Metoda chipów mikroprzepływowych a metoda wirowania w gradiencie gęstości na parametry nasienia

Niepłodność dotyka jedną na sześć par i jest coraz bardziej powszechna, ponieważ wiele kobiet opóźnia małżeństwo i poród z różnych powodów. Zapłodnienie in vitro (IVF) jest najskuteczniejszym sposobem leczenia par z długotrwałą niepłodnością i wyleczyło miliony niepłodnych par na całym świecie, odkąd ponad 40 lat temu zgłoszono pierwsze porody zapłodnienia in vitro. Jednak pomimo postępu technologicznego wskaźniki ciąż i urodzeń utrzymują się na poziomie około 35% i 25% na przeniesienie w Europie w 2018 r. Wśród wszystkich niepłodnych par 20-30% jest spowodowanych niepłodnością męską. Parametry nasienia mogą wpływać na wyniki IVF i postawiono hipotezę, że względny udział plemników w żywym porodzie wynosi około 10-15%.

IVF obejmuje zastrzyki hormonalne w celu stymulacji jajników kobiety do produkcji pewnej liczby komórek jajowych, które są pobierane podczas drobnej operacji, a następnie mieszane z plemnikami w celu utworzenia zarodków w laboratorium. Zwykle jeden lub dwa zarodki są przenoszone do macicy 2-5 dni po pobraniu komórki jajowej. W IVF próbki nasienia wyprodukowane przez mężów są zwykle przetwarzane metodą wirowania w gradiencie gęstości w celu wyizolowania lepszych plemników do zapłodnienia. Wirowanie w gradiencie gęstości może wzbogacić plemniki o stosunkowo dobrej ruchliwości i prawidłowej morfologii. Możliwe jest odzyskanie plemników z próbek nasienia o bardzo niskiej gęstości plemników. Może zapewnić stosunkowo dobre plony. Jednak ustawienie gradientu gęstości składającego się z dwóch mediów o różnych gęstościach wymaga przeszkolenia technicznego. Podczas przetwarzania nasienia plemniki są odwirowywane przez gradient. Wiadomo, że wirowanie powoduje znaczne uszkodzenia plemników przez reaktywne formy tlenu wytwarzane podczas tego procesu. Wiadomo, że reaktywne formy tlenu są jedną z głównych przyczyn fragmentacji DNA plemników i późniejszych niepożądanych skutków, w tym niepowodzenia implantacji i poronienia. Metaanaliza wykazała, że ​​uszkodzenie DNA plemników ma negatywny wpływ na ciążę kliniczną po zapłodnieniu in vitro.

Chip mikroprzepływowy, który jest zminiaturyzowanym urządzeniem zawierającym kanały i komory w zakresie mikroskali do przygotowania nanocząstek, jest ostatnio stosowany jako alternatywna technika przygotowania nasienia. Dzięki zastosowaniu technologii mikroprzepływowej plemniki mogą przejść przez chip, który dokładnie symuluje naturalną selekcję w mikrośrodowisku żeńskich narządów płciowych. Technologia umożliwia selekcję wysokiej jakości ruchliwych plemników z próbek nasienia bez konieczności wirowania, co prowadzi do ograniczenia powstawania reaktywnych form tlenu.

Badania konsekwentnie wykazały, że zastosowanie metody chipów mikroprzepływowych znacznie zmniejsza fragmentację DNA i zwiększa ruchliwość w porównaniu z metodą wirowania w gradiencie gęstości.

Celem tego randomizowanego, kontrolowanego badania jest porównanie wpływu przygotowania nasienia metodą chipa mikroprzepływowego z metodą wirowania w gradiencie gęstości na parametry nasienia przed rozpoczęciem randomizowanego badania porównującego wpływ dwóch metod przygotowania nasienia na skumulowany wskaźnik żywych urodzeń w zapłodnienie in vitro.

Cele:

Pierwszym celem tej randomizowanej kontrolowanej próby jest porównanie wpływu przygotowania plemników metodą mikroprzepływową z chipem w porównaniu z wirowaniem w gradiencie gęstości na parametry nasienia. Postawiono hipotezę, że zastosowanie preparatów nasienia metodą chipów mikroprzepływowych poprawia parametry nasienia.

Drugim celem jest porównanie wpływu dwóch różnych mikroprzepływowych platform czipowych na parametry nasienia.

Projekt próbny:

Zostaną zatrudnieni mężczyźni uczęszczający do Centrum Wspomaganego Rozrodu i Embriologii Szpitala Queen Mary w celu leczenia niepłodności.