Um estudo piloto controlado, in vivo, para avaliar a recuperação e a sobrevivência de componentes plaquetários de aférese armazenados de 7 dias tratados com INTERCEPT radiomarcados em 35% de plasma e 65% de InterSol e componentes de plaquetas de aférese armazenados de 7 dias em 100% de plasma

As duas etapas deste estudo piloto consistem no seguinte: coleta por aférese de plaquetas em dose única ou dupla, inativação do patógeno com tratamento INTERCEPT, armazenamento por 7 dias, coleta de plaquetas frescas, marcação radioativa, infusão de plaquetas autólogas marcadas radioativamente tratadas com INTERCEPT armazenadas, e coleta de amostras de sangue para avaliação da recuperação e sobrevivência plaquetária (tempo de vida).

Na Fase A, as plaquetas de aférese serão coletadas com o separador Amicus e armazenadas por 7 dias em 35% Plasma e 65% InterSol.

Na Fase B, as plaquetas de aférese serão coletadas usando o separador Trima e armazenadas por 7 dias em plasma 100%.

Os procedimentos para ambos os estágios serão os seguintes: No Dia 0, cada indivíduo voluntário saudável coleta plaquetas por aférese. O tratamento INTERCEPT começará no dia da dádiva (Dia 0) ou antes do fim do dia seguinte à dádiva (Dia 1). As plaquetas serão então armazenadas por 7 dias após a coleta (Dia 7). As alíquotas para a função plaquetária in vitro serão coletadas no dia 0/1 após o tratamento INTERCEPT e no dia 7. Uma alíquota para detecção bacteriana será coletada no dia 5.

No dia 7, voluntários saudáveis ​​retornarão ao laboratório e 43 mL de sangue serão colhidos em uma seringa contendo 9 mL de Solução Anticoagulante Citrato Dextrose, Fórmula A (ACD-A). Plaquetas frescas serão preparadas a partir desta amostra. Uma alíquota (10-20 mL) das plaquetas armazenadas (tratadas com INTERCEPT) será removida assepticamente do recipiente de teste de cada indivíduo. As plaquetas previamente armazenadas (teste) e frescas (controle) serão radiomarcadas de acordo com a atribuição de randomização com 51Cr (≤20 μCi) como radiocromato de sódio (Na251CrO4) ou 111In (≤15 μCi) como oxina de índio, seguindo os procedimentos de marcação e lavagem delineado pela Biomedical Excellence for Safer Transfusion (BEST) Collaborative. Os rótulos de isótopos serão determinados por uma tabela de números aleatórios de modo que números iguais de plaquetas frescas e armazenadas (tratadas com INTERCEPT) sejam marcados com cada isótopo. Alíquotas de plaquetas frescas e armazenadas serão radiomarcadas em tubos com as técnicas padrão. Após a marcação radioativa, as plaquetas autólogas frescas e armazenadas serão infundidas simultaneamente no sujeito (aproximadamente 10-30 mL). Teste de detecção de bactérias negativo e teste de gravidez negativo para mulheres com potencial para engravidar são necessários antes da infusão.

Amostras de sangue para medições de radioatividade serão coletadas em 0 (pré-infusão), 0,5, 1 e 2 horas após a infusão e, em seguida, mais 6 amostras serão coletadas 1, 2, 3, 4 (ou 6), 7±1 , e 10±1 dias pós-infusão. Além disso, quando logisticamente viável, uma amostra adicional será obtida 5 dias após a infusão (opcional).

Medições de radioatividade As amostras serão obtidas das plaquetas frescas e armazenadas radiomarcadas antes da infusão e usadas como um padrão radioativo. Medindo o volume infundido, será calculada a dose total de radioatividade infundida. A eluição in vitro do marcador das plaquetas transfundidas será determinada por dois métodos de avaliação da eluição, bem como a eluição in vivo da radioatividade das amostras seriadas de sangue obtidas pós-infusão das plaquetas marcadas.

O padrão, bem como as amostras de sangue total do sujeito, serão corrigidos para eluição e também para a atividade residual na fração celular no Dia 8. Os primeiros quatro pontos de dados pós-infusão serão usados ​​para calcular recuperações e sobrevivências in vivo após todas as correções radioativas terem sido feitas. A radioatividade das amostras será determinada pelo uso de um contador gama. Um modelo de múltiplas ocorrências, com um programa computadorizado "COST", será usado para estimar a recuperação e sobrevivência das plaquetas marcadas radioativamente.