Método de chip microfluídico versus método de centrifugação de gradiente de densidade em parâmetros de sêmen

A infertilidade afeta um em cada seis casais e está se tornando mais comum, pois muitas mulheres adiam o casamento e o parto por vários motivos. A fertilização in vitro (FIV) é o tratamento mais eficaz para casais com infertilidade de longa data e tratou milhões de casais inférteis em todo o mundo desde que o primeiro nascimento de FIV foi relatado há mais de 40 anos. No entanto, apesar dos avanços tecnológicos, as taxas de gravidez e natalidade permanecem em torno de 35% e 25% por transferência na Europa em 2018. Entre todos os casais inférteis, 20-30% são devidos à infertilidade masculina. Os parâmetros do sêmen podem afetar os resultados da fertilização in vitro e foi levantada a hipótese de que a contribuição relativa do esperma para um nascido vivo é de cerca de 10-15%.

A fertilização in vitro envolve injeções de hormônios para estimular os ovários de uma mulher a produzir um número de oócitos que são coletados por uma pequena operação e depois misturados com esperma para formar embriões em laboratório. Normalmente, um ou dois embriões são transferidos para o útero 2 a 5 dias após a coleta do oócito. Na fertilização in vitro, as amostras de sêmen produzidas pelos maridos são comumente processadas por um método de centrifugação por gradiente de densidade para isolar os melhores espermatozóides para a fertilização. A centrifugação do gradiente de densidade pode enriquecer os espermatozóides com motilidade relativamente boa e morfologia normal. É possível recuperar espermatozóides de amostras de sêmen com uma densidade espermática muito baixa. Pode fornecer um rendimento relativamente bom. No entanto, requer treinamento técnico para configurar o gradiente de densidade composto por duas mídias com densidades diferentes. Durante o processamento do sêmen, os espermatozóides são centrifugados através do gradiente. Sabe-se que a centrifugação causa danos consideráveis ​​aos espermatozoides pelas espécies reativas de oxigênio produzidas durante o processo. Sabe-se que as espécies reativas de oxigênio são uma das principais causas que levam à fragmentação do DNA do esperma e subsequentes resultados adversos, incluindo falha na implantação e aborto espontâneo. Uma meta-análise mostrou que o dano ao DNA do esperma tem um efeito negativo na gravidez clínica após a fertilização in vitro.

Um chip microfluídico, que é um dispositivo miniaturizado contendo canais e câmaras na faixa de microescala para preparação de nanopartículas, está sendo usado recentemente como uma técnica alternativa de preparação de esperma. Ao empregar a tecnologia microfluídica, os espermatozóides podem passar pelo chip que simula de perto a seleção natural no microambiente do trato genital feminino. A tecnologia permite a seleção de espermatozóides móveis de alta qualidade a partir de amostras de sêmen sem a necessidade de centrifugação, levando à redução da formação de espécies reativas de oxigênio.

Estudos demonstraram consistentemente que o uso de um método de chip microfluídico reduz muito a fragmentação do DNA e aumenta a motilidade quando comparado com o método de centrifugação por gradiente de densidade.

Este estudo randomizado controlado visa comparar o efeito da preparação de esperma por um método de chip microfluídico versus um método de centrifugação de gradiente de densidade nos parâmetros do sêmen antes do início de um estudo randomizado comparando os efeitos dos dois métodos de preparação de esperma nas taxas cumulativas de nascidos vivos em fertilização in vitro.

Objetivos.

O primeiro objetivo deste estudo randomizado controlado é comparar o efeito da preparação de esperma por um método de chip microfluídico versus uma centrifugação de gradiente de densidade nos parâmetros do sêmen. A hipótese é que o uso da preparação de esperma por um método de chip microfluídico melhora os parâmetros do sêmen.

O segundo objetivo é comparar o efeito de duas plataformas diferentes de chips microfluídicos nos parâmetros do sêmen.

Projeto de teste:

Serão recrutados homens atendidos no Centro de Reprodução Assistida e Embriologia do Hospital Queen Mary para tratamento de fertilidade.