Uno studio pilota controllato, in vivo, per valutare il recupero e la sopravvivenza di componenti piastrinici per aferesi conservati per 7 giorni trattati con INTERCEPT autologo radiomarcato in plasma al 35% e componenti piastrinici per aferesi al 65% e per aferesi per 7 giorni in plasma al 100%

Le due fasi di questo studio pilota consistono nelle seguenti: raccolta di aferesi piastrinica a dose singola o doppia, inattivazione del patogeno con trattamento INTERCEPT, conservazione per 7 giorni, raccolta di piastrine fresche, radiomarcatura, infusione di piastrine autologhe radiomarcate fresche e conservate trattate con INTERCEPT, e raccolta di campioni di sangue per la valutazione del recupero e della sopravvivenza delle piastrine (durata della vita).

Nella Fase A, le piastrine di aferesi saranno raccolte utilizzando il separatore Amicus e conservate per 7 giorni in 35% Plasma e 65% InterSol.

Nella fase B, le piastrine di aferesi saranno raccolte utilizzando il separatore Trima e conservate per 7 giorni in plasma al 100%.

Le procedure per entrambe le fasi saranno le seguenti: Il giorno 0, ogni soggetto volontario sano ha le piastrine di aferesi raccolte. Il trattamento INTERCEPT inizierà il giorno della donazione (giorno 0) o prima della fine del giorno successivo alla donazione (giorno 1). Le piastrine verranno quindi conservate per 7 giorni dopo la raccolta (giorno 7). Le aliquote per la funzione piastrinica in vitro verranno prelevate il giorno 0/1 dopo il trattamento con INTERCEPT e il giorno 7. Un'aliquota per il rilevamento batterico verrà prelevata il giorno 5.

Il giorno 7, i volontari sani torneranno al laboratorio e 43 mL di sangue verranno aspirati in una siringa contenente 9 mL di soluzione di destrosio citrato anticoagulante, Formula A (ACD-A). Da questo campione verranno preparate piastrine fresche. Un'aliquota (10-20 mL) delle piastrine conservate (trattate con INTERCEPT) verrà rimossa asetticamente dal contenitore del test di ciascun soggetto. Le piastrine precedentemente conservate (test) e fresche (controllo) saranno radiomarcate in base all'assegnazione di randomizzazione con 51Cr (≤20 μCi) come sodio radiocromato (Na251CrO4) o 111In (≤15 μCi) come indio ossina, seguendo le procedure di etichettatura e lavaggio delineato dalla Biomedical Excellence for Safer Transfusion (BEST) Collaborative. Le etichette degli isotopi saranno determinate da una tabella di numeri casuali in modo tale che un numero uguale di piastrine fresche e conservate (trattate con INTERCEPT) sarà etichettato con ciascun isotopo. Aliquote delle piastrine fresche e conservate saranno radiomarcate in provette con le tecniche standard. Dopo la radiomarcatura, le piastrine autologhe fresche e conservate saranno simultaneamente infuse nel soggetto (circa 10-30 mL). Prima dell'infusione è necessario un test negativo per la rilevazione dei batteri e un test di gravidanza negativo per le donne in età fertile.

I campioni di sangue per le misurazioni della radioattività verranno prelevati a 0 (pre-infusione), 0,5, 1 e 2 ore dopo l'infusione, quindi verranno prelevati altri 6 campioni 1, 2, 3, 4 (o 6), 7±1 e 10±1 giorni dopo l'infusione. Inoltre, quando logisticamente fattibile, verrà prelevato un campione aggiuntivo 5 giorni dopo l'infusione (facoltativo).

Misurazioni della radioattività I campioni saranno ottenuti dalle piastrine radiomarcate fresche e conservate prima dell'infusione e utilizzate come standard radioattivo. Misurando il volume infuso si calcolerà la dose totale di radioattività infusa. L'eluizione in vitro del marcatore dalle piastrine trasfuse sarà determinata mediante due metodi di valutazione dell'eluizione, così come l'eluizione in vivo della radioattività dai campioni di sangue seriali ottenuti dopo l'infusione delle piastrine marcate.

Lo standard così come i campioni di sangue intero del soggetto saranno corretti per l'eluizione e anche per l'attività residua nella frazione cellulare il giorno 8. I primi quattro punti dati post-infusione verranno utilizzati per calcolare i recuperi e le sopravvivenze in vivo dopo che tutte le correzioni radioattive sono state effettuate. La radioattività dei campioni sarà determinata mediante l'uso di un gamma counter. Un modello a colpi multipli, con un programma computerizzato "COST", verrà utilizzato per stimare il recupero e la sopravvivenza delle piastrine marcate radioattivamente.