Kontrolowane badanie pilotażowe in vivo mające na celu ocenę odzyskiwania i przeżywalności znakowanych radioaktywnie autologicznych składników płytek krwi poddanych zabiegowi INTERCEPT, przechowywanych przez 7 dni w 35% osoczu i 65% InterSolu, przechowywanych w wyniku aferezy w 35% osoczu i 65% InterSolu oraz przez 7 dni przechowywanych składników płytek w wyniku aferezy w 100% osoczu

Dwa etapy tego badania pilotażowego obejmują: pobranie pojedynczej lub podwójnej dawki aferezy płytek krwi, inaktywację patogenu za pomocą leczenia INTERCEPT, przechowywanie przez 7 dni, pobranie świeżych płytek krwi, radioznakowanie, infuzję świeżych i przechowywanych autologicznych płytek krwi znakowanych radioaktywnie, poddanych działaniu INTERCEPT, oraz pobieranie próbek krwi w celu oceny regeneracji i przeżycia płytek krwi (długość życia).

Na etapie A płytki krwi po aferezie zostaną pobrane za pomocą separatora Amicus i przechowywane przez 7 dni w 35% osoczu i 65% InterSolu.

Na etapie B płytki krwi po aferezie zostaną pobrane przy użyciu separatora Trima i przechowywane przez 7 dni w 100% osoczu.

Procedury dla obu etapów będą następujące: W dniu 0 od każdego zdrowego ochotnika pobrano płytki krwi metodą aferezy. Leczenie INTERCEPT rozpocznie się w dniu oddania (dzień 0) lub przed końcem dnia następującego po oddaniu (dzień 1). Płytki krwi będą następnie przechowywane przez 7 dni po pobraniu (dzień 7). Porcje do oceny czynności płytek in vitro zostaną pobrane w dniu 0/1 po leczeniu INTERCEPT i w dniu 7. Próbka do wykrywania bakterii zostanie pobrana w dniu 5.

Siódmego dnia zdrowi ochotnicy powrócą do laboratorium i 43 ml krwi zostanie pobrane do strzykawki zawierającej 9 ml antykoagulantu cytrynianowego roztworu dekstrozy, wzór A (ACD-A). Z tej próbki zostaną przygotowane świeże płytki krwi. Porcja (10-20 ml) przechowywanych (potraktowanych INTERCEPT) płytek krwi zostanie usunięta aseptycznie z pojemnika testowego każdego osobnika. Wcześniej przechowywane (testowe) i świeże (kontrolne) płytki krwi będą znakowane radioaktywnie zgodnie z przydziałem randomizacji albo 51Cr (≤20 μCi) jako radiochromian sodu (Na251CrO4), albo 111In (≤15 μCi) jako oksyna indu, zgodnie z procedurami znakowania i płukania nakreślone przez Biomedical Excellence for Safer Transfusion (BEST) Collaborative. Oznaczenia izotopowe zostaną określone za pomocą tabeli liczb losowych, tak że równymi liczbami świeżych i przechowywanych (poddanych działaniu INTERCEPT) płytek krwi będzie oznaczonych każdym izotopem. Próbki świeżych i przechowywanych płytek krwi będą radioznakowane w probówkach przy użyciu standardowych technik. Po wyznakowaniu radioaktywnym, autologiczne świeże i przechowywane płytki krwi zostaną jednocześnie podane osobnikowi (około 10-30 ml). Przed infuzją wymagany jest ujemny wynik testu na obecność bakterii i ujemny wynik testu ciążowego u kobiet w wieku rozrodczym.

Próbki krwi do pomiarów radioaktywności zostaną pobrane w 0 (przed infuzją), 0,5, 1 i 2 godziny po infuzji, a następnie zostanie pobranych 6 kolejnych próbek 1, 2, 3, 4 (lub 6), 7±1 i 10±1 dni po infuzji. Ponadto, jeśli jest to logistycznie wykonalne, dodatkowa próbka zostanie pobrana 5 dni po infuzji (opcjonalnie).

Pomiary radioaktywności Próbki zostaną pobrane ze znakowanych radioaktywnie świeżych i przechowywanych płytek krwi przed infuzją i wykorzystane jako standard radioaktywny. Poprzez pomiar podanej objętości zostanie obliczona całkowita dawka podanej radioaktywności. Elucja znacznika in vitro z przetoczonych płytek krwi zostanie określona dwoma metodami oceny elucji, jak również elucja radioaktywności in vivo z seryjnych próbek krwi uzyskanych po infuzji wyznakowanych płytek krwi.

Wzorzec oraz próbki pełnej krwi pacjenta zostaną skorygowane pod kątem elucji, a także aktywności resztkowej we frakcji komórkowej w dniu 8. Pierwsze cztery punkty danych po infuzji zostaną wykorzystane do obliczenia odzysku i przeżycia in vivo po dokonaniu wszystkich korekt radioaktywnych. Radioaktywność próbek zostanie określona za pomocą licznika gamma. Model wielokrotnego trafienia z komputerowym programem „COST” zostanie wykorzystany do oszacowania odzyskiwania i przeżycia radioaktywnie znakowanych płytek krwi.