием не менее 5 миллионов подвижных сперматозоидов на мл при общем объеме не менее 1,5 мл.

Критерий исключения:

  • Концентрация сперматозоидов в сырой сперме менее 5 миллионов подвижных сперматозоидов на мл
  • Мужчины, которые не могут предоставить образец эякулированной спермы

Учебный план

В этом разделе представлена ​​подробная информация о плане исследования, в том числе о том, как планируется исследование и что оно измеряет.

Как устроено исследование?

Детали дизайна

  • Основная цель: Уход
  • Распределение: Рандомизированный
  • Интервенционная модель: Параллельное назначение
  • Маскировка: Четырехместный

Оружие и интервенции

Группа участников / Армия
Вмешательство/лечение
Экспериментальный: Метод микрофлюидного чипа
Будет использоваться устройство для разделения сперматозоидов - устройство ZyMōt Multi 850 мкл (ZyMōt Fertility, Inc). Микрожидкостная камера будет использоваться в соответствии с инструкциями производителя. Во входной порт устройства будет добавлено 850 мкл образца спермы, а в выходной порт будет добавлено 750 мкл среды для оплодотворения. Затем устройство будет инкубировано в 6% CO2 при 37°C. Через 30 минут 500 мкл подготовленного образца из выходного отверстия удаляют и пипеткой переносят в промаркированную пробирку. Окончательный объем будет доведен до 1 мл для подсчета сперматозоидов.
Устройство ZyMōt Multi 850 мкл представляет собой лабораторный прибор, предназначенный для использования в процедурах вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ), таких как внутриматочная инсеминация (ВМИ) и экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО). Это устройство для подготовки спермы, в котором используется запатентованная технология выделения и отбора подвижных сперматозоидов из образцов спермы для использования в процедурах ВРТ.
Активный компаратор: Метод центрифугирования в градиенте плотности
После разжижения подготовка спермы завершается методом центрифугирования в прерывистом градиенте плотности с использованием среды с градиентом плотности спермы Pureception (CooperSurgical, Дания). Полученный осадок спермы после центрифугирования один раз промывают средой для промывки спермы (G-IVF Plus, Vitrolife, Швеция). Промытые сперматозоиды ресуспендируют в той же среде, доводя конечный объем до 500 мкл. Окончательный объем будет доведен до 1 мл для подсчета сперматозоидов.
Центрифугирование в градиенте плотности — это лабораторный метод, используемый для разделения и выделения различных типов клеток или частиц в зависимости от их плотности. Он широко используется в различных областях, включая клеточную биологию, иммунологию и вспомогательные репродуктивные технологии (ВРТ).

Что измеряет исследование?

Первичные показатели результатов

Мера результата
Мера Описание
Временное ограничение
Фрагментация ДНК с помощью анализа Comet
Временное ограничение: 1 месяц
Измерение фрагментации ДНК с помощью анализа Comet с использованием момента хвоста Олив в качестве количественного показателя.
1 месяц

Вторичные показатели результатов

Мера результата
Мера Описание
Временное ограничение
Количество сперматозоидов
Временное ограничение: 1 месяц
Количество сперматозоидов
1 месяц
Передняя подвижность
Временное ограничение: 1 месяц
Оценка поступательной подвижности сперматозоидов путем ручного наблюдения с использованием критериев Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ).
1 месяц
Морфология
Временное ограничение: 1 месяц
Количественная оценка морфологии сперматозоидов путем ручного наблюдения с использованием строгих критериев Тигерберга.
1 месяц
Анеуплоидия сперматозоидов
Временное ограничение: 1 месяц
Количественное измерение анеуплоидии сперматозоидов с помощью флуоресцентной гибридизации in situ (FISH) с использованием зондов для хромосом X, Y, 13, 18 и 21.
1 месяц
Анализ акросомной реакции, индуцированной ионофором кальция A23187
Временное ограничение: 1 месяц
Количественное измерение акросомной реакции в сперме, индуцированной ионофором кальция A23187, с использованием проточной цитометрии.
1 месяц
Анализ связывания интактных ооцитов/гемизоны
Временное ограничение: 1 месяц
Количественное измерение связывания сперматозоидов с интактными ооцитами или гемизоной с использованием анализа связывания интактных ооцитов/гемизоны.
1 месяц
Скорость сперматозоидов, измеренная CASA
Временное ограничение: 1 месяц
Количественный анализ скорости сперматозоидов с использованием системы компьютерного анализа спермы (CASA), включая оценку подвижности вперед, криволинейной скорости и линейности.
1 месяц
Анализ искусственного интеллекта
Временное ограничение: 1 месяц
Количественный анализ морфологии сперматозоидов с использованием алгоритмов искусственного интеллекта.
1 месяц

Соавторы и исследователи

Здесь вы найдете людей и организации, участвующие в этом исследовании.

Даты записи исследования

Эти даты отслеживают ход отправки отчетов об исследованиях и сводных результатов на сайт ClinicalTrials.gov. Записи исследований и сообщаемые результаты проверяются Национальной медицинской библиотекой (NLM), чтобы убедиться, что они соответствуют определенным стандартам контроля качества, прежде чем публиковать их на общедоступном веб-сайте.

Изучение основных дат

Начало исследования (Действительный)

1 июля 2023 г.

Первичное завершение (Оцененный)

31 марта 2025 г.

Завершение исследования (Оцененный)

31 марта 2025 г.

Даты регистрации исследования

Первый отправленный

29 июня 2023 г.

Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества

29 июля 2023 г.

Первый опубликованный (Действительный)

7 августа 2023 г.

Обновления учебных записей

Последнее опубликованное обновление (Оцененный)

5 декабря 2024 г.

Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества

3 декабря 2024 г.

Последняя проверка

1 декабря 2024 г.

Дополнительная информация

Термины, связанные с этим исследованием

Дополнительные соответствующие термины MeSH

Другие идентификационные номера исследования

  • UW 23-233

Планирование данных отдельных участников (IPD)

Планируете делиться данными об отдельных участниках (IPD)?

НЕТ

Информация о лекарствах и устройствах, исследовательские документы

Изучает лекарственный продукт, регулируемый FDA США.

Нет

Изучает продукт устройства, регулируемый Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США.

Да

продукт, произведенный в США и экспортированный из США.

Да

Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .

Подписаться