Un estudio piloto controlado, in vivo, para evaluar la recuperación y supervivencia de componentes de plaquetas de aféresis almacenadas durante 7 días tratadas con INTERCEPT autólogas radiomarcadas en 35 % de plasma y 65 % de InterSol y componentes de plaquetas de aféresis almacenadas durante 7 días en 100 % de plasma

Las dos etapas de este estudio piloto consisten en lo siguiente: recolección de aféresis de plaquetas de dosis única o doble, inactivación de patógenos con tratamiento INTERCEPT, almacenamiento durante 7 días, recolección de plaquetas frescas, radiomarcaje, infusión de plaquetas autólogas radiomarcadas tratadas con INTERCEPT frescas y almacenadas, y recolección de muestras de sangre para evaluar la recuperación y supervivencia de las plaquetas (vida útil).

En la etapa A, las plaquetas de aféresis se recolectarán utilizando el separador Amicus y se almacenarán durante 7 días en 35 % de plasma y 65 % de InterSol.

En la Etapa B, las plaquetas de aféresis se recolectarán utilizando el separador Trima y se almacenarán durante 7 días en plasma al 100 %.

Los procedimientos para ambas etapas serán los siguientes: en el día 0, se recolectan las plaquetas de aféresis de cada sujeto voluntario sano. El tratamiento INTERCEPT comenzará el día de la donación (Día 0) o antes del final del día siguiente a la donación (Día 1). Luego, las plaquetas se almacenarán durante 7 días después de la recolección (Día 7). Se tomarán alícuotas para la función plaquetaria in vitro el día 0/1 después del tratamiento con INTERCEPT y el día 7. Se tomará una alícuota para la detección bacteriana el día 5.

El día 7, los voluntarios sanos regresarán al laboratorio y se extraerán 43 ml de sangre en una jeringa que contiene 9 ml de solución anticoagulante de citrato y dextrosa, fórmula A (ACD-A). Se prepararán plaquetas frescas a partir de esta muestra. Se retirará asépticamente una alícuota (10-20 ml) de las plaquetas almacenadas (tratadas con INTERCEPT) del recipiente de prueba de cada sujeto. Las plaquetas previamente almacenadas (Prueba) y frescas (Control) se radiomarcarán de acuerdo con la asignación aleatoria con 51Cr (≤20 μCi) como radiocromato de sodio (Na251CrO4) o 111In (≤15 μCi) como oxina de indio, siguiendo los procedimientos de etiquetado y lavado. descrito por la Excelencia biomédica para transfusiones más seguras (BEST) Collaborative. Las etiquetas de los isótopos se determinarán mediante una tabla de números aleatorios, de modo que se etiquetarán cantidades iguales de plaquetas frescas y almacenadas (tratadas con INTERCEPT) con cada isótopo. Se radiomarcarán alícuotas de las plaquetas frescas y almacenadas en tubos con las técnicas estándar. Después del radiomarcaje, las plaquetas autólogas frescas y almacenadas se infundirán simultáneamente en el sujeto (aproximadamente 10-30 ml). Se requiere una prueba de detección de bacterias negativa y una prueba de embarazo negativa para mujeres en edad fértil antes de la infusión.

Se extraerán muestras de sangre para mediciones de radiactividad a las 0 (preinfusión), 0,5, 1 y 2 horas después de la infusión, y luego se extraerán 6 muestras más 1, 2, 3, 4 (o 6), 7±1 , y 10 ± 1 días después de la infusión. Además, cuando sea logísticamente factible, se obtendrá una muestra adicional 5 días después de la infusión (opcional).

Mediciones de radiactividad Las muestras se obtendrán de las plaquetas frescas y almacenadas radiomarcadas antes de la infusión y se utilizarán como estándar radiactivo. Al medir el volumen infundido, se calculará la dosis total de radiactividad infundida. La elución in vitro del marcador de las plaquetas transfundidas se determinará mediante dos métodos de evaluación de elución, así como la elución in vivo de la radiactividad de las muestras de sangre en serie obtenidas después de la infusión de las plaquetas marcadas.

El estándar, así como las muestras de sangre total del sujeto, se corregirán por elución y también por la actividad residual en la fracción celular el día 8. Los primeros cuatro puntos de datos posteriores a la infusión se utilizarán para calcular las recuperaciones y supervivencias in vivo después de que se hayan realizado todas las correcciones radiactivas. La radiactividad de las muestras se determinará mediante el uso de un contador gamma. Se utilizará un modelo de impactos múltiples, con un programa computarizado "COST", para estimar la recuperación y supervivencia de las plaquetas marcadas radiactivamente.